河北省自然科学基金(C2006000580)
- 作品数：30 被引量：135H指数：9
- 相关作者：张柳田发明韩大成张辉刘晓宁更多>>
- 相关机构：华北煤炭医学院附属医院河北医科大学河北联合大学附属医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 辛伐他汀促进大鼠BMSCs分化为成骨细胞被引量：2
- 2010年
- 目的探讨辛伐他汀对体外诱导培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用,以及对大鼠BMSCs基因表达谱的影响。方法取6周龄雄性SD大鼠股骨、胫骨BMSCs进行培养,第3天改用成骨诱导培养基,同时实验组(SIM)加入辛伐他汀(1×10-7mol/L),对照组(V)加入等量溶剂。细胞培养的第14天进行碱性磷酸酶(ALP)比活性测定;第21天进行如下检测:Von Kossa染色观察细胞外基质矿化情况;提取、纯化mRNA,逆转录合成cDNA,荧光标记后与大鼠全基因组寡核苷酸芯片(G4130A)杂交,扫描后筛选出差异表达的基因,Real-time RT-PCR验证部分差异表达基因mRNA的表达。结果 (1)SIM组ALP比活性及细胞外基质矿化能力明显强于V组(P<0.05);(2)在22 575个基因中,共检测出678个差异表达基因,其中包括ALP1、TGFβ1、OCN、DLX5、Axin2、BMP-2、IBSP、MMP13等与成骨分化相关的基因。结论辛伐他汀能够促进体外诱导培养的BMSCs向成骨细胞分化,其作用机制可能与调控多种成骨相关基因的表达有关。
- 田发明张柳孟亚强张英泽
- 关键词：辛伐他汀寡核苷酸芯片骨髓基质干细胞成骨细胞基因表达
- Wnt信号对小鼠骨作用的研究
- 2008年
- 张辉张柳
- 关键词：WNT信号动物模型小鼠
- 辛伐他汀部分阻止尾悬吊大鼠股骨近端骨量的丢失被引量：3
- 2013年
- 目的观察辛伐他汀体内给药对尾悬吊大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖﹑分化的影响。方法 18只9周龄雄性SD大鼠被随机分成3组,每组6只:第一组(G1),正常对照组,每天蒸馏水灌胃;第二组(G2),尾悬吊组,每天蒸馏水灌胃;第三组(G3),尾悬吊大鼠每天20 mg/kg辛伐他汀灌胃。实验持续3周,所有大鼠在最后一次灌胃的第二天被处死,取大鼠右侧股骨用双能X线骨密度仪测量骨密度。取大鼠左侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨细胞定向培养,并作如下检测:碱性磷酸酶活性和von Kossa染色分别在细胞培养第16天和25天检测。在细胞培养第21天,采用Real-time RT-PCR检测BMP-2、RANKL mRNA的表达。结果尾悬吊组大鼠骨量低于对照组。全长骨密度(tBMD)及远端骨密度(dBMD)G1组显著高于G2、G3组,近端骨密度(pBMD)G1组显著高于G2组,但与G3组没有区别,G3组高于G2组但没有显著差别。细胞外基质矿化能力(von Kossa染色)、ALP比活性以及RANKL、BMP-2 mRNA水平各组间均没有显著差别。结论尾悬吊3周可致大鼠骨骨质疏松,辛伐他汀体内给药可部分阻止股骨近端骨量丢失,但不能显著促进骨髓基质干细胞向成骨细胞分化。
- 田发明张柳邢磊范新昊张楠吕志伟
- 关键词：辛伐他汀尾悬吊骨髓基质细胞成骨细胞
- 辛伐他汀对BMSCs成骨分化早期β-catenin及Runx2表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期β-catenin、Runx2表达的影响,探讨辛伐他汀在此过程中的作用及其作用机制。方法 20只4周龄雌性SD大鼠应用颈椎脱位法处死,无菌条件下取双侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养。取相同第二代细胞随机分为实验组和对照组,实验组加入10-7mol/L的辛伐他汀(Simvastatin,SIM)(SIM溶于DMSO后制成母液再用完全培养基进行稀释),对照组加入含有等量DMSO的完全培养基。两组细胞在加入SIM 12 h和36 h后分别提取蛋白质和RNA,采用Western Blot法检测两组细胞β-catenin、Runx2蛋白的表达。采用实时定量-PCR法检测β-catenin、Runx2mRNA的表达。结果 (1)Western Blot结果:辛伐他汀干预12h后β-catenin和Runx2蛋白表达水平实验组与对照组相比无显著增高,两组间的差异均无统计学意义(P>0.05);辛伐他汀干预36h后实验组与对照组相比β-catenin和Runx2蛋白表达水平显著增高,两组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)实时定量-PCR结果:辛伐他汀干预12 h和36 h后β-catenin mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达增高,两组间的差异有统计学意义(P<0.05);辛伐他汀干预12 h和36 h后Runx2 mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达有一定程度的增高,但两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期有一定作用,这涉及到Wnt信号通路的活化,但是在不同的时间点所起作用有所差别。
- 贾忠宝田发明崔纳张柳
- 关键词：辛伐他汀骨髓基质干细胞Β-CATENINRUNX2
- 辛伐他汀在人骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用被引量：14
- 2007年
- 目的观察辛伐他汀对体外培养的人骨髓基质干细胞(Human Bone Marrow Stromal cells,hBMCs)成骨分化功能的影响,探讨其刺激成骨的作用机制。方法体外培养来自于外伤所致股骨颈骨折患者的骨髓基质干细胞,传代后实验组加入1×10-7mol/L的辛伐他汀,在不同时间点采用ELISA检测核转录因子1(Core Binding Factor1,Cbfa1)与DNA的结合活性,碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)比活性,及放射免疫法检测骨钙素(Osteocalcin,OCN)含量。结果在辛伐他汀作用后,实验组与对照组比较,实验组Cbfa1因子与DNA的结合活性增高,ALP比活性增高且骨钙素含量增加。结论1×10-7mol/L辛伐他汀能够促进人骨髓基质干细胞成骨分化,此种促进作用可能与辛伐他汀增加其分化过程中相关转录因子的活性有关。
- 白宇张柳吕志伟曲强
- 关键词：骨髓基质干细胞成骨细胞辛伐他汀CBFA1ALP
- 辛伐他汀对人骨髓基质细胞Cbfa1,Cbfb和Osterix表达的影响被引量：8
- 2006年
- 目的:通过对成人骨髓基质细胞(hBMSC)体外培养的观察,研究辛伐他汀(SIM)对hBMSC成骨分化,增殖的影响和作用机制.方法:取人髓腔内骨髓,采用全骨髓培养法进行原代和传代培养.传代后实验组添加10-7mol/L的SIM,同时做不加药的空白对照.应用半定量RT-PCR方法分别检测核心结合因子a1(Cbfa1),β(Cbfb)和Osterix(OSX)在成骨细胞分化过程中的表达;应用碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒及茜素红法检测细胞ALP比活性和细胞矿化能力;应用CCK-8测定细胞增殖情况.结果:SIM作用后第3,6,9和12日的Cbfa1和OSX表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),Cbfb差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,SIM作用后的第3日[(63.54±2.99)vs(54.05±1.14),(P<0.05)];第6日[(70.39±3.98)vs(60.53±3.08),(P<0.01)];第9日[(86.28±1.20)vs(72.93±0.85),(P<0.01)];第12日[(94.99±3.20)vs(74.13±1.79),(P<0.01)],ALP比活性高于对照组.SIM能增强形成钙结节的能力并抑制细胞增殖(P<0.05).结论:SIM通过促进成骨细胞相关基因的表达从而促进hBMSC成骨分化,同时具有抑制细胞增殖的作用.
- 余向前张柳蔡俊
- 关键词：辛伐他汀骨髓基质细胞成骨细胞细胞分化
- 辛伐他汀对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化的影响被引量：17
- 2007年
- 目的观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖、分化的影响。方法16只9周龄雌性SD大鼠按体重随机分成2组,每组8只:第1组(G1),对照组,每天蒸馏水灌胃(N);第2组(G2),实验组,辛伐他汀灌胃20mg·kg-1.d-1(S20),持续3周,于最后1次灌胃的第2天处死所有大鼠,取右侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取左侧股骨和胫骨骨髓细胞分别向成骨、成脂方向诱导培养,并作如下检测:(1)成骨组:采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16d和28d分别检测碱性磷酸酶(ALP)比活性、ALP染色和von Kossa染色;细胞培养第16d,提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性磷酸酶(ALP)、破骨细胞分化因子(RANKL) mRNA的表达;(2)成脂组:采用CCK-8法检测定向成脂分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第18d,检测LPL比活性,并提取总RNA,采用Real-time RT-PCR检测脂蛋白脂酶(LPL) mRNA的表达。结果辛伐他汀体内给药干扰21d后大鼠骨量和骨密度无显著变化。体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因 mRNA水平、细胞增殖能力、矿化能力(von Kossa染色)、ALP比活性、ALP染色、LPL比活性两组间差异均无显著性。结论辛伐他汀体内给药3周对大鼠骨量及骨髓基质干细胞的增殖和分化无显著作用。
- 田发明张柳孟亚强郑杰蔡俊韩大成曲强
- 关键词：辛伐他汀骨组织形态计量学骨髓基质干细胞
- 骨髓基质干细胞成骨分化过程中Wnt、骨形态发生蛋白2信号通路相关因子与辛伐他汀的作用被引量：4
- 2011年
- 背景:辛伐他汀可促进体外培养的人或鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化,但作用机制尚不清楚。目的:观察辛伐他汀对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程中Wnt与骨形态发生蛋白2信号途径中相关因子表达的影响。方法:取6周龄雌性SD大鼠双侧股骨、胫骨全骨髓进行体外成骨细胞诱导培养。实验分为对照组及SIM组。SIM组加入浓度为10-7mol/L辛伐他汀,对照组加入等量无水乙醇和PBS。培养14d,行碱性磷酸酶染色,28d时,行vonKossa染色观察细胞外基质矿化情况;培养14,21d,免疫荧光细胞化学染色观察成骨细胞中β-catenin,Smad1/5,Cbfa1的表达及分布。结果与结论:大鼠骨髓基质干细胞经体外诱导后可分化为具有碱性磷酸酶活性和矿化细胞外基质能力的成熟成骨细胞。辛伐他汀可显著上调骨髓基质干细胞成骨分化过程中碱性磷酸酶的表达。同时,与对照组比较,SIM组β-catenin,Smad1/5,Cbfa1表达明显增多(P<0.05),且呈现明显的核内聚集趋势。说明辛伐他汀促进骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的作用可能与调控Wnt与骨形态发生蛋白2信号通路中相关因子的表达及细胞内分布有关。
- 靳云乔张柳田发明张磊程潭刘晓宁
- 关键词：骨髓基质干细胞成骨细胞WNT信号通路辛伐他汀
- MAPKs通路在MSCs的增殖及向成骨细胞分化过程中的作用被引量：5
- 2013年
- 间充质干细胞(MSCs)是一种多潜能成体干细胞,在体外诱导剂的作用下能向成骨细胞分化。在MSCs向成骨细胞分化过程中,受到MAPKs、BMPs、Notch和Wnt等多种信号通路的调控。其中MAPKs信号通路研究比较深入,近年来研究表明,在MAPKs信号通路的5种途径中,ERKs、p38MAPK和JNKs途径参与了成骨细胞增殖和分化的信号转导。现对MAPKs通路与其参与的MSCs增殖和成骨分化过程简要综述。
- 刘家寅田发明张柳
- 关键词：成骨作用
- 辛伐他汀促进大鼠骨髓基质细胞的成骨分化被引量：18
- 2006年
- 目的观察辛伐他汀体内给药对去卵巢大鼠骨髓基质细胞(BMSC)增殖和分化的影响,探讨辛伐他汀的成骨作用机制。方法24只12周龄雌性SD大鼠随机分成4组,每组6只:假手术组(G1)和去卵巢组(G2)每天蒸馏水灌胃;去卵巢大鼠10mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G3);去卵巢大鼠20mg·kg-1·d-1辛伐他汀灌胃(G4)。实验持续4周,第29天处死所有大鼠取骨髓细胞培养。用CellCountingKit8(CCK8)法检测成骨细胞的增殖能力;细胞培养第14天用半定量RTPCR和westernblot检测Runx2CbfalmRNA和蛋白的表达、第16天检测碱性磷酸酶活性(ALP)和第21天检测茜素红染色。结果辛伐他汀不能促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖。G3组和G4组的Runx2Cbfa1mRNA表达水平和ALP活性都显著高于G2组,给药两组之间无显著差别。G4组的Runx2Cbfal蛋白表达水平比G2组和G3组显著增加,G2组与G3组无明显差别。茜素红染色表明辛伐他汀能促进成骨细胞的矿化能力,两种剂量组之间无明显差别。结论辛伐他汀体内给药能够促进去卵巢大鼠BMSC向成骨细胞分化,但是不能促进细胞增殖。
- 郑杰张柳姚树生
- 关键词：辛伐他汀骨髓基质细胞成骨细胞细胞分化
