江苏省“135”工程重点医学人才基金(RC2002016)
- 作品数：16 被引量：47H指数：4
- 相关作者：祝宝华刘晨奚群英陈开祥王金桂更多>>
- 相关机构：扬州市第一人民医院东南大学东南大学医学院附属扬州医院更多>>
- 发文基金：江苏省“135”工程重点医学人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mitoKATP和肌浆网钙ATP酶在预适应心肌保护中的相关性研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨肌浆网钙ATP酶在心肌细胞缺血预适应及腺苷预适应中的作用以及其与mitoKATP开放的相关性。方法原代培养的新生SD大鼠心肌细胞,随机分为6组:正常培养组、缺氧/复氧损伤组、缺血预适应组、腺苷预适应组、5-HD(mitoKATP阻断剂)+缺血预适应组、5-HD(mitoKATP阻断剂)+腺苷预适应组。测定各组细胞上清中LDH的释放量,细胞存活指数及肌浆网钙ATP酶活性。结果缺血预适应组与缺氧复氧组比较,LDH的释放显著下降(P<0.01),存活指数明显上升(P<0.01),肌浆网钙ATP酶活性提高(P<0.01)。腺苷预适应组与缺氧复氧组比较,LDH的释放显著下降(P<0.01),存活指数显著上升(P<0.01),肌浆网钙ATP酶活性无明显提高(P>0.05)。5-HD+缺血预适应组较缺血预适应组LDH释放增多(P<0.05),细胞存活指数下降显著(P<0.01),肌浆网钙ATP酶活性下降(P<0.01)。而5-HD+腺苷预适应组较腺苷预适应组LDH释放无明显改变(P>0.05),细胞存活指数下降不显著(P>0.05),肌浆网钙ATP酶活性下降不明显(P>0.05)。结论肌浆网钙ATP酶与mitoKATP开放均参与了缺血预适应早期相的保护作用,且2者之间的作用具有相关性。但腺苷预适应的心肌保护作用与肌浆网钙ATP酶与mitoKATP开放无明显相关性。
- 刘晨祝宝华奚群英
- 关键词：缺血预适应钙ATP酶
- 缺氧预适应和前胡丙素对心肌细胞的保护作用及机制被引量：9
- 2007年
- 目的从细胞水平探讨缺氧预适应和前胡丙素对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤后胞内钙离子浓度与细胞凋亡的影响,从而阐明其保护心肌作用的机制。方法体外培养原代乳鼠心肌细胞,被随机分成5组:缺氧复氧损伤(HR)组、缺氧预适应(HP)组、腺苷预处理(AP)组、前胡丙素预处理(PP)组和维拉帕咪预处理(VP)组。在建立缺氧预适应和缺氧-复氧模型和用不同药物进行干预后,用全自动生化分析仪检测漏出LDH值。分别予FLUO-3/AM和Annexin-V荧光染色剂负载细胞后,利用流式细胞仪检测细胞内钙荧光强度和细胞凋亡率,并计算凋亡指数。结果同HR组比较,缺氧复氧组、AP、PP和VP组的LDH值、胞内钙荧光强度值和细胞凋亡指数明显降低(P<0.05)。而且PP组与其它干预组之间无显著差异性(P>0.05)。结论缺氧预适应、腺苷和前胡丙素预处理对缺氧复氧损伤后的心肌细胞均有保护作用,该作用可能与减轻细胞内钙超载,减少细胞凋亡有关;前胡丙素具有较强的钙拮抗作用。
- 陈开祥祝宝华
- 关键词：预适应前胡丙素钙超载
- 非ST段抬高的急性冠状动脉综合征的介入治疗进展被引量：4
- 2005年
- 祝宝华
- 关键词：急性冠状动脉综合征非ST段抬高介入治疗
- 缺氧预适应和前胡丙素预处理对心肌受磷蛋白磷酸化水平的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨缺氧预适应和前胡丙素预处理对大鼠心肌受磷蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为4组:对照组,缺氧复氧损伤组(HR组)、缺氧预适应组(HP组)和前胡丙素预处理组(PP组)。用蛋白激酶A抑制剂H-89进行干预,4组再分别分为H-89阴性组和H-89阳性组。检测各组间细胞上清乳酸脱氢酶(LDH);流式细胞术检测[Ca2+]i;放射自显影法检测受磷蛋白的磷酸化水平。结果与对照组比较,HR组的LDH和[Ca2+]i显著升高(P<0.05),HP组和PP组LDH和[Ca2+]i虽高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);HP组和PP组受磷蛋白磷酸化水平与对照组比较增加15.6%和16.8%(P<0.05),而HR组较对照组降低29.3%(P<0.05)。H-89阳性组受磷蛋白的磷酸化水平较H-89阴性组显著下调(P<0.05)。结论缺氧预适应和前胡丙素预处理对缺氧复氧损伤后心肌细胞有保护作用,该作用与上调受磷蛋白磷酸化水平有关。
- 陈开祥祝宝华刘晨奚群英张能锋王金桂于晓頔
- 关键词：缺氧缺血预处理心肌受磷蛋白前胡丙素
- 钙蛋白酶抑制剂对缺血-再灌注心肌肌浆网钙泵功能及其蛋白水平的影响被引量：6
- 2011年
- 目的研究钙蛋白酶抑制剂ALLN对缺血-再灌注(I-R)大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA)功能的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常灌注组(对照组)、I-R组、ALLN+I-R组和二甲亚砜+I-R组(DMSO+I-R组),分别检测再灌注15min时冠状动脉流出量(CF)和冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;荧光分光光度计测定荧光强度来反映钙蛋白酶活性;分别采用改良p-NPP法和Millipore过滤技术测定SERCA的活性和ATP依赖的SERCA45Ca2+摄取率,免疫印迹法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与I-R组相比,ALLN+I-R组CF、SERCA蛋白表达水平、SERCA的活性和45Ca2+摄取率显著增高(P<0.01),而LDH漏出量和钙蛋白酶活性显著降低(P<0.01)。结论 ALLN对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,与其抑制钙蛋白酶活性,一定程度减轻I-R损伤对SERCA功能及蛋白表达水平的影响有关。
- 王金桂祝宝华于晓頔陈开祥奚群英刘晨
- 关键词：缺血-再灌注损伤钙蛋白酶肌浆网钙泵
- 钙蛋白酶对心肌缺血/再灌注损伤的影响
- 2007年
- 钙蛋白酶广泛存在于各种组织细胞中,当心肌发生缺血再灌注损伤时,激活的钙蛋白酶可以影响肌浆网、线粒体等亚细胞结构的功能,加重组织细胞的损伤。因此,通过有效的药物性预处理或者研究开发一种通透性好、副作用小、的特异性钙蛋白酶抑制剂来抑制心肌缺血再灌注时钙蛋白酶活性,将为缺血心肌的治疗提供一个新的策略。
- 王金桂祝宝华
- 关键词：钙蛋白酶缺血再灌注损伤钙离子肌浆网
- 前胡丙素对缺氧再灌注损伤心肌细胞的保护作用
- 2010年
- 目的研究前胡丙素对培养心肌细胞缺氧再灌注损伤的保护作用。方法采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立模拟缺氧再灌注模型。实验分4组:正常组(contro1):细胞正常培养;缺氧预适应组(HP):预先缺氧2 h,复氧1 h,再缺氧12 h后,复氧2 h;前胡丙素预处理组(PP):先予前胡丙素单体终浓度为100 mol/L作用1 h,再行缺氧12 h,后复氧2 h;模拟缺氧再灌注组(HR):缺氧12 h,后复氧2 h。观察心肌细胞搏动频率及细胞形态;细胞上清检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)值。结果①细胞博动率:前胡丙素能增加缺氧再灌注损伤心肌细胞搏动频率;②细胞形态:心肌细胞H/R培养后皱缩、变圆,伪足减少,PP组心肌细胞形态变化小于对照组;③LDH和CK值:与正常培养组比较,模拟缺氧再灌注组细胞上清中LDH、CK值明显升高(P<0.01);与模拟缺氧再灌注组比较,HP组、PP组细胞上清中LDH、CK值明显降低(P<0.01);但前胡丙素预处理组与缺氧预适应组之间无明显差异(P>0.05)。结论前胡丙素能保护缺氧再灌注损伤心肌细胞,减轻损伤程度。
- 解建祝宝华
- 关键词：心肌缺氧再灌注肌酸磷酸激酶前胡丙素
- 大鼠SERCA2a启动子虫荧光素酶质粒的构建、鉴定和转染被引量：2
- 2006年
- 目的构建大鼠SERCA2a启动子-虫荧光素酶质粒,并进行鉴定和转染检测。方法PCR法扩增出含SER-CA2a启动子基因的DNA大片段,经pGEM-T esay载体连接后酶切获得目的基因,亚克隆到pGL3-Basic载体中;酶切及测序鉴定;用Lipofectin Reagent转染到心肌细胞中,细胞培养后裂解并作荧光检测。结果构建出了含虫荧光素酶基因的质粒,酶切及测序鉴定插入子为大鼠SERCA2a启动子,转染细胞后检测到荧光。结论成功构建了大鼠SERCA2a启动子-虫荧光素酶质粒,为SERCA2a基因调控等研究提供了工具和基础。
- 张能锋祝宝华
- 关键词：报道基因质粒转染
- 乳鼠心肌细胞缺血预适应模型的建立及电镜下超微结构的改变被引量：6
- 2005年
- 目的探讨培养乳鼠心肌细胞建立缺血预适应(IPC)模型的方法及对细胞超微结构的影响。方法出生1～2d的SD大鼠用改良法分离培养心肌细胞,检测模拟缺血各时间点乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞死亡率,据此建立预适应模型并与单纯缺血/再灌注组比较其LDH、细胞死亡率和超微结构的改变。结果乳鼠心肌细胞在模拟缺血4h以后LDH、细胞死亡率与对照组相比有明显差异(P <0 0 0 1) ;以模拟缺血90min ,再灌60min诱导的IPC模型与单纯缺血/再灌注(I/R)组相比明显降低LDH漏出率、细胞死亡率(P <0 0 0 5 ,P <0 0 0 1) ,I/R组心肌细胞超微结构破坏严重;IPC组心肌细胞超微结构基本完整清晰。结论乳鼠心肌细胞对缺血有较强耐受力,模拟缺血4h以上才有明显损伤。模拟缺血90min ,再灌60min能成功建立IPC模型,且维持超微结构完整性。
- 奚群英祝宝华刘晨
- 关键词：乳大鼠超微结构
- mitoKATP和肌浆网钙ATP酶在心肌缺血预适应的作用及机制被引量：3
- 2005年
- 目的探讨肌浆网钙ATP酶在心肌细胞缺氧预适应模型上的作用以及其与mitoKATP开放的相关性。方法原代培养的新生大鼠心肌细胞,随机分为4组正常培养组、缺氧/复氧损伤组、缺氧预适应组、5 HD(mitoKATP阻断剂)合并缺氧预适应组。测定各组细胞上清中LDH的释放量,细胞存活率及肌浆网钙ATP酶活性。结果缺氧预适应组与缺氧复氧组比较,LDH的释放显著下降(P <0 0 1) ,细胞存活率明显上升(P <0 0 1) ,肌浆网钙ATP酶活性提高(P <0 0 1)而5 HD合并缺氧预适应组较缺氧预适应组LDH释放增多(P <0 0 5 ) ,细胞存活率下降显著(P <0 0 1) ,肌浆网钙ATP酶活性下降(P <0 0 1)。结论肌浆网钙ATP酶与mitoKATP开放均参与了缺氧预适应早期相的保护作用,且2者之间的作用具有相关性。
- 刘晨祝宝华奚群英
- 关键词：缺氧预适应钙-ATP酶ATP敏感性钾通道
