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国家自然科学基金(30872231)

作品数:4 被引量:3H指数:1
相关作者:钟照华赵文然林乐勋陈晓凤王燕更多>>
相关机构:哈尔滨医科大学内蒙古民族大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇柯萨奇
  • 2篇柯萨奇病毒
  • 2篇B组柯萨奇病...
  • 2篇病毒
  • 1篇毒力
  • 1篇心肌
  • 1篇心肌细胞
  • 1篇易感
  • 1篇易感性
  • 1篇诱变
  • 1篇细胞
  • 1篇肌细胞
  • 1篇骨骼肌
  • 1篇骨骼肌细胞
  • 1篇非编码
  • 1篇非编码区
  • 1篇编码区
  • 1篇H9C2细胞
  • 1篇肠道
  • 1篇肠道病毒

机构

  • 2篇哈尔滨医科大...
  • 1篇内蒙古民族大...

作者

  • 2篇赵文然
  • 2篇张凤民
  • 2篇钟照华
  • 1篇武帅钦
  • 1篇佟雷
  • 1篇林乐勋
  • 1篇李晓波
  • 1篇王燕
  • 1篇李倩
  • 1篇张燕芳
  • 1篇范徐妃
  • 1篇包琳

传媒

  • 1篇中国地方病学...
  • 1篇微生物与感染

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
4 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
5'非编码区嘧啶富集区变异对B组柯萨奇病毒1型毒力的影响被引量:1
2010年
目的 观察5'非编码区(5'UTR)嘧啶富集区变异对B组柯萨奇病毒1型(CVB1)毒力和致病性的影响.方法 定点诱变将CVB1基因组5'UTR第563~573碱基嘧啶富集区5个嘧啶置换为嘌呤,获得突变株CVB1/m563-573.空斑纯化病毒后,利用细胞病变效应(CPE)试验、空斑形成试验、一步生长曲线和半数致死量(LD50)等方法比较CVB1/m563-573与其原型株CVB1/wt的毒力.结果 测序结果显示,CVB1/m563-573的5'UTR嘧啶富集区发生C565A、U567C、U568A、U570A、U572G突变,与预期一致.CPE试验表明,CVB1/m563-573的感染性较CVB1/wt稍弱(A 490分别为0.710±0.074、0.812±0.092),但差异无统计学意义(t=-2.204,P〉0.05).空斑形成试验显示,46、58 h时间点CVB1/m563-573形成空斑的数量为(6.40±1.52)×103、(11.60±2.19)×103 pfu(空斑形成单位)/L,直径为(2.00±0.35)、(2.47±0.41)mm,CVB1/wt的空斑数量为(8.40±2.51)×103、(11.80±1.92)×103 pfu/L,直径为(1.80±0.27)、(2.85±0.44)mm,二者比较差异无统计学意义(t值分别为8.000、0.985、10.000、9.000,P均〉0.05).一步生长曲线法显示,经过3、5、7 h的扩增,CVB1/m563-573所得的活病毒颗粒数(×103 pfu/L)的常用对数(lg)分别为2.10±0.09、4.28±0.03、7.44±0 CVB1/wt的活病毒颗粒数(×103 pfu/L)的lg值分别为2.80±0.02、4.77±0.02、8.55±0.01.CVB1/m563-573株在3个时间点均较CVB1/wt复制显著慢(t值分别为-13.151、-24.319、-47.714,P均〈0.01).CVB1/m563-573和CVB1/wt的LD50分别为3.10×109、1.26×107 pfu/L,CVB1/m563-573致病力较CVB1/wt明显减弱.结论 减少5'UTR嘧啶富集区的嘧啶碱基数量可致CVB1的感染和毒力减弱,该位点突变可能是研发CVB减毒活疫苗的策略之一.
钟照华包琳李倩张燕芳范徐妃李晓波张凤民赵文然
关键词:肠道病毒属诱变毒力
H9c2细胞对B组柯萨奇病毒3型重组株的易感性
2011年
H9c2细胞是来源于大鼠胚胎心脏组织的成肌细胞系,B组柯萨奇病毒(group B Coxsackievirus,CVB)是心肌炎和扩张型心肌病的主要病原。本研究观察了CVB3在H9c2细胞中的感染性,探讨H9c2细胞是否可用于CVB致心肌疾病的实验研究。用整合了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或海肾荧光素酶(RLuc)的CVB3重组株EGFP-CVB3、RLuc-CVB3攻击H9c2细胞及大、小鼠原代心肌细胞和骨骼肌细胞,应用荧光显微镜、流式细胞术和化学发光技术观察感染细胞的EGFP和RLuc表达,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病毒在核酸水平的表达。结果显示,在病毒攻击的H9c2细胞未检测到EGFP和RLuc表达;RT-PCR显示在CVB3感染9 d后检测不到CVB3 RNA;CVB3毒株可感染小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和大鼠心肌细胞,但不感染大鼠骨骼肌细胞和H9c2细胞。本研究结果表明,H9c2细胞不是CVB3易感细胞,不能用于CVB3致心肌疾病的研究;该结果从病毒感染方面也支持H9c2具有大鼠骨骼肌细胞表型。
林乐勋赵文然武帅钦佟雷王燕张凤民钟照华
关键词:H9C2细胞心肌细胞骨骼肌细胞
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