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福建省自然科学基金(00410004)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：王勇军王阶平陈彩霞黄志平王臻更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇单域抗体
  • 1篇蛋白
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇抗体
  • 1篇活性
  • 1篇活性分析
  • 1篇肺癌
  • 1篇靶向
  • 1篇CSA

机构

  • 1篇厦门大学

作者

  • 1篇颜江华
  • 1篇王臻
  • 1篇黄志平
  • 1篇陈彩霞
  • 1篇王阶平
  • 1篇王勇军

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2008
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
肺癌靶向通用载体hu3D3／cSA融合蛋白的制备和活性分析
2008年
目的制备一种新型的肺癌靶向通用载体hu3D3与核心链霉亲和素（core-streptavidin，cSA）的融合蛋白hu3D3／cSA，并鉴定其活性。方法PCR扩增cSA基因，克隆至质粒hu3D3／pET-22b（＋）而获得表达载体hu3D3／cSA／pET-22b（＋），并在E.coli BL21（DE3）中表达，镍亲和层析柱纯化hu3D3／cSA融合蛋白，采用TEA缓冲液进行复性。SDS-PAGE和Westem blot鉴定融合蛋白四聚体的形成。FTTC标记hu3D3／cSA，通过荧光显微镜分析hu3D3组分的抗原反应性和特异性，流式细胞术比较hu3D3／cSA和hu3D3与靶点的结合能力；ELISA和Westem blot鉴定cSA组分结合生物素（biotin）的能力。结果获得序列正确的hu3D3／cSA／pET-22b（＋）重组子，融合基因在E.coli BL21（DE3）中主要以包涵体的形式表达。纯化复性后的融合蛋白能够形成四聚体复合物，保留了cSA结合生物素的活性，hu3D3组分能与肺癌细胞表面抗原结合，且结合能力与单体hu3D3相比有明显增强。结论成功制备了具有结合靶抗原和生物素活性的hu3D3／cSA融合蛋白，同时改善了hu3D3组分结合其靶点的亲合力（avidity）。因此，hu3D3／cSA可以作为一个通用的肺癌靶向载体，与多种生物素化的抗肿瘤药物或试剂联用，有望为多药物联合靶向治疗肺癌提供一种可行的方法。
王勇军颜江华王阶平王臻黄志平陈彩霞
关键词：单域抗体肺癌
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