江苏省“135”工程重点医学人才基金(RC2002021) 作品数:4 被引量:23 H指数:2 相关作者: 傅晋翔 陈萍 孙谕 袁育青 李军 更多>> 相关机构: 苏州大学附属第二医院 苏州大学 更多>> 发文基金: 江苏省“135”工程重点医学人才基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
间充质干细胞联合输注促进造血干细胞移植后的造血重建 被引量:16 2005年 目的探讨间充质干细胞(MSCs)与造血干细胞(HSCs)共同移植对造血重建的影响。方法将扩增的Balb/c小鼠骨髓MSCs与骨髓共同经尾静脉输入经致死剂量照射的同系小鼠体内(联合输注组),并设单输骨髓细胞的HSCs组、单输间充质干细胞的MSCs组以及输培养基的对照组,每隔5d计数白细胞,计算动物死亡率。将乙酰乙酸碳氧荧光素标记的人间充质干细胞输入SCID小鼠尾静脉,24h后取肺、心、肝、脾、肾和小肠组织做冰冻切片;取骨髓、肝脏及脾脏,制成单细胞悬液,涂片,在荧光显微镜下观察计数;用逆转录聚合酶链反应测定鼠骨髓中人特异性β2-微球蛋白。结果细胞输注后,联合移植组的白细胞恢复快,12d左右恢复正常,死亡率(3/11)低于HSCs组(5/10)、MSCs组(4/4)、输培养基的对照组(11/11)。人MSCs输入SCID小鼠后24h,其在体内的分布依次为肺、肾、脾、肝,小肠及心脏组织中几乎无阳性细胞,骨髓中有极少MSCs。结论MSCs与造血干细胞共输能促进造血恢复。 施小凤 傅晋翔 李军 陈萍 袁育青 黄海雯 孙谕关键词:间充质干细胞 造血干细胞 造血干/祖细胞移行能力及影响因素的实验研究 2003年 目的 研究纯化脐血CD34+细胞移行穿越血管内皮细胞能力及影响因素。方法 免疫微磁珠阳性选择法(MACs)纯化脐血CD34+细胞,流式细胞仪测定基质细胞衍生因子(SDF-1α)受体(CXCR4)表达率;与干细胞因子(SCF)、白介素(IL)-6,IL-3及flt3配体(FL)共同孵育12小时,静脉内皮细胞株(ECV)接种于transwell滤膜上层,研究CD34+细胞在SDF-1α作用下移行穿越ECV的能力,transwell滤膜孔径为8μm,并观察阻断其表面粘附分子(CD62L、CD62E和VLA-4)后对迁移的影响。结果 CD34+细胞在自然状态下也能少量通过ECV细胞层,SDF-1α可显著提高CD34+细胞移行能力,通过率与CD34+细胞表面CXCR4表达相关;CD34+细胞与SCF及IL-6共同孵育后,可明显提高其穿越ECV细胞的能力(P<0.01);单独或联合应用抗粘附分子抗体显著减少CD34+细胞的穿内皮细胞移行(P<0.01)。结论 CD34+细胞可穿过ECV内皮细胞层向SDF-1α浓度高的一侧移行,与IL-6和SCF共同培养后可增强CD34+细胞的移行能力,抗粘附分子单抗显著减少CD34+细胞的移行。 傅晋翔 刘艳关键词:脐血 细胞因子 基质细胞衍生因子在多发性骨髓瘤细胞迁移和黏附中生物学作用的研究 被引量:1 2006年 目的研究基质细胞衍生因子(SDF-1)在多发性骨髓瘤(MM)细胞迁移、黏附中的生物学作用以及相关信号转导。方法采用流式细胞术检测 MM 细胞系 RPMI8226、XG-1、XG-7细胞黏附分子表达;免疫荧光技术检测 SDF-1对细胞形态以及膜表面黏附分子分布的影响;通过微孔隔离实验检测 SDF-1对 MM 细胞的趋化作用及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在趋化过程中的作用;免疫印迹技术检测 MM 细胞 SDF-1对 PI3K的活化。结果 3种 MM 细胞系不同程度表达多种黏附分子,RPMI8226、XG-7细胞均高表达黏附分子 CD29(>70%)、XG-1、XG-7细胞均高表达 CD44(>80%),XG-7细胞高表达 CD49d(>90%);3种细胞系 CD49e 表达水平均较低(<30%);这些黏附分子表达水平不能被SDF-1α明显上调。SDF-1α可触发 MM 细胞的极化形态建立以及诱导 CD29、CD49e 在细胞膜的重分布。SDF-1α能促进 MM 细胞对内皮细胞的黏附,并能够诱导 MM 细胞的迁移,此作用被 G 蛋白抑制剂 PTX 及 PI3K 抑制剂 wortmannin 明显抑制。结论 SDF-1α促进 MM 细胞对内皮细胞的黏附;并触发MM 细胞的极化形态建立及诱导黏附分子的重分布,从而通过 PI3K 信号途径诱导 MM 细胞的迁移。 张晓慧 傅晋翔 张建华 张阳敏关键词:趋化因子类 多发性骨髓瘤 细胞迁移 细胞黏附 Flt3配体促进再生障碍性贫血患者淋巴细胞向T_H1表型分化 被引量:6 2004年 目的 探讨Flt3配体 (FL)对再生障碍性贫血 (AA)辅助性T细胞 (TH)分化的影响及与造血功能衰竭的相关性。方法 应用流式细胞仪分析AA患者骨髓及外周血中TH 亚群 ,并观察植物血凝素 (PHA)和白细胞介素 2 (IL 2 )对AA患者TH 亚群影响 ;体外培养研究FL对骨髓和外周血T细胞分化及细胞因子分泌的作用。结果 AA患者骨髓及外周血中TH1细胞比例明显增高 ,且以急性AA更为显著 (P <0 .0 1) ,TH1与TH2细胞比例失衡 ,TH1 TH2比例显著高于正常对照 (2 .1± 0 .8和 1.4± 0 .7,P <0 .0 5) ;AA及正常人淋巴细胞经PHA和IL 2激发后TH1比例并无明显变化 ,而正常人骨髓细胞经与FL共同孵育 10d后 ,培养上清中IFN γ含量增高 ,表型分析提示 ,除TH1细胞比例增加外 ,树突状细胞及自然杀伤细胞阳性率也有明显增加。结论 FL通过树突状细胞诱导淋巴细胞向TH1表型分化 ,是AA造血功能衰竭的原因之一。 傅晋翔 施小凤 李军 陈萍关键词:FLT3配体 再生障碍性贫血 淋巴细胞 辅助性T细胞 流式细胞仪