上海市科委科技攻关项目(014909005)
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 相关作者：张德福刘东王凯王英陈茵更多>>
- 相关机构：上海市农业科学院上海市农业遗传育种重点实验室上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响被引量：6
- 2006年
- 本研究系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40-44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0．5%FBs)培养2-9d、0．1mg/L Aphidicolin (APD)培养+0．5%FBS培养2-9d或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中。再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚。重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6- DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0．1mg/L APD+0．5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P＜0．01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0．1mg/L APD+0．5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P＜0．05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P＜0．05),但囊胚发育率无显著差异(P＞0．05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P＞0．05)；以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P＞0．05)。这些结果表明：(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定；(2)0．1mg/L APD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果；(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞．核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响；(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但两者的总体效率相近。
- 张德福刘东汤琳琳王英陈茵王凯Karl SchellanderLIN Cai Lu
- 关键词：体细胞核移植细胞周期
- 猪胚胎细胞核移植重组胚发育能力的研究
- 2004年
- 选用香猪 2 ～ 16 细胞期卵裂球作核供体 ,上海白猪卵母细胞作核受体。通过显微操作和电融合技术构成重组胚。体外培养时 ,以融合前 1h激活、融合前 2h激活及融合前不激活的卵母细胞作核受体的重组胚 ,发育率分别为 6 5 .8% ,5 3.1% ,33.3%。以体内、体外成熟卵母细胞作核受体胞质时 ,其重组胚的发育能力无显著变化 (P >0 .0 5 )。作为核供体的胚胎对于重组胚的发育能力有显著影响 ,母体合子转变以后的胚胎作为核供体时 ,重组胚的发育能力下降 ;分别以不同细胞期胚胎 (2 ,4 ,8 和 16 细胞 )的卵裂球作为核供体的NT胚发育率有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,以 2 ～ 4 细胞胚胎卵裂球作核供体最合适。
- 张德福刘东王英芮荣鲍世民张平李震
- 关键词：胚胎细胞核移植发育能力
- 猪卵巢卵母细胞体外成熟研究被引量：1
- 2004年
- 张德福刘东陈晓羽项智锋
- 关键词：卵巢卵母细胞体外成熟
- 猪作为异种器官移植供体的研究现状及发展趋势被引量：1
- 2006年
- 本文详细介绍了猪作为异种器官移植供体的研究现状及发展趋势,表明随着猪转基因克隆技术的成熟,猪作为异种器官移植供体将成为现实。
- 张德福刘东吴华丽陈学进王凯陈莹
- 关键词：异种器官移植体细胞克隆
