转基因生物新品种培育专项(2009ZX08010-011B)
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 相关作者：董福双王海波吕孟雨杨帆柴建芳更多>>
- 相关机构：河北省农林科学院河北农业大学保定市农业科学研究所更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用卡那霉素“浸种法”准确筛选转基因小麦种子的方法研究被引量：3
- 2013年
- 为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法，以冬小麦种子为试材，探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明，卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等重要。在卡那霉素浓度为60～180mg·L^-1的范围内，以“单粒分享量”（单粒分享量=卡那霉素浓度×溶液体积／种子粒数）为筛选标准，能有效地对小麦种子进行筛选。利用此方法，我们对小麦金禾9123转基因后代7个株系的412个籽粒进行卡那霉素溶液筛选，获得84株抗性苗，经PCR检测，76株为阳性，卡那霉素筛选正确率达90．5％；同时以7个不同遗传背景的普通小麦品种也验证了此选择方法的可靠性。
- 董福双高义平吕孟雨柴建芳王海波
- 关键词：卡那霉素小麦转基因抗性筛选
- 转基因玉米抗卡那霉素筛选方法研究被引量：4
- 2010年
- 为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米对卡那霉素的抗性,结果表明用卡那霉素浸泡玉米种子,玉米苗的白化率不但与卡那霉素浓度有关,而且与浸种的用液量有关,杂交种和自交系之间差异并不大,利用100 mL浓度为200 mg/L的卡那霉素溶液浸种3 d后播种,白化苗率基本可以达到100%,用100 mL浓度为150mg/L的卡那霉素溶液浸种20粒种子3 d后播种进行抗性筛选,经过对玉米T1代转基因植株的筛选试验进行验证准确度达到了84.8%,表明该方法可行,可作为筛选玉米转化抗卡那霉素标记基因的一种简便方法。
- 吕孟雨董福双张俊敏王海波
- 关键词：转基因玉米卡那霉素
- 卡那霉素筛选转基因棉花技术研究被引量：1
- 2019年
- 为了提高带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代的筛选效率,通过利用不同浓度的卡那霉素溶液进行浸种,同时比较浸种时间的长短对棉花子叶片伤害程度,并用PCR分子检测相互验证。结果表明:用浓度1 000 mg/L的硫酸卡那霉素溶液浸种3 d,每5 mL溶液浸泡1粒棉花种子,播种出苗以后,拔除子叶上有白化斑的棉花苗,剩余的子叶上没有出现白化斑的棉花苗即为转基因阳性植株,经PCR检测筛选的准确率达100%。利用卡那霉素溶液浸种的方法筛选带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代材料的技术流程经济有效、准确可行。
- 吕孟雨杨帆董福双柴建芳赵和刘永伟周硕王海波
- 关键词：转基因棉花卡那霉素浸种
- 小麦芽生长点的基因枪转化技术研究被引量：15
- 2009年
- 为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了＂用解剖刀去除种子根、用镊子把芽鞘掰去、用镊尖扫去包盖生长点的未展开叶、将带生长点的部分与胚乳分离＂为特点的受体制备方法;确定1100 Psi＋9 cm为最佳轰击参数组合。对轰击后的小麦芽生长点（70个×3批）进行gus基因瞬时表达检测,以受体数统计时,转化率为22.9%-35.7%;以生长点数统计时,转化率为5.7%-8.6%。用含badh/bar的pABH9质粒转化1000个受体,发育成了802个T0植株,对T0植株所结种子长成的穗行喷200 mg/kg的PPT进行抗性筛选,获得了105个抗性株,究其来源为42个T0株,由此计算抗性率为5.2%。用PCR检测T1植株,6个呈阳性。初步建立了基因枪法转化小麦种子芽生长点的技术。
- 董福双张艳敏杨帆梁新朝刘桂如王海波
- 关键词：小麦基因枪
