江苏省自然科学基金(BK2009036)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
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- 高表达整合素连接激酶对大鼠骨髓间充质干细胞旁分泌功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究转染腺病毒介导的整合素连接激酶(ILK)对大鼠骨髓间充质干细胞旁分泌作用的影响。方法构建携带人野生型整合素连接激酶质粒cDNA和人重组绿色荧光蛋白的腺病毒载体(adeno-ILK)和空载腺病毒(MSC),通过全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞。采用无血清培养转染adeno-ILK(MSC-ILK组)或空载腺病毒(MSC组),通过流式细胞术检测人重组绿色荧光蛋白从而测定转染效率,确定最佳的病毒感染复数。提取骨髓间充质干细胞mRNA,用Real-time PCR测定血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子2和胰岛素样生长因子1的基因表达量。结果 MSC-ILK组旁分泌因子血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子2和胰岛素样生长因子1的基因表达量分别是MSC组的8.2±0.4、2.6±0.2及2.4±0.2倍(P<0.05或P<0.01)。结论整合素连接激酶基因转染可明显促进骨髓间充质干细胞表达旁分泌因子血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子2和胰岛素样生长因子1。
- 高见书林承曦毛庆康丽娜徐标
- 关键词：整合素连接激酶骨髓间充质干细胞成纤维细胞生长因子2胰岛素样生长因子1
- ILK转染的BM-MSCs通过旁分泌作用抑制CFB增殖和胶原合成
- 2011年
- 目的探讨体外移植整合素连接激酶(ILK)转染的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)抑制心肌梗死后心脏纤维化的机制。方法收集培养72 h的MSCs和ILK-MSCs后的培养基,分别与心脏成纤维细胞(CFB)共培养48 h,用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)增殖试剂盒检测CFB的增殖能力,采用实时荧光定量PCR检测CFB表达金属蛋白酶(MMPs)、金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)及细胞外基质的组成成分Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的情况。结果与对照组比较,MSCs培养液组、ILK-MSCs培养液组可抑制CFB的增殖和减少Col1a1、Col3a1、TIMP-1、TIMP-2和-αSMA的基因表达(P<0.05),增加MMP-2、MMP-9的基因表达(P<0.05);与MSCs培养液组比较,ILK-MSCs的培养液组可进一步抑制Col3a1和TIMP-2的基因表达(P<0.05),并增加MMP-2的基因表达(P<0.05)。结论 ILK可能通过增加MSCs的旁分泌,抑制CFB的增殖和胶原合成能力,从而在体内发挥降低心肌梗死后纤维化的作用。
- 林承曦毛庆高见书康丽娜徐标
- 关键词：整合素连接激酶旁分泌心脏成纤维细胞
