黑龙江省科技攻关计划(GC08C416)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘平葛红岩石妍杨帆段惠静更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学大庆龙南医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改良兔角膜上皮细胞原代培养及纯化的方法被引量：3
- 2010年
- 目的改良原代培养及纯化兔角膜上皮细胞的方法,提高角膜上皮细胞原代培养的成功率。方法采用全角膜组织培养法培养兔角膜上皮细胞,利用机械刮除和差速贴壁法进行纯化并传代,通过倒置显微镜对细胞进行形态学观察并应用免疫组织化学的方法对细胞进行鉴定。结果兔全角膜24h贴壁,48h后即可见有细胞自角膜缘爬出,5d后细胞大量爬出可见成纤维细胞和角膜上皮细胞共存,界限明显;角膜上皮细胞复层生长。在界限融合前刮除成纤维细胞,角膜上皮细胞继续旺盛生长,10d后达到融合。兔角膜上皮细胞传至第4代后细胞体积明显变大,传至第5代,细胞衰老、凋亡。兔角膜上皮细胞免疫组织化学显示PCK单克隆抗体阳性。结论改良原代培养及纯化兔角膜上皮细胞的方法简单、经济、有效,并可获得具有良好生物学特性的角膜上皮细胞,为角膜及角膜疾病的研究奠定实验基础。
- 石妍杨帆葛红岩刘平
- 关键词：角膜上皮细胞全角膜原代细胞培养纯化
- 重组人角膜上皮素对人角膜上皮细胞黏附的影响
- 2009年
- 目的研究比较改良前后重组人角膜上皮素对人角膜上皮细胞黏附的影响。方法培养人角膜上皮细胞,将野生型角膜上皮素蛋白和诱变型重组角膜上皮素蛋白浓度调整为10,20,30,100μg/mL,分别预孵化96孔酶标板,每种浓度6个孔。包被18 h,孵育2 h。加入人角膜上皮细胞的细胞悬液调整浓度为每孔3×105,每组都设2%BSA预孵化的细胞板对照组。全自动定量绘图酶标仪检测吸光度。结果诱变型重组人角膜上皮素比野生型角膜上皮素拥有更高的促角膜上皮细胞黏附作用,以剂量依赖式方式促进人角膜上皮细胞的黏附。在诱变型重组人角膜上皮素浓度达到10μg/mL时,开始促进人角膜上皮细胞黏附,随着浓度的增高,作用增强;浓度达到30μg/mL时,促进作用达到高峰。结论诱变型人角膜上皮素比野生型角膜上皮素拥有更高的促角膜上皮细胞黏附作用,为进一步临床应用提供了理论基础。
- 冷非刘平段惠静葛红岩张佳莹关立南殷秀丽
- 关键词：角膜上皮细胞
