山东省科技攻关计划(022020103)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 相关作者：李俊刘玉庆张秀美黄艳艳胡北侠更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 检测新城疫抗体的Dot-ELISA方法的建立及其与HI方法的比较研究被引量：3
- 2007年
- 建立了检测鸡群中新城疫病毒(New Castle disease virus,NDV)血清抗体的Dot-ELISA方法,对Dot-ELISA的最佳反应条件进行了研究,初步确定了该方法的感染保护临界值为7log2。通过对大量临床血清样本的检测,表明Dot-ELISA与血凝抑制试验(HI)相比,具有敏感、特异和稳定性好的优点。
- 黄艳艳胡北侠张秀美沈志勇刘玉庆黄庆华李俊
- 关键词：新城疫血清抗体DOT-ELISAHI
- 应用RT-PCR和病毒学方法检测低致病力禽流感感染的研究
- 2006年
- 分别应用病毒分离和鉴定试验以及禽流感病毒(AIV)型特异性RT-PCR技术,对疑似H9亚型AIV感染的10份病死鸡组织病料进行了实验室诊断。结果有7份病例用上述两种方法检测均为阳性;2份病料仅分离到H9亚型AIV;1份病例仅H9亚型RT-PCR阳性。研究表明,对于H9亚型AIV临床组织样品的检测,病毒分离试验的敏感度高于RT-PCR。当检测因运输或消毒药物作用而导致病料中病毒死亡的H9亚型AI临床病例时,RT-PCR有明显的优势。将RT-PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可提高临床样本的H9亚型AIV的检出率。
- 黄艳艳胡北侠张秀美刘玉庆李俊
- 关键词：病毒分离RT-PCR
- 禽痘病毒载体疫苗研究进展被引量：2
- 2005年
- 黄兵王莉莉
- 关键词：禽痘病毒载体疫苗体外生产外源DNA功能化研究T细胞反应
- 表达新城疫HN和F基因重组禽痘病毒的免疫效力测定
- 2008年
- 将8日龄SPF鸡随机分组,分别接种rFPVHN、rFPVF、rFPVNHF重组禽痘病毒,接种量为每只鸡105PFU,另一组群用LaSota活苗经点眼、滴鼻接种106EID50。于免疫后6d、12d和18d测定HI和微量中和抗体。结果发现,3种重组病毒均能刺激鸡群产生抗新城疫病毒特异抗体,但抗体产生时间比LaSota活苗缓慢,且抗体滴度亦低,然而共表达HN和F的rFPVNHF免疫鸡群的中和抗体水平明显比rFPVHN和rFPVF组群高,表明rFPVNHF的保护性免疫更优于HN或F单基因重组禽痘病毒。
- 王月明孙晓军刘玉山刘巍于可响
- 关键词：禽痘病毒免疫效力
- 表达新城疫病毒融合蛋白基因禽痘病毒重组体的构建被引量：1
- 2006年
- 通过RT-PCR扩增新城疫病毒F基因,利用禽痘病毒复合启动子、SV40 PolyA终止信号序列构建F基因表达盒。将F基因表达盒与loxp-GFP-loxP序列串联插入禽痘病毒重组臂,构建了禽痘病毒转移质粒载体。在脂质体介导下转染CEF,获得了带有绿色荧光信号的重组病毒rFPVFGFP。通过二次转染,利用Cre-loxP位点特异性重组将重组病毒基因组的GFP自动去除,结果获得了只含新城疫病毒F基因表达盒的重组禽痘病毒rFPVF。试验结果表明,rFPVF复制稳定,表达的F蛋白具有免疫原性,能够刺激鸡只产生抗新城疫病毒的中和抗体。
- 黄兵于可响高月花宋敏训牟建青李峰
- 关键词：禽痘病毒新城疫病毒融合蛋白位点特异性重组绿色荧光蛋白
- 利用Cre-loxP自动敲除H5亚型禽流感病毒血凝素重组鸡痘病毒中的报告基因
- 2007年
- 研究去除重组鸡痘病毒中的报告基因,构建一株只含目的基因的重组毒。将H5亚型AIV的HA基因作为靶基因,两侧含loxP序列的GFP表达盒插入鸡痘病毒重组臂基因构建了转移质粒载体,将其与脂质体混合转染CEF细胞,获得了表达H5和GFP的鸡痘病毒重组体。通过二次转染,利用Cre酶自动敲除重组病毒中的GFP基因,最终获得了只含H5血凝素基因表达盒的重组鸡痘病毒。免疫荧光和病毒滴度测定结果表明,经过连续传代后重组病毒仍然稳定复制并表达H5血凝素。用105PFU和2×105PFU rFPV H5免疫SPF鸡,28d后,免疫组鸡抗体平均滴度(HI)分别达到4log 2和4.5log 2,结果表明,H5HA基因重组病毒能刺激鸡群产生较高特异抗体。
- 高月花王莉莉黄兵宋敏训崔言顺李建亮
- 关键词：鸡痘病毒禽流感病毒CRE-LOXP
- 应用RT-PCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究被引量：5
- 2007年
- 分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT-PCR技术,对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进行了实验室诊断。结果表明:从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因,也分离到了新城疫病毒;3份病料未分离到病毒,仅扩增到了新城疫强毒基因;4份病料分离到了新城疫病毒,但未检测到相关基因。研究表明,将RT-PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。
- 黄艳艳胡北侠张秀美刘玉庆卢新存李俊
- 关键词：新城疫病毒分离
