教育部留学回国人员科研启动基金(9A8029)
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- RNAi技术在神经干细胞相关基因功能研究中的应用
- 2008年
- 目的:采用RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术研究神经干细胞相关基因-AF116909在神经干细胞中的作用。方法:构建含AF116909目的基因特异序列的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体,转染到神经干细胞(NSCs)后,观察神经干细胞的形态,并进行RT-PCR检测mRNA表达。结果:经观察,试验组分化明显加强,从3d的(12±1.5)%分化率增加到11d的(80±3.1)%,而对照组几乎无分化现象。RT-PCR检测后,发现试验组中AF116909基因mRNA的表达量同对照组相比明显减少。结论:该方法实现了AF116909基因在NSCs中的有效抑制,并表明,抑制AF116909基因的表达,提高了NSCs的分化率,反应该基因具有抑制NSCs分化的功能。
- 过七根张炳火陈付学
- 关键词：基因表达基因表达调控
- 电击转染技术在神经干细胞中的应用研究
- 2007年
- 目的:探讨利用电击转染技术将pEGFP-N2基因导入神经干细胞的条件。方法:取SD胎鼠(14 d)的纹状体,将细胞于37℃,5%CO2的培养箱中培养,N estin免疫荧光染色检测,并将pEGFP-N2基因分别在100 V、80μs,200V、80μs,300V、80μs以及400V、80μs的4种不同电击转染条件下,导入神经干细胞。结果:N estin免疫荧光染色后呈阳性,确定为神经干细胞。在200V、80μs条件下,转染效率达80%以上,是4种条件下的最高转染效率。结论:在200V,80μs的电击转染条件下,基本无细胞死亡,达到80%以上转染效率,实现了4种不同条件中的最高转染效率。
- 过七根陈付学甘金莲张炳火徐常龙陈晔
- 关键词：干细胞荧光抗体技术电刺激转染
- 神经干细胞定向诱导分化为胆碱能神经元研究
- 2005年
- 以胎鼠的神经干细胞为研究对象,将其分别置于FHL,FH,FL,LH 4种培养液中,于37℃、50mL/L CO2、饱和湿度下培养,同时作空白对照试验;7 d后,检测胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫反应,研究在不同培养液中,神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的能力。结果表明,在FHL和FH培养液培养的细胞中,能检测到ChAT阳性细胞,说明FHL和FH培养液可诱导神经干细胞分化为胆碱能神经元。
- 任雯雯过七根杨洋宋红生文铁桥陈付学
- 关键词：神经干细胞分化胆碱能神经元
