国家自然科学基金(31072240)
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- 金黄色葡萄球菌肠毒素A蛋白的B细胞表位的预测
- 2012年
- 目的预测金黄色葡萄球菌肠毒素A蛋白(SEA)的B细胞表位。方法以金黄色葡萄球菌合肥乳源分离株M3基因组DNA为模板,PCR扩增SEA基因并进行序列测定与分析。应用DNAstar protean软件对SEA蛋白的二级结构、柔性、亲水性、表面可能性和抗原指数等多参数进行综合分析,预测其B细胞表位。结果 M3分离株的SEA基因全长774 bp,编码由257个氨基酸组成的相对分子量为29.67 kDa的SEA蛋白,M3分离株SEA基因与标准株的核苷酸序列与氨基酸序列同源性分别为98.7%和98.4%。SEA蛋白的优势B细胞表位位于肽链的第64～68、100～107、138～141、156～160、166～173、213～217和237～244区段。结论预测出SEA蛋白的7个优势B细胞表位,为进而克隆表达表位蛋白,制备针对SEA表位的单克隆抗体奠定了基础。
- 张玉晴梁明燕李槿年李冠青王莉
- 关键词：金黄色葡萄球菌B细胞表位
- 拟态弧菌重组蛋白OmpUa的表达条件优化及其抗原性分析
- 2011年
- 目的分析重组蛋白OmpUa的表达形式和抗原性,优化拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌(pMALc4X-OmpUa/TB1)的表达条件。方法诱导基因重组工程菌表达,分别采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白OmpUa的表达形式及其抗原性。采用正交试验设计L9(34)方案,通过SDS-PAGE和电泳图谱光密度扫描分析培养基种类、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度等因素对重组蛋白表达的影响。结果重组蛋白OmpUa主要以可溶性形式表达,具有良好的抗原性。基因工程重组菌接种LB培养基,37℃振荡培养3 h时加入0.5 mmol/LIPTG诱导4 h,即可获得高表达量的重组OmpUa蛋白。结论摸索出拟态弧菌OmpUa基因工程重组菌的最佳表达条件,为下一步大量制备OmpUa诊断性抗原奠定了基础。
- 李世东岑峻宇李槿年王莉
- 关键词：拟态弧菌正交试验设计抗原性分析
