国家自然科学基金(39800133)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酵母表面展示技术及应用被引量：8
- 2001年
- 酵母表面展示是近年发展的一种新的蛋白表面展示技术 ,能够展示需糖基化作用、二硫键异构化等翻译后修饰才具功能活性的复杂真核蛋白。本文介绍了该技术的基本原理、研究进程、筛选方法。
- 贾帅争孙红琰王全立
- 关键词：酵母菌糖基化噬菌体
- HCVNS3基因片段酵母展示文库的构建和鉴定被引量：10
- 2001年
- HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0～ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切酶 Bam H 作用位点的接头 ,再以接头序列作引物进行 PCR扩增 .最后扩增产物用 Bam H 酶切后与 Bam H 线性化的穿梭载体 p YD1连接 ,转化大肠杆菌 (E.coli) DH5α,共得到 2× 1 0 6个转化子 .转化菌落的 PCR扩增结果表明 ,约 50 %转化子含插入片段 .随机选择 5个插入片段测序 ,然后与 DNA序列数据库中的序列比较 .结果显示它们分别与 HCV NS3序列有 96%～ 99%的同源性 .用从转化菌落中提取的质粒转化酵母 (S.cerevisiae)菌株 EBY1 0 0 ,得到含 2× 1 0 5个插入片段的 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .半乳糖诱导的酵母细胞通过和 FITC标记的抗体结合 ,用 FACS可以在 2 0 %的细胞表面检测到融合蛋白的表达 .
- 贾帅争孙红琰刘晓达杜芝燕杜勇王全立章扬培
- 关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白3
- HLA-DR分子的分离纯化
- 2001年
- 目的 :纯化HLA DR分子。方法 :纯化抗HLA DR单克隆抗体L2 4 3并与CNBr活化的Sepharose 4B偶联制备亲和柱 ,应用免疫亲和层析方法纯化HLA DR分子。结果 :从 5gHLA DR阳性的人B淋巴瘤细胞系RAJI裂解液中得到 2 0 μgHLA DR分子。它们以二聚体形式存在 ,能与构象依赖型单抗L2 4 3进行结合 ,煮沸变性后分开为α和 β两条单链。
- 贾帅争孙红琰刘晓达杜芝燕王全立
- 关键词：HLA-DR抗原色谱法
