国家自然科学基金(81072186)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 小鼠大肠癌肝转移微创模型的建立与评价
- 2011年
- 目的:根据大肠癌肝转移模型的手术损伤程度筛选合适的建模方法。方法:以BALB/c小鼠为对象,随机分为3组,分别经直肠黏膜内、腹腔外脾内和腹腔内脾原位等方法注射0.2 mL鼠结肠癌细胞株CT26(浓度106个/mL),观察小鼠成瘤情况、肝转移率,并用酶联免疫吸附实验检测各组小鼠建模后5 d INF-γ的表达水平。结果:3种方法均能建立大肠癌肝转移模型,直肠黏膜内、腹腔外脾内和腹腔内脾原位注射法的肝转移率分别为37.5%、87.5%和87.5%;各组建模7 d后血清中INF-γ的水平分别为345.8、1 085.2和680.4 pg/mL,腹腔外脾内注射法INF-γ的表达水平较其它2组明显增高(P<0.05)。结论:脾内原位注射法是一种建立大肠癌肝转移最有效且损伤最小的一种方法,比较适合用来研究大肠癌肝转移的相关分子机制。
- 董亮孙茂民匡玉庭王守立王影影纪辉柴玉海
- 关键词：直结肠癌肝转移微创小鼠
- 转化生长因子-β1 shRNA表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的构建转化生长因子(TGF)-β1短发卡RNA(shRNA)表达载体,为肿瘤生物学研究奠定方法基础。方法根据TGF-β1的mRNA序列,运用Ambion公司的Target Finder软件筛选TGF-β1shRNA的候选点,在BglⅡ和HindⅢ位点克隆到表达载体pSUPER gfp-neo上。重组的shRNA pSUPER gfp-neo在大肠杆菌DH5a上筛选和鉴定。分别用酶联免疫吸附法(ELISA)测定和免疫荧光筛选最佳TGF-β1shRNA靶点序列。结果 ELISA和免疫荧光染色结果显示,shRNA-a、shRNA-b和shRNA-c均在不同程度上降低了靶细胞TGF-β1蛋白质表达,以shRNA-b所引起的下降最为显著(P<0.05)。结论构建的TGF-β1shRNA在肿瘤细胞中产生较好的TGF-β1沉默效果,为肿瘤生物学研究提供了一种方法。
- 张彪郭凌川董亮周赟吴淳胡欣潘展腾钟良君王守立
- 关键词：RNA干扰转化生长因子-Β1
