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溶瘤腺病毒及其靶向治疗肿瘤研究进展被引量：1: 2009年; 溶瘤腺病毒是对已知腺病毒进行改造得到的能对肿瘤基因表型的缺陷产生特异性杀伤作用及起到抗肿瘤药物的靶向性载体作用的病毒。目前通过对腺病毒5的特定基因片段的处理得到了H101和d11520等生物制品，针对肿瘤细胞的p53基因表达缺陷，特异性识别肿瘤并在肿瘤细胞内进行繁殖和裂解肿瘤细胞。这些生物制品可以作为载体携带抗肿瘤基因，产生更加强大的抗肿瘤作用。; 胡建鹏郝林韩从辉; 关键词：溶瘤病毒肿瘤

重组腺病毒携带TNF-α受体Ⅰ基因对肝脏缺血再灌注损伤的研究: 2009年; 目的探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及可溶性TNF-α受体Ⅰ(sTNFRⅠ)基因的保护作用。方法预先给予携带sTNFRⅠ基因的重组腺病毒后建立大鼠缺血再灌注模型,阻断肝左、中叶入肝血流60min后分别再灌注1h、3h、6h、12h。采用全自动生化分析仪测定血清中肝酶学指标(AST、ALT),TBA法测定肝脏丙二醛(MDA)含量。大鼠肝脏组织切片HE染色后,行光镜检查,观察肝组织显微结构变化。结果AST、ALT和肝脏的组织形态学都显示模型组较假手术组大鼠有明显的肝脏损伤,其中以再灌注6h肝脏损伤最严重。肝组织MDA含量明显高于假手术组(P<0.01),于再灌注3h达到高峰。肝组织TNF-α的表达均明显高于假手术组(P<0.01),且于再灌注6h达到高峰。结论sTNFRⅠ可增强抗氧化能力,降低MDA水平,抑制缺血再灌注大鼠体内氧化应激水平,对大鼠缺血再灌注有一定的治疗作用。; 张培影郝林张勇鲍红光贡震郑巍詹鸣韩从辉; 关键词：肝切除术肝移植缺血再灌注损伤

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及抗肿瘤作用被引量：4: 2009年; 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一,能选择性的诱导肿瘤细胞、转化细胞凋亡,而对正常组织无毒性,有望成为肿瘤治疗的新方法,备受人们的关注。本文从TRAIL的结构、受体、诱导肿瘤细胞凋亡机制及在肿瘤治疗中的应用等方面作了介绍,以期为TRAIL临床应用提供参考。; 郝林史振铎韩从辉; 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡肿瘤治疗

装载超抗原SEA基因的由前列腺特异性抗原和端粒酶逆转录酶启动子双调控靶向前列腺癌的溶瘤腺病毒载体的构建被引量：3: 2010年; 目的构建表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素（SEA）基因的由前列腺特异性抗原（PSA）启动子及端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子双调控的特异性增殖溶瘤腺病毒SG504-SEA。方法从前列腺癌组织基因组DNA中获得522bp大小的PSA启动子序列，将PSA启动子克隆到由hTERT启动子调控的特异性增殖溶瘤腺病毒载体SG502中，得到靶向前列腺癌细胞的双调控溶瘤腺病毒载体SG504。将已构建好的含有771bp大小SEA基因片段的病毒骨架质粒PPE3-ccdb—SEA与SGSIM用Lipofectamine 2000共转染至293细胞。共转染后9—14d出现病毒空斑，经过3次病毒空斑纯化，经鉴定正确的腺病毒命名为SG504-SEA，即携带SEA基因的双调控靶向前列腺癌的特异性溶瘤腺病毒。结果经聚合酶链反应（PCR）及酶切鉴定，SEA基因成功克隆到病毒载体中，可以表达SEA基因，且病毒滴度为2．0×10^10pfu／ml。结论成功构建表达超抗原SEA基因的双调控选择增殖型溶瘤腺病毒SG504-SEA。; 韩从辉郝林胡建鹏王涛贡震贺厚光董秉政张培影; 关键词：前列腺癌前列腺特异性抗原端粒酶逆转录酶超抗原SEA 溶瘤腺病毒

双调控溶瘤腺病毒携带SEA基因靶向鼠膀胱癌的表达被引量：2: 2012年; 目的:研究hTERT和HIF启动子双调控的溶瘤腺病毒能否感染鼠膀胱癌细胞并表达治疗基因,为动物实验提供依据。方法:以不同浓度溶瘤腺病毒感染鼠膀胱癌细胞,生物倒置显微镜下动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测SEA在细胞内mRNA表达,Western blot检测SEA蛋白表达。结果:镜下可见细胞感染腺病毒并最终裂解,RT-PCR和Western blot分别检测到实验组mRNA和蛋白的表达。结论:携带SEA基因的hTERT/HIF双调控溶瘤腺病毒可在鼠膀胱癌细胞内复制增殖并表达SEA基因,可用于治疗鼠膀胱癌的动物实验研究。; 陈猛郝林史振铎张辉董洋韩从辉; 关键词：溶瘤腺病毒膀胱癌金黄色葡萄球菌肠毒素A 人端粒酶逆转录酶

应用E1区缺陷载体构建携带SEA基因的选择性腺病毒: 2011年; 目的:构建由端粒酶启动子(hTERT)调控的携带超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus aureusenterotoxin A,SEA)基因的选择性复制重组腺病毒。方法:应用酶切、连接方法将hTERT连接于腺病毒穿梭质粒E1A和E1B序列之前调控E1A和E1B蛋白的表达,CMV启动子和SV40分别调控目的基因SEA的表达和终止,利用脂质体将腺病毒骨架质粒和穿梭质粒共同转染人胚肾293细胞(HEK-293)进行同源重组,获取选择性复制腺病毒CMV-SV40-hTERT(CSS-H),氯化铯梯度离心纯化重组腺病毒,并测定病毒滴度。结果:应用PCR验证、双酶切分析、序列测定等方法验证重组质粒基因片段连接正确无突变,通过同源重组获得携带超抗原SEA基因片段的CSS-H重组腺病毒,测定滴度为2.9×1010pfu/ml。结论:携带SEA基因选择性复制重组腺病毒CSS-H成功构建。; 胡建鹏韩从辉韩从辉郝林陈猛; 关键词：腺病毒肿瘤金黄色葡萄球菌肠毒素A

溶瘤腺病毒在肿瘤治疗中的作用被引量：2: 2010年; 溶瘤腺病毒是继手术、放疗、化疗后治疗肿瘤的新式方法,它能特异性识别并感染肿瘤细胞,最终导致细胞溶胀而摧毁肿瘤细胞,但无法在正常机体细胞内复制而不具有杀伤作用,理论上具有更高的抗肿瘤效应和更低的副作用。目前溶瘤腺病毒Onxy-015(d l 152)已进入Ⅲ期临床试验,文章就溶瘤腺病毒治疗肿瘤的国内外研究进展进行综述。; 徐伟郝林韩从辉杨建军; 关键词：溶瘤腺病毒肿瘤

双调控溶瘤腺病毒介导超抗原SEA基因靶向膀胱肿瘤表达被引量：5: 2010年; 目的构建携带SEA基因的选择性增殖腺病毒,体外实验观察SEA基因的表达及其刺激淋巴细胞对肿瘤的杀伤功能.方法构建一种由端粒酶（hTERT）和缺氧反应元件（HIF）双重启动的携带SEA的选择性增殖腺病毒,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测SEA在肿瘤细胞内mRNA表达,免疫荧光定位SEA表达于肿瘤细胞,Western blot测定蛋白表达,显微镜下动态观测淋巴细胞与肿瘤细胞共培养.酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素（IL）-4分泌.结果琼脂糖电泳252 bp处可见清晰条带;免疫荧光及Western blot用考马斯亮蓝染色显示在27 kDa附近可见蛋白清晰表达;淋巴细胞与肿瘤细胞共培养12、24、48 h实验组肿瘤细胞明显少于对照组,ELISA检测IL-4分泌量实验组均高于对照组（t=2.585 P＜0.05）.结论携带SEA基因的选择性腺病毒成功构建并表达目的基因,证明对肿瘤细胞的杀伤作用.; 胡建鹏郝林张培影范涛董秉政贺厚光贡震韩从辉; 关键词：膀胱肿瘤溶瘤腺病毒超抗原SEA

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江苏省自然科学基金(BK2009085)