江苏省自然科学基金(BK2009064)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：孙建方刘毅陈浩李小静王震英更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山东省立医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- let-7a微小RNA在黑素瘤中的表达及其对A375细胞增殖的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨甲醛固定石蜡包埋的黑素瘤组织中let-7a微小RNA（mieroRNA）的表达情况及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响.方法 选取黑素瘤蜡块13份,先天性色素痣蜡块10份,抽提microRNA,采用茎环引物逆转录为cDNA,然后采用Taqman MGB探针,相应的引物,进行实时荧光定量PCR.继而采用cy3标记的siRNA阴性对照物转染A375细胞,荧光显微镜下观察转染效率,最后将let-7a的模拟物转染入A375细胞,MTT实验检测转染后细胞增殖的变化.结果 从石蜡包埋组织中成功抽提出microRNA,而且定量PCR结果显示let-7a在黑素瘤中的表达明显低于色素痣组织（t=2.364,P＜0.05）.荧光显微镜下观察siRNA转染效率约80%～90%,hsa-let-7a转染A375细胞后,使其增殖受抑,转染后24 h抑制率达32.7%.结论 let-7a在黑素瘤中表达下降,过表达let-7a可使A375细胞增殖受到抑制,提示其在黑素瘤中可能起抑癌基因样作用.
- 王震英王焱薛燕宁徐秀莲曾学思孙建方
- 关键词：黑色素瘤微RNAS细胞增殖
- 核基质结合区结合蛋白在恶性黑素瘤细胞系的表达
- 2011年
- 目的:评价核基质结合区结合蛋白与恶性黑素瘤的相关性。方法:以取材自两个健康供者的原代培养黑素细胞和乳癌细胞系MDA-MB-231作为对照,应用RT-PCR方法,检测部分与肿瘤相关的核基质结合区结合蛋白(SMAR1、Lamin B1、Nucleohn、hnRNP U、SATB1、YBX1、CUX1和Lamin 132)mRNA在恶性黑素瘤细胞系A375、M14和MV3的表达。结果:所有被检测核基质结合区结合蛋白在正常黑素细胞均未见表达;在三个恶性黑素瘤细胞系均有表达的有SMAR1、Lamin B1、Nucleolin、hnRNPU、SATB1和YBX1,以Nucleolin、hnRNP U和SATB1的表达水平与正常黑素细胞的差异较大。乳癌细胞系MDA-MB-231与黑素瘤细胞表达谱相似。结论:Nucleohn、hnRNP U和SATB1等MARBP可能参与了黑素瘤的发生与发展。
- 张磊程芳李小静陈浩孙建方刘毅
- 关键词：恶性黑素瘤表观遗传学
- 窄谱中波紫外线对HaCaT细胞增殖及Gadd45α表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的探讨窄谱中波紫外线（NB-UYB）对HaCaT细胞表达Gadd45α及对细胞增殖、周期的影响。方法分别以100、200、400mJ／cm^2NB-UVB照射HaCaT细胞后，于6、12、24h收集细胞，采用RT-PCR和Western印迹检测Gadd45amRNA和蛋白水平的变化；CCK8法检测照射后对HaCaT细胞增殖的影响；流式细胞术检测照射后对HaCaT细胞周期的影响。结果HaCaT细胞表达Gadd45α，分别经100、200、400mJ／cm^2NB-UVB照射后，Gadd45α mRNA及蛋白表达水平均在6h升高，12h升高明显，24h表达下降，与未照射组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。三个剂量组照射后12h，Gadd45α mRNA相对A值分别为1．4360±0．6551、1．8633±0．0979、1．9266±0．1724，均高于对照组（0．6000±0．1276）（P〈0．05）；Gadd45α蛋白A值分别为0．0773±0．0005、0．1936±0．0015、0．2373±0．0015，较对照组（0．0290±0．0010）增高（P〈0．05）。NB-UVB照射对HaCaT细胞有抑制作用，其抑制增殖作用呈量效及时效关系；三组照射后HaCaT细胞周期发生改变，G2期细胞比例依次为13．53±1．03、17．77±2．25、30．03±4．29，较对照组（9．24±0．97）显著增高（P〈0．05），细胞周期被阻滞于G2期。结论NB-UVB照射后HaCaT细胞上调Gadd45α表达；Gadd45α可能参与了紫外线照射后HaCaT细胞增殖抑制、周期阻滞过程。
- 李小静王震英陈浩刘毅孙建方
- 关键词：紫外线角蛋白细胞细胞细胞增殖
- 核基质附着区结合蛋白与皮肤鳞状细胞癌的相关性研究
- 2011年
- 目的探讨核基质附着区结合蛋白（MARBP）与皮肤鳞状细胞癌（SCC）的相关性，筛选相关性较高的MARBP。方法以取材自2例SCC患者正常皮肤组织和HaCaT细胞作为对照，应用RT—PCR方法，检测部分已知与肿瘤相关的MARBP（CUX1、LaminB1、Nucleolin、hnRNPU、SAFB2、SATB1、YBX1）mRNA在12例SCC肿瘤组织和瘤旁组织、人皮肤鳞状细胞癌细胞系Colo-16细胞、人表皮癌A431细胞的表达水平。结果所有被检测的MARBPmRNA在2例正常皮肤组织均未见明显表达，在12例SCC肿瘤组织和瘤旁组织、Colo-16、A431细胞系中均有不同程度和不同比例的表达，在HaCaT细胞系中，除SATB1外，其余MARBPmRNA均有表达。SCC肿瘤组织和瘤旁组织MARBPmRNA表达水平的比较显示CUX1、Nucleolin和YBX1差异有统计学意义；LaminB1、hnRNPU、SAFB2和SATB1差异无统计学意义。结论CUXl、Nucleolin和YBX1等MARBPrnRNA可能参与SCC的发生、发展；
- 张磊刘毅陈浩程芳李小静方方赵亮王焱孙建方
- 关键词：鳞状细胞表观遗传学
