江苏省自然科学基金(BK2011676)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
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- 相关机构：江苏省农业科学院南京农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金更多>>
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- RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性被引量：2
- 2014年
- 本研究将已构建的SUC2-GroEL和pBI121-AC1-AC2植物表达载体共转化番茄,共获得19株卡那霉素抗性再生植株。经过PCR和RT-PCR检测,初步获得转SUC2-GroEL载体的阳性植株5株,转pBI121-AC1-AC2载体的阳性植株3株以及转SUC2-GroEL/pBI121-AC1-AC2双载体的阳性植株2株。利用TYLCV侵染性克隆农杆菌注射接种法对T0代转基因阳性植株进行抗性鉴定,获得抗TYLCV的转基因植株7株。对T0代未扩出病毒条带的T1代植株进行抗性鉴定,结果发现转SUC2-GroEL、pBI121-AC1-AC2、SUC2-GroEL/pBI121-AC1-AC2不同载体的株系植株中平均带毒率依次是35%、25%和15%,推断转双基因的植株的抗病能力优于转单个基因植株的抗病能力。
- 杨玛丽张保龙郭佳茹赵统敏余文贵赵丽萍王银磊
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒共转化转基因番茄
- 烟粉虱对几种药剂的敏感度检测及其抗药性相关基因的表达特征分析被引量：5
- 2012年
- 为筛选有效防治烟粉虱的药剂,采用琼脂保湿浸叶法,比较了烟粉虱成虫对生产上广泛喷施的5种药剂5%锐劲特、2.5%高效氯氟氰菊酯、4%阿维菌素、70%艾美乐、25%噻嗪酮的敏感性。对比得出烟粉虱对4%阿维菌素的敏感性较好,药剂处理72 h后成虫校正死亡率高达98.01%。70%艾美乐次之,烟粉虱成虫校正死亡率达80.91%。2.5%高效氯氟氰菊酯较差,处理72 h后成虫死亡率40.73%。25%噻嗪酮最差,处理烟粉虱成虫72 h后死亡率低于5.00%。CYP6CM1、Coe1基因分别是烟粉虱对吡虫啉类药剂、有机磷类药剂产生抗药性的重要响应基因,应用Semi-quantitive PCR检测药剂处理72 h烟粉虱成虫CYP6CM1和Coe1基因转录水平表达量变化。发现70%艾美乐处理后,CYP6CM1基因表达量显著升高,Coe1基因表达量与药剂处理前无明显差异。4%阿维菌素处理后,CYP6CM1基因表达量显著下降,Coe1基因表达量与药剂处理前无明显差异。2.5%高效氯氟氰菊酯处理后CYP6CM1基因表达量变化不大,Coe1基因表达量稍有增加。25%噻嗪酮处理后CYP6CM1基因表达量稍有增加,Coe1基因表达量略有下降。不同药剂对烟粉虱的防治效果与烟粉虱解毒酶基因(CYP6CM1、Coe1)的表达响应有一定的关系。
- 何鑫赵统敏张保龙赵丽萍杨玛丽余文贵侯喜林
- 关键词：烟粉虱药剂防治抗药基因
- 抗番茄黄化曲叶病基因Ty-2的SSR新标记被引量：5
- 2012年
- 采用集合分离分析法(Bulked segregant analysis,BSA),结合SSR分子标记技术筛选与抗病基因Ty-2连锁的标记。将感病材料TMXA48-4-0与含有Ty-2的抗病材料CLN2777A杂交,获得F2分离群体。利用前人初步定位的结果及构建的番茄SSR遗传图谱,选择11号染色体上TG36与TG393标记之间的SSR标记对构建的抗感池进行筛选分析,结果得到1个与Ty-2紧密连锁的呈共显性的分子标记TES0344,遗传距离为6.7 cM。利用F2分离群体和10份同源材料进一步验证了SSR标记TES0344的可靠性和稳定性,因此该标记可用于今后抗番茄黄化曲叶病毒病育种的辅助选择。
- 杨玛丽赵统敏余文贵赵丽萍
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒病SSR分子标记
- 转基因RNAi技术在番茄研究中的应用被引量：4
- 2015年
- RNAi(RNA interference)技术是一项基因沉默技术,能够阻断特定基因的表达,从而为探索未知基因的功能提供了一个很好的反向遗传学研究平台。番茄作为一种重要的蔬菜作物和模式作物,RNAi技术在其遗传改良进程中已得到了广泛应用。本文对RNAi技术在番茄基因功能、品质性状的遗传改良、抗病研究中的应用进展及其应用前景进行了综述。
- 杨玛丽赵统敏余文贵张保龙陈天子赵丽萍王银磊
- 关键词：RNAI基因沉默番茄
- 番茄抗黄化曲叶病毒病相关基因ClNLR的功能分析被引量：3
- 2014年
- 在前期通过转录组研究发现1个NBS-LRR类抗病基因(Solyc05g009760.1)在抗TYLCV番茄材料‘CLN2777A’中上调表达,推测可能参与抵抗TYLCV侵染的防卫反应的基础上,以‘CLN2777A’番茄为材料,通过RT-PCR克隆该基因全长cDNA序列,命名为ClNLR。荧光定量PCR发现ClNLR在番茄‘CLN2777A’的根和叶片中高水平表达。ClNLR在本氏烟叶片上的瞬时表达诱导了过敏性反应。病毒诱导的基因沉默(VIGS)抑制ClNLR基因在抗病番茄‘CLN2777A’中表达后,接种TYLCV,检测叶片带毒量,发现VIGS处理的番茄植株体内的TYLCV积累量与其ClNLR基因表达水平成反比。这些研究结果表明ClNLR可能为抗番茄黄化曲叶病的相关基因。
- 李楠杨玛丽陈天子张保龙赵统敏杨郁文刘廷利余文贵
- 关键词：番茄番茄黄化曲叶病毒NBS-LRR过敏性反应基因沉默
- LeHT1、Permease基因在抗、感番茄黄化曲叶病番茄中的表达特征被引量：1
- 2012年
- 选用分别含有抗番茄黄化曲叶病(TYLCD)基因Ty-1、Ty-2和Ty-3的3种抗病番茄材料(分别简称TY-1、TY-2和TY-3)和感病番茄品种(苏粉9号),利用携带TYLCV的烟粉虱对所选番茄材料幼苗接种病毒,从核酸水平检测抗病品系和感病品种的病毒侵入时间差异,并检测接种病毒前后己糖转运基因(LeHT1)和透性蛋白基因(Permease)在转录水平上的表达量变化。结果显示,感病品种与抗病品系TY-2在接种第2 d便检测到病毒,抗病品系TY-1和TY-3分别在3 d、15 d检测到病毒,说明病毒侵入时间早晚与番茄的抗病性没有直接关系。感病品种和抗病品系TY-1分别在接种后7 d、20 d有明显的发病症状,抗病品系TY-2和TY-3整个生育期均无发病症状。感病品种接种前LeHT1无明表达,接种后随时间增加表达量先上升后下降;抗病品系TY-2、TY-3在接种前有较高的表达量,接种后随时间增加呈下降趋势,抗病品系TY-1在接种后5 d时降至最低,随后稍有增加。接种后,Per-mease基因在感病品种中表达量显著提高,7 d后略有降低;抗病品系TY-1的Permease基因表达量先降低,15 d时表达量回升;抗病品系TY-2的Permease基因在接种后的表达量增加;抗病品系在TY-3中,Permease基因在接种前后表达水平变化不大,直至15 d时略有升高。接种前、后LeHT1和Permease基因在不同抗病材料和感病材料中具有不同的表达特征,表明不同抗源可能含有不同的抗病信号通路和抗病机制。
- 何鑫赵统敏郭佳茹张保龙陈天子赵丽萍杨玛丽余文贵
- 关键词：番茄
- RNAi介导的转基因番茄抗TYLCV研究被引量：1
- 2014年
- 本研究将TYLCV的AC1和AC2基因中的保守序列嵌合并构建反向重复序列的RNAi载体p BI121-AC1-AC2,通过农杆菌介导法转化番茄获得13株再生植株。结果表明,PCR及RT-PCR检测发现有3株转基因番茄成功表达T-DNA插入的外源基因片段。利用侵染性克隆农杆菌注射及烟粉虱传毒两种接种方法对其进行了抗性鉴定,表明2株转基因番茄植株对TYLCV表现抗性,为抗TYLCV育种提供了新的种质资源。
- 杨玛丽彭宏陈天子张保龙赵统敏余文贵赵丽萍
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒RNAI载体转基因番茄
