国家自然科学基金(31072202)
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 相关作者：陈松林张静董晓丽刘姗姗孙冰更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所大连海洋大学上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划山东省“泰山学者”建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 青鳉(Oryzias latipes)性腺分化与发育的组织学观察被引量：3
- 2013年
- 青锵（Oryzias latipes）繁殖力强、繁殖周期短，为硬骨鱼类研究领域的模式生物。口前，尚无青鲻性腺分化与发育过程的系统资料。该文以青鲻孵化后不同时期的生殖腺为材料，经石蜡切片和HE染色后，于光学显微镜下观察其性腺的出现、分化及成熟过程。结果显示：孵化后5～10d，仔鱼腹腔右侧已可见生殖腺，生殖细胞体积明显大于周围的体细胞；孵化后10d，性腺开始分化，雌、雄性个体性腺出现结构上的差异，雌性个体内可明湿观察到生殖包囊结构；随后，雌、雄性个体内先后可见卵子和精子的发生过程和组织学分期；孵化后50d，首见卵巢腔结构和成熟精子。此外，还观察到性反转现象的特例，即两性特征共存的现象。该结果将为发育生物学、遗传生物学提供基础资料。
- 张静黄进强李亚亚王娜孙建王天姿陈松林
- 半滑舌鳎抗缪勒氏管激素(AMH)基因的克隆及组织表达分析被引量：13
- 2013年
- 本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)AMH基因并对其进行表达分析。该基因cDNA序列开放阅读框长为1 563 bp,编码蛋白含520个氨基酸。该蛋白含有TGF-β超家族的特征序列,包含1个AMH-N区域和TGF-β结构域,并在C端生物活性区含有9个保守的半胱氨酸残基。系统进化分析表明,半滑舌鳎AMH和所有鱼类AMH聚为一簇,与鲽形目相似性最高。实时定量结果表明,AMH基因在半滑舌鳎不同组织中有差异表达,在正常雄鱼和伪雄鱼性腺中表达量最高。胚后不同时期性腺的实时定量结果表明,性腺分化之前AMH在精巢中相对表达量较低,70 dph(days post hatching)达到最高峰,而在卵巢中呈现先升高后下降的趋势,预示AMH基因可能在半滑舌鳎性腺发育中起重要作用。较正常雄鱼后代而言,AMH基因在伪雄鱼后代的雄鱼和伪雄鱼性腺中的表达都有升高的趋势,而在雌鱼中无明显差异,也预示其可能参与半滑舌鳎的性反转过程。
- 刘姗姗孙冰梁卓张静陈松林
- 关键词：半滑舌鳎克隆
- 磁珠富集法随机筛选大菱鲆基因组SNP标记被引量：1
- 2013年
- 利用磁珠富集法随机筛选了大菱鲆(Scophthalmus maximus)基因组7820bp的序列,获得了35个SNP标记,SNP标记的含量约为0.448%。超过68%的SNP标记由碱基转换造成,不足29%的SNP标记由碱基的颠换造成。使用磁珠富集法对目的基因KC70的检测发现,725bp的片段上发现7个SNP标记。此结果证实,该方法不仅能够随机筛选基因组SNP标记,还能筛选目的基因的SNP标记。
- 董晓丽徐建勇陈松林
- 关键词：SNPBST大菱鲆
- 半滑舌鳎WT1a基因的克隆与性别分化期的表达分析被引量：7
- 2014年
- 从半滑舌鳎（Cynoglossussemilaevis）全基因组序列中获得肿瘤抑制基因WT1a的部分序列，然后利用RACE技术克隆了WT1a基因的全长，运用组织学方法，对半滑舌鳎性腺分化早期的组织切片进行了观察，并分析了该阶段WTla的表达特征。克隆结果显示，WTla基因cDNA全长为1886bp，开放阅读框（ORF）长为1470bp，编码490个氨基酸，并且包含KTS三肽，5-UTR和3-UTR分别长为245bp和171bp。在ORF末端发现2个微卫星（SSR）序列和2个跨膜螺旋区域，而在其他物种中未发现这些区域。氨基酸序列分析显示，WT1a基因的保守性很高，与人的同源性高达90％。通过组织切片观察发现，该批半滑舌鳎在56d时性腺开始分化，并且卵巢分化早于精巢。荧光实时定量分析结果显示，WT1a在半滑舌鳎成鱼性腺中表达量显著高于其他各组织，在肝、肾、脾、心脏等组织中有微量表达，并且在成鱼性腺中，雄鱼表达量显著高于雌鱼，雌鱼显著高于伪雄鱼。在胚胎发育各时期以及初出膜后WTla的表达结果显示，在12h（原肠早期）显著升高，20h（神经胚期）达到最高。在性腺分化早期雌雄性腺中的表达结果显示，WT1a在雌雄半滑舌鳎16-66d的性腺中表达量持续平稳升高，在性腺分化时期表达量并没有特殊的变化。这些研究结果说明，WT1a基因是半滑舌鳎性别相关基因，并在半滑舌鳎的性腺分化、发育过程中持续表达，但可能对性腺的分化过程并不起决定作用。
- 张红陈松林刘洋温海深朱颖
- 关键词：半滑舌鳎实时荧光定量PCR
- 半滑舌鳎Dmrt4基因DNA全序列的克隆与表达分析被引量：3
- 2013年
- 克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Dmrt4基因DNA全序列,得到的序列长度为2 271 bp,包含1个内含子,2个外显子,与其他鱼类的同源性在90%以上。Dmrt4基因在雌性和雄性半滑舌鳎的7个组织中都有表达,有差异表达的组织是脑、垂体和性腺,雄性的表达显著高于雌性(P<0.05)。高温处理组的伪雄鱼中Dmrt4基因的表达与对照组的雌鱼没有显著差异(P>0.05),但是甲基睾酮处理组的雄鱼和伪雄鱼的表达显著高于对照组的雌鱼和雄鱼(P<0.05)。Dmrt4基因的表达在胚胎发育过程中呈现先升高后降低的趋势,在原肠期表达量最高,显著高于其他几个时期(P<0.05),从尾芽形成期开始恢复到多细胞期的表达水平,之后几个时期Dmrt4基因的表达无显著变化(P>0.05),一直到出膜前保持恒定。研究表明,Dmrt4基因是雄性中优势表达的基因,并且受雄性基激素调节,但并不是性反转的必要因素。这一研究为半滑舌鳎全雌群体的建立提供了分子水平的研究基础。
- 董晓丽陈松林
- 关键词：半滑舌鳎实时定量PCR
