广东省粤港关键领域重点突破项目(2006A25005001)
- 作品数:7 被引量:76H指数:6
- 相关作者:吴清平张菊梅徐晓可杨小鹃周艳红更多>>
- 相关机构:广东省微生物研究所广东环凯微生物科技有限公司中国科学院更多>>
- 发文基金:广东省粤港关键领域重点突破项目广东省科技计划工业攻关项目国家农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 食品中沙门菌特异性二重聚合酶链反应检测方法的研究被引量:6
- 2008年
- 目的建立二重聚合酶链反应(PCR)方法快速检测食品中的沙门菌(Salmonella spp.)。方法以沙门菌特异性基因invA、hilA为靶基因,选择2对引物对16株沙门菌和24株非沙门菌进行扩增,验证二重PCR的特异性。梯度稀释DNA,以不同稀释度的DNA PCR扩增。在猪肉中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增。应用该方法检测实际样品。结果以invA、hilA为靶基因的两对引物对沙门菌的检出均有很好的特异性,PCR能检出0.1332pg的沙门菌DNA,人工污染猪肉的检测限为2.5cfu/ml。本研究共检测了53份食品样品,有21份检出了沙门菌。结论建立了适用于肉类、水产品及蛋糕等食品中的沙门菌检测的快速、灵敏、特异的二重PCR方法。
- 徐晓可吴清平张菊梅周艳红邓梅清
- 关键词:沙门菌食品食品微生物食源性疾病
- 水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究被引量:9
- 2008年
- 建立快速检测水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahae-molyticus)的二重PCR方法。以副溶血性弧菌特异性基因tlh和toxR为靶基因,选择2对引物,对5株副溶血性弧菌和40株非副溶血性弧菌进行特异性检测;梯度稀释副溶血性弧菌基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增;在鱼肉样品中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增;应用该方法对实际样品进行检测。以tlh和toxR为靶基因的两对引物对副溶血性弧菌的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到28.76pg;人工污染样品,当起始污染量为1CFU/mL时,37℃增菌培养10h即可检出。本试验一共检测了21份水产品样品,有14份检出了副溶血性弧菌。
- 徐晓可吴清平张菊梅杨小鹃周艳红
- 关键词:副溶血性弧菌二重PCR水产品
- 三种食源性致病菌多重PCR检测技术建立及应用研究被引量:12
- 2008年
- 目的建立多重PCR方法同时检测水产品中沙门菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生性李斯特菌。方法分别以沙门菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和单核细胞增生性李斯特菌iap基因为靶基因,建立并优化了同时检测水产品中这3种致病菌的多重PCR体系,扩增产物分别为495bp(invA)、368bp(toxR)和660bp(iap)。结果建立的多重PCR方法可以简便、快速、灵敏地实现水产品中沙门菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生性李斯特菌的同时检测,人工污染水产品检测限为10cfu/ml。结论为无公害水产品食源性致病菌的快速检测提供了理想手段,有良好的应用前景。
- 杨小鹃吴清平张菊梅徐晓可周艳红
- 关键词:多重PCR沙门菌副溶血性弧菌单核细胞增生性李斯特菌食源性致病菌食品检测
- 三种金黄色葡萄球菌显色培养基检测效果的比较被引量:7
- 2009年
- 本文研究2种国外主流的金葡菌显色培养基和广东环凯微生物科技有限公司生产的PEN-TCF检测金葡菌的效果。通过研究3种产品对多种金葡菌菌株的回收率、最低检出限以及检测人工污染食品的回收率、特异性和抗干扰能力比较其检测效果。结果表明3种培养基的最低检出限相近,显色培养基A和PEN-TCF的回收率较高,但抗干扰能力较低;显色培养基B回收率稍低,而抗干扰能力较强;PEN-TCF和培养基B的特异性更优于培养基A。
- 黄汝添吴清平张菊梅郭伟鹏吴许文
- 关键词:金黄色葡萄球菌显色培养基
- 畜禽肉沙门氏菌和大肠杆菌O157多重PCR检测研究被引量:25
- 2008年
- 沙门氏菌和大肠杆菌O157都是目前世界公认引起食源性疾病的重要致病菌。本研究针对致病菌传统检测方法耗时长、过程繁琐的缺点,建立了同时检测畜禽肉及其制品中沙门氏菌和大肠杆菌O157的多重PCR分子检测方法。结果表明:分别针对沙门氏菌侵袭基因invA、大肠杆菌O157抗原基因rfbE建立的多重PCR方法可简便、快速、灵敏地实现对沙门氏菌和大肠杆菌O157的同时检测,整个过程在9h^10h内完成,人工污染猪肉检测限分别达到2.4×102cfu/mL(沙门氏菌)和2.2×102cfu/mL(大肠杆菌O157);为食源性致病菌的检测提供了理想手段,有良好的应用前景。
- 杨小鹃吴清平张菊梅徐晓可李程思李程思
- 关键词:畜禽肉多重PCR大肠杆菌O157
- 食品卫生微生物测试片检测技术进展被引量:12
- 2008年
- 吴毓薇吴许文吴清平黄汝添
- 关键词:微生物测试片