国家高技术研究发展计划(2004AA001350)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：蒋和生谢炳坤覃兆鲜韦英明莫毅更多>>
- 相关机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水牛生精上皮细胞的冷冻保存被引量：1
- 2009年
- 为探讨水牛睾丸生精上皮细胞冷冻保存的适宜冷冻保护剂及其浓度，在DMEM中分别添加不同浓度的冷冻保护剂二甲基亚砜（DMSO）、甘油（G）、丙二醇（PG）和乙二醇（EG），以及10％的胎牛血清（FBS），对3～5月龄水牛生精上皮细胞进行冷冻保存，解冻后台盼蓝染色测定细胞活率。结果显示，当以0％，5％，10％，15％，20％DMSO添加时，10％DMSO组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组（P〈0．05）；当以0％，20％，25％，30％，35％，40％G添加时，35％G组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组（P〈0．05）；当以0％，5％，10％，15％，20％，25％PG添加时，15％～25％PG各组的细胞解冻后活率均显著高于其他各组（P〈0．05），但以20％PG组为最高；当以0％，5％，10％，15％，20％EG添加时，5％～20％EG各组的细胞解冻后活率均显著高于0％EG组，但以10％EG组为最高；而对4种冷冻保护剂各最优浓度组的细胞解冻后活率比较，10％DMSO、35％G组的细胞活率均显著高于20％PG、10％EG组（P〈0．05）。结果表明，以添加10％DMSO或35％G于含10％FBS的DMEM冷冻液中．采用两步慢速冷冻，液氮保存，37℃水浴1min解冻，是一种具有较高复苏率的冷冻保存水牛生精上皮细胞的方法。
- 谢炳坤覃兆鲜韦英明蒋和生
- 关键词：冷冻保存水牛
- 沼泽型水牛发情期血清生殖激素的变化规律研究被引量：4
- 2008年
- 研究应用RIA法对沼泽型水牛发情期的血清生殖激素浓度进行测定,并分析了生殖激素的变化规律。结果表明:①同期发情的水牛在处理后至发情当天均有2个E2峰出现,第1个在发情前,第2个在发情后并与LH峰同时或之前2 h;②PMSG(肌注)+PG(肌注)处理的水牛出现发情前E2峰、发情后FSH峰和LH峰的时间为处理后24、60 h和63 h,而PMSG(肌注)+PG(子宫灌注)+LH(肌注)处理的水牛出现发情前E2峰、发情后FSH峰和LH峰的时间为处理后48、80 h和82 h;③各组水牛P4水平在发情后48 h内均低于0.8 ng/mL;④与自然发情水牛对比,同期发情处理可显著影响其发情期的FSH和LH内源性分泌水平(P<0.05);而对E2和P4均没有产生显著性的变化(P>0.05)。
- 谢炳坤覃兆鲜公方强韦英明莫毅蒋和生
- 关键词：生殖激素发情期水牛
- 水牛精原细胞的体外培养及分化被引量：1
- 2009年
- 以探讨水牛精原细胞体外培养的发育潜能为目的,对3～5月龄水牛睾丸组织进行精原细胞与支持细胞的体外共培养。两步酶法消化睾丸组织来制备水牛生殖细胞悬液,接种于含10%FBS的DMEM培养液中,在37℃、5%CO2、饱和湿度下培养30d,观察细胞的生长和形态变化,并对培养4周的细胞进行RT-PCR分析,以检测PRM-2和TP-1基因的表达情况。结果显示,水牛精原细胞体外培养24h后,精原细胞(10.0～12.5μm)呈圆形并紧贴支持细胞上;培养7～8d后,精原细胞出现聚集状态;培养10d后,有细胞克隆形成;培养30d后,出现似长形精子细胞(8.0～10.0μm)。对培养4周后的细胞进行RT-PCR分析,精子细胞特异表达基因PRM-2被检测出来。结果表明,采用本试验体外培养条件对水牛精原细胞进行培养,能够满足精原细胞体外长期培养的需要,并可以发生增殖与分化而形成似精子细胞。
- 谢炳坤覃兆鲜王新平谢体三蒋和生
- 关键词：精原细胞体外培养水牛
