黑龙江省自然科学基金(D201283)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：史久慧王屹博丁超杜杰董淑凤更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属口腔医院东北农业大学哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金教育部重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 猪骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:建立猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)体外分离培养、纯化和鉴定的方法,为下一步实验研究奠定基础。方法:采用密度梯度离心法获得骨髓单核细胞,接种后形成单层贴壁的成纤维样细胞。免疫荧光及PCR检测细胞表面标志及多能性基因的表达,并鉴定分离细胞的多向诱导分化潜能。结果:体外培养的原代细胞10天达到融合,传代后仍具有成纤维样的形态;免疫荧光结果见波形蛋白(Vimention)和Oct4标记阳性,CD45阴性;PCR分子检测见多能性基因OCT-4,nanog的表达;细胞具有分化为成骨细胞和成脂细胞的能力。结论:采用密度梯度离心法获得的pMSCs体外增殖能力强,纯度高,具有间充质干细胞的特性,pMSCs分离培养体系的成功建立为下一步实验研究奠定基础。
- 杜杰史久慧王屹博丁超董淑凤
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养
- 高糖对人骨髓间充质干细胞成骨能力影响的体外研究被引量：2
- 2013年
- 目的:体外模拟糖尿病病人高血糖状态,观察高糖对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)成骨能力的影响。方法 :将使用不同含糖量培养液体外培养的hMSCs分为5.5mmol/L生理糖浓度组、25mmol/L高糖组、44 mmol/L高糖组。CCK-8试剂盒检测各组hMSCs的增殖速度;骨诱导7、14、21 d时分别观察高糖对hMSCs骨向分化相关基因骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runx相关因子2(Runx-2)的表达,碱性磷酸酶(ALP)活性,钙沉积量的影响。结果:两个高糖组相对生理糖组,有抑制hMSCs的增殖能力(P<0.05),且抑制ALP活性及细胞外钙基质沉积,下调了骨向分化相关基因OCN、OPN、Runx-2表达水平(P<0.01),该抑制作用随糖的浓度升高而加强。结论:高糖显著抑制了hMSCs生物矿化过程,并以浓度依赖的方式降低hMSCs的增殖及成骨能力。
- 杜杰史久慧王屹博丁超董淑凤
- 关键词：人骨髓间充质干细胞成骨分化体外研究
- 糖浓度对三维培养体系下小鼠胚胎干细胞成骨分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨明胶海绵作为小鼠胚胎干细胞(ESCs)成骨诱导支架材料的可行性,并考察葡萄糖浓度对三维培养体系下小鼠ESCs骨向分化的影响。方法:体外培养小鼠ESCs,将消化所得的单细胞接种到可降解明胶海绵上,分别于高糖骨诱导培养液和低糖骨诱导培养液中进行培养,同时设立自然分化对照组。结果:诱导后第7、14天茜素红染色结果显示,高糖组矿化结节数少于低糖组。结论:明胶海绵可以作为小鼠胚胎干细胞体外成骨诱导的培养支架;在骨诱导过程中高葡萄糖浓度抑制了小鼠胚胎干细胞的骨向分化能力。
- 高雨蔚张宇邢舰誉王屹博丁超薛冰华吕嘉伟史久慧刘忠华
- 关键词：小鼠胚胎干细胞明胶海绵成骨分化
