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登革病毒检测技术研究进展被引量：4: 2013年; 登革病毒可导致登革热、登革出血热和登革休克综合征,准确快速的早期诊断对其预后非常关键,因此登革病毒检测技术的发展势在必行。在此,我们简要综述目前的登革病毒分离、血清学检测、分子生物学检测技术进展。; 吴忠华罗鹏徐琦何蕾吕沁风; 关键词：登革病毒血清学检测分子生物学检测

三重LAMP法检测食品中沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌被引量：35: 2013年; 为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基因,设计出3套LAMP引物。以8株代表目标菌株,三重LAMP反应体系中Mg2+浓度4.6mmol/L、扩增温度61℃。通过电泳检测、离心观察沉淀和荧光检测证明该方法能够在90min内一次性检出以上3种致病菌。3种菌的检测灵敏度均约为10fg/μL,是PCR检测灵敏度(10pg/μL)的1000倍。以无害李斯特菌等常见的20株非目标菌株为对照,证明了此方法的特异性。LAMP产物DNA测序结果与预期一致,证明了该方法的正确性。该三重LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏度高的优点,适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的快速检测。; 姜侃吕沁风汪新夏琳张峥陈小珍; 关键词：LAMP 沙门氏菌金黄色葡萄球菌单增李斯特菌

浙江入境人员登革热病毒IgG抗体调查分析被引量：3: 2014年; 目的了解浙江入境人员登革热病毒的感染情况,为口岸登革热防控提供预警信息。方法随机抽取浙江口岸入境人员662名,采用ELISA方法进行血清学登革热IgG抗体检测。结果检出IgG抗体阳性者246名,阳性率为37.16%。根据入境人群的地区进行划分东南亚及南亚地区的IgG抗体阳性率较高,分别为68.29%和66.39%。其中来自印度的入境人员人数最多,且阳性率较高,大部分前往浙江省绍兴地区,应予以高度重视。结论来自疫区入境人员中检出率较高,输入风险隐患较大,建议口岸有必要加强登革热的检疫及宣传防治,防止输入性病例的发生。; 吕沁风何蕾罗鹏郑伟吴忠华沈若川; 关键词：登革热 IGG抗体

一种用于检测恶性疟原虫的双环引物环介导等温扩增方法: 2015年; 目的:设计一种快速环介导等温扩增(LAMP)检测方法,用于恶性疟原虫的检测。方法:根据恶性疟原虫18S r RNA基因设计一组引物,包括外引物、内引物、环引物及第二对环引物,用于恶性疟原虫的LAMP检测。结果:双环引物LAMP检测法灵敏度可达10拷贝DNA模板/μL,可特异地检测出恶性疟原虫DNA,3次重复试验Ct值的CV小于5%,比普通加环引物LAMP检测法时间缩短10 min左右,提高了反应的检测效率。结论:建立的双环引物LAMP方法是一种高效、快速的检测方法。; 吕沁风姜侃杨永耀何蕾罗鹏吴忠华; 关键词：环介导等温扩增恶性疟原虫

流行性感冒病毒监测及检测技术的研究进展被引量：4: 2014年; 流感病毒是一种常见的呼吸道感染病毒,平均每年有数十万人死于该种病毒,造成严重危害。流行性感冒病毒包括甲型、乙型和丙型三种亚型,本文就近年来流感病毒的流行趋势、病毒分离培养、血清学检测以及分子生物学检测的研究进展进行了综述。; 徐琦何蕾罗鹏杨永耀吕沁风; 关键词：流行性感冒病毒

转基因玉米Bt176细胞毒性及遗传毒性研究被引量：1: 2013年; 利用细胞-遗传毒理学技术评价转基因玉米Bt 176细胞毒性及遗传毒性,分别以200,100,50,25,12.5mg·L-1转基因玉米Bt 176全蛋白质作用于人淋巴细胞,并各孵育1.5,6,24 h.检测其细胞毒性损伤及遗传毒性损伤,并与空白组、阳性对照组、非转基因玉米组相比较.结果表明,阳性组与空白组淋巴细胞的遗传及细胞损伤指标存在显著差异.转基因玉米组淋巴细胞遗传及细胞损伤指标与非转基因玉米组淋巴细胞相比无明显差异(P>0.05),且与空白剂组细胞差异不显著(P>0.05).结果还表明,转基因玉米Bt 176与非转基因玉米两者在遗传毒性及细胞毒性上性状相似,实质等同.; 郑伟吕沁风吴忠华陈吴健徐琦张明哲吴志毅李禾; 关键词：转基因玉米

猴痘病毒LAMP检测方法的研究被引量：4: 2013年; 目的:为了防止猴痘病毒传入我国,建立一种快速检测猴痘病毒的方法。方法:合成猴痘病毒的特异性基因,转入质粒作为阳性样本,运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)设计一套特异性引物,优化反应条件,在等温条件下特异性地快速检出猴痘病毒。结果:阳性质粒扩增产物电泳可见特异性阶梯状条带,离心后可见白色沉淀,对照组其他不同病毒均不能扩增出阳性反应;加入荧光染料后,阳性样本产生强绿色荧光,其他病毒株呈弱荧光信号。结论:该方法提供了一种检测猴痘病毒的技术手段,可在简便的实验环境中快速、特异、灵敏地检测猴痘病毒。; 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏何蕾徐琦李禾; 关键词：猴痘病毒 LAMP

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质检公益性行业科研专项项目(201010043)