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排序方式：

肺癌组织中puma基因第三外显子扩增的实验条件研究及应用: 2009年; 目的优化肺癌组织中puma基因第三外显子（GC含量〉80％）PCR扩增的最适实验条件，应用此条件对34例肺癌组织中puma第三外显子进行突变研究，探讨其与肺癌发生发展的相关性。方法通过改变PCR反应体系各组分的浓度和反应条件，确定puma基因第三外显子PCR扩增体系最适浓度和反应条件。应用优化后的反应体系扩增34例肺癌puma第三外显子，测序寻找突变。结果PCR反应体系为dNTP200μmol／L，增强体系MgS042．0mmol／L，引物500nmol／L，TaqDNA聚合酶0．1U／μl，模板量不低于4000ng，10×增强体系缓冲液5μl，增强液5μl，总体积50μl。反应条件为95℃预变性5min，95℃45s，64℃45S，72℃45S，循环33次，最后72℃延伸5min。应用以上最适条件，成功扩增34例肺癌患者puma基因第三外显子，经测序均无突变。结论肺癌患者puma基因第三外显予突变与肺癌的发生发展及肺癌的病理类型之间无明显相关。; 李娅王玉明段勇刘华; 关键词：PCR 肺癌突变

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云南省自然科学基金(2008ZC116M)