河南省高校科技创新团队支持计划(13IRTSTHN009)
- 作品数：24 被引量：69H指数：5
- 相关作者：李芬吴秀丽刘国生杨清香刘冬更多>>
- 相关机构：河南师范大学河北农业大学河南理工大学更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划国家自然科学基金河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 高产类胡萝卜素酵母菌的诱变选育被引量：1
- 2015年
- 从12株红酵母菌中筛选得到一株生物量和类胡萝卜素产量较高的菌株KC 8,以KC 8为出发菌株,依次经ARTP诱变、亚硝酸钠诱变、紫外诱变、紫外-亚硝酸钠复合诱变,再进行一轮ARTP诱变。测得KC 8类胡萝卜素产量为8.67 mg/L,26 S r DNA测序表明,该菌株与胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)100%相似性;最终从1 000株诱变存活菌株中筛选得到高产类胡萝卜素突变菌株K 4,产量为15.14 mg/L,为出发菌株的1.75倍,经高效液相色谱(HPLC)分析表明该菌株所产类胡萝卜素的主要成分为β-胡萝卜素。
- 刘冬王盼亮蒿洪欣杨清香
- 关键词：红酵母类胡萝卜素诱变
- 埃希菌催化合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷被引量：2
- 2014年
- 利用埃希菌(Escherichia sp.)AEM0812细胞催化阿糖尿苷和2,6-二氨基嘌呤合成阿糖鸟苷中间体阿糖2,6-二氨基嘌呤核苷。通过优化反应条件,得到最适酶促反应条件为:在60 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中加入15%埃希菌AEM0812细胞及60 mmol/L阿糖尿苷和60 mmol/L 2,6-二氨基嘌呤,60℃反应48 h。在上述条件下,阿糖尿苷的转化率可达95.2%。
- 曹倩杨灵刘国生李金鑫邢善涛
- 关键词：埃希菌生物合成
- ARTP诱变选育高产油脂酵母菌被引量：3
- 2016年
- 从实验室保藏的15株酵母中筛选获得一株油脂产量相对较高的酵母菌KC 8,经96 h摇瓶发酵培养后,油脂产量为1.22 g/L。利用分子生物学鉴定,该菌株的26SrDNA序列与胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)具有100%相似性;以KC 8为出发菌株,经ARTP诱变,最终从300株诱变存活菌株中筛选得到高产油脂突变菌株Y3,经96 h摇瓶发酵培养后,油脂产量为2.38 g/L;对菌株Y3的培养条件进行优化,菌株在葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源,碳氮比为90∶1,培养基初始pH为6.5时,在28℃恒温条件下摇瓶发酵培养96 h后,油脂产量最高达到了3.96 g/L;GC-MS对油脂组分进行分析结果表明,该脂肪酸主要由棕榈油酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、二十碳烯酸和二十四烷酸组成,与植物油成分相似。
- 刘冬邱婧云王霞钟海清万琳琳杨清香
- 关键词：酵母油脂脂肪酸组分
- 烟草新驱动蛋白基因NtTKR原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化
- 2017年
- 通过对烟草驱动蛋白家族新成员Nt Tkr尾部的酵母双杂交筛选,得到多个与Nt Tkr互作的候选蛋白。为进一步验证NtTkr与候选蛋白之间的相互作用,以p GBKT7-Nt Tkr质粒为模板,PCR扩增烟草NtTKR全长,将其克隆入原核表达载体pMXB10,重组质粒pMXB10-NtTkr-3582经生物公司测序,结果正确。将其转化为BL21(DE3),IPTG诱导其表达目的蛋白,经几丁质法纯化及SDS-PAGE检测,结果表明笔者得到了高纯度的目的蛋白。该试验为进一步运用Pull Down确定Nt Tkr与候选蛋白之间的体外互作及深入研究该蛋白的其他生物学功能奠定了基础。
- 乔慧聪任向波吴秀丽李芬
- 关键词：烟草纯化
- GUS报告系统在植物基因功能研究中的应用和优化被引量：5
- 2014年
- β-葡糖醛酸酶(GUS)报告系统是现代分子生物学研究领域中被广泛使用的一种重要工具,在解析基因时空表达调控的研究中发挥着重要作用.本文概述了报告基因GUS的生化特性及检测手段,从启动子元件鉴定、基因诱捕、无标记转基因技术等方面论述GUS的应用现状和优势,并针对内源GUS、GUS抑制因子等问题和改进优化手段进行了分析,为该技术在植物功能基因研究中进一步拓展提供新线索和思路.
- 杨丹丹王俊杰梁卫红
- 关键词：转基因植物功能分析
- N离子束注入与DES复合诱变选育腺苷高产菌株被引量：5
- 2017年
- 为了获得腺苷高产菌株,以肌苷产生菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HSD1206(Ade-、Thi-、SGr)为出发菌株,通过硫酸二乙酯(DES)处理、N离子束注入进行单因子和复合诱变。参照菌种致死率曲线,确定N离子束注入250 s与DES处理10 min为最佳诱变时间。经过多轮诱变和筛选,获得了黄嘌呤、硫胺素、组氨酸三重缺陷型,腺嘌呤脱氨酶活性缺失及磺胺胍抗性菌株DI4-24和DI4-182,其遗传标记为Xan-、Thi-、His-、Deam-、SGr,连续传代后性状稳定,在优化的发酵培养基中发酵后腺苷产量可分别达到18.56 g/L和17.13 g/L。由此证明,通过物理、化学复合诱变,阻断枯草芽孢杆菌营养缺陷型菌株产肌苷途径,打通合成腺苷途径的诱变思路在实验室环境下是可行的。
- 刘国生李金鑫刘磊谷艳昌许航
- 关键词：腺苷离子束注入硫酸二乙酯复合诱变
- miRNA对水稻非生物胁迫的应答被引量：1
- 2014年
- MicroRNA(miRNA)是一类小的非编码RNA,它主要通过对转录后水平靶mRNA的切割以及抑制mRNA的翻译调控基因表达,参与植物的生长发育和胁迫应答等多种生物学过程。综述了miRNA的发生和调控机制,重点介绍了miRNA对水稻非生物胁迫应答的研究进展,并对研究过程中存在的问题进行讨论,为更好地了解miRNA及其靶基因在提高水稻产量和抗逆方面的作用,进一步解析miRNA在水稻中的调控机制提供参考。
- 郝雨帆王俊杰杨丹丹张静闫鑫甜梁卫红
- 关键词：MIRNA水稻非生物胁迫
- 污水处理系统中染料脱色酵母菌的筛选及脱色性能被引量：1
- 2013年
- 从某印染厂和制药厂的污水处理系统中筛选了21株脱色酵母菌,测定了各菌株对染料RB5,M-3BE、KNR的脱色能力以及锰依赖过氧化物酶(MnP)的产生情况.结果表明,培养72h时有18株酵母菌对RB5,M-3BE的脱色率超过90%,且检测到MnP活性.26SrDNA序列分析结果表明,脱色酵母菌主要属于Rhodotorula mucilaginosa,Dipodascus capitatus,Torulaspora delbrueckii,Candida parapsilosis,Candida zeylanoides和Debaryomyces hansenii.
- 张昊李晶张帆蒿洪欣许园园刘冬韩新宽杨清香
- 关键词：污水处理酵母菌染料脱色
- 不同裂解液对血管蛋白提取和磷酸化蛋白免疫印迹的影响被引量：4
- 2015年
- 为寻找一种适合血管组织蛋白提取的裂解液配方以及用于磷酸化蛋白的免疫印迹分析,运用3种不同的细胞裂解液A,B和C,分别对经预处理的等量猪冠状动脉血管样品进行总蛋白的提取,BCA法测蛋白含量,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测pERK,p-AKT,p-MLC和p-MYPT1 4种磷酸化蛋白表达以比较3种裂解液的裂解效果.结果表明,3种裂解液均可以满足一般免疫印迹分析的要求,其中C液提取的蛋白浓度最低,B液提取的蛋白含量最高,但不适于低含量的小分子磷酸化蛋白p-MLC的检测,A液用于免疫印迹检测大、中、小3种分子量的磷酸化蛋白效果最佳.即细胞裂解液A(50mmol·L-1 pH 7.4Tris-HCl,150mmol·L-1 NaCl,0.1%SDS,1%NP-40,1mmol·L-1 EDTA,1mmol·L-1 EGTA,临用前加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂)可作为提取血管组织总蛋白进一步用于Western检测的一种理想配方.
- 任向波吴秀丽李芬
- 关键词：血管免疫印迹
- 降解类胡萝卜素产香细菌的筛选及鉴定被引量：14
- 2014年
- 本实验从常年落花的土壤中分离到了6株能降解类胡萝卜素并且产生香味的菌株。形态学观察和16S rDNA序列分析表明,其中有3株与Bacillus subtills和Bacillus tequilensis聚在一起,2株与Bacillus methylotrophicus和Bacillus pum ilus相似性最高,1株菌与Bacillus licheniformis亲缘关系最近。通过透明圈观察和OD495 nm判定培养基中的类胡萝卜素明显被降解,并且通过气相色谱-质谱法初步分析了其降解产物,产物中主要为2-庚酮、棕榈酸、邻苯二甲酸酐等物质。
- 蒿洪欣许园园刘冬韩新宽牛天琦郭玉辉祈诗月杨清香
- 关键词：类胡萝卜素芽孢杆菌
