四川省教育厅重点项目(11ZA148)
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
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- siRNA干扰MACC1基因对食管癌细胞TE-1的生物学影响被引量:6
- 2014年
- 目的通过siRNA干扰沉默结肠癌转移相关基因1(metastasis.associatedincoloncanceY1,MACCI),观察其对食管癌细胞株TE-1增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法通过化学合成的特异性siRNA与阳离子脂质体Lipofectamine TM 2000形成复合体,转染食管癌细胞株TE-1,应用qRT-PCR、Westernblot检测转染后MACCl基因和蛋白表达水平;MTT法检测细胞生长增殖水平;划痕实验、Transwell实验检测细胞株干扰前后迁移侵袭能力的改变。结果siRNA.MACCl转染TE一1细胞后,与空白组比较,干扰组MACCl基因和蛋白的表达水平明显降低,分别降低71%和87%;MTT实验观察1—7d,干扰组较空白组、阴性对照组增殖速度明显降低(P〈0.05),第4天后效果更明显;划痕实验结果显示干扰组迁移划痕处的细胞(10.6±2.2)明显少于空白组(68.2±2.5),差异具有统计学意义(P〈0.05),各对照组间无统计学差异(P〉0.05);Transwell实验结果显示干扰组穿过膜的TE-1细胞数目(4.2±1.9)较空白组(58.4±7.4)明显减少(P〈0.05),各对照组间无统计学差异(P〉0.05),表明干扰后TE-1细胞的迁移侵袭能力显著降低。结论siRNA.MACCl干扰导致TE-1细胞MACCl基因及蛋白表达水平明显下调;MACCl基因下调后,食管癌TE-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均明显降低,说明MACCl基因具有促进食管癌细胞增殖、迁移、侵袭的能力。
- 吴剑张敏戴天阳任德莲
- 关键词:食管鳞癌细胞迁移肿瘤侵袭
- MACC1在人食管鳞癌中的表达及对侵袭的影响被引量:2
- 2014年
- 目的分析结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)在人食管鳞癌组织中的表达及其与临床病例特征间的关系;研究MACC1基因在食管鳞癌侵袭转移中的生物学功能。方法采用免疫组化S-P法检测MACC1在食管鳞癌组织中的表达,结合临床病理特征分析MACC1表达与食管鳞癌侵袭、迁移之间的关系及其临床意义;采用脂质体法将质粒shRNA-MACC1转染食管鳞癌细胞株ECA109,采用G418压力培养筛选稳定转染ECA109阳性细胞,通过荧光定量PCR、Western blot检测ECA109阳性细胞MACC1基因和蛋白的表达,通过MTT、Transwell检测ECA109阳性细胞增殖能力、侵袭能力的变化。结果免疫组化结果显示食管鳞癌组织MACC1阳性率(94.1%)显著高于癌旁组织(37.3%),差异具有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌上皮细胞中MACC1强阳性率(90.0%)显著高于非典型增生食管上皮细胞(15.0%),差异具有统计学意义(P<0.05),未明显增生食管上皮细胞中MACC1表达为阴性;在性别、年龄、肿瘤大小、病变部位、分化程度以及浸润深度分组比较中,MACC1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。在体外实验中,随着MACC1表达下调,ECA109细胞增殖能力、侵袭迁移能力明显下降。结论 MACC1与食管鳞癌侵袭迁移密切相关;MACC1在非典型增生食管上皮和食管鳞癌组织中异常表达,在由异常增生到食管鳞癌的过程中,MACC1蛋白表达随之升高,提示MACC1基因与食管鳞癌发生、发展密切相关。
- 吴剑戴天阳张敏任德莲
- 关键词:食管鳞状细胞癌