“十五”国家科技攻关计划(2004BA519A054)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李印邓国华陈化兰丁晴薇于洋更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所华南农业大学湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 具有HI活性的H1亚型流感病毒特异性单克隆抗体的制备与应用
- 2010年
- 为了制备具有HI活性的HI亚型流感病毒特异性单克隆抗体(MAb),本研究以H1N1亚型猪流感病毒(SIV)株A/Swine/Guangdong/718/01(H1N1)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,经常规细胞融合后,血凝抑制(HI)方法进行检测,融合细胞经稀释克隆纯化后,获得11株能稳定分泌抗血凝素特异性HI MAb的杂交瘤细胞株。鉴定表明,所获MAb与其他具有血凝活性的病毒以及其他14个HA亚型的流感病毒均不具有HI交叉反应,表明这11株MAb均具有良好的流感病毒亚型特异性。其中A6F、2BBF和2BB与其他H1亚型流感病毒分离株的HI试验证实我国不同地区分离株之间的抗原性存在一定差异。11株MAb对H1SIV抗原的HI试验结果显示其HI效价有明显差异。叠加实验表明这些MAb分别识别HA抗原的不同表位。间接免疫荧光试验表明,2BBF、8HB、1DH、7FC和2BB均可与2009年流行H1N1病毒A/California/04/2009HA抗原发生特异性反应。这些MAb特异性的研制为H1亚型流感病毒的疫情病原学快速诊断以及病毒抗原性变异的相关研究提供了物质基础。
- 李印邓国华王桂芹杨焕良乔传玲陈化兰
- 关键词：血凝抑制单克隆抗体间接免疫荧光
- 流感病毒RNA聚合酶串联亲和纯化方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为建立流感病毒RNA聚合酶的串联亲和纯化方法,本实验由鸡胚尿囊液中提取病毒核酸,经过RT-PCR和常规PCR方法扩增禽流感病毒株A/Duck/Guangxi/35/01(H5N1)的PB1、PB2和PA的cDNA。分别将PB2基因连接于pcDNATAP载体中,PB1和PA基因连接于pcDNA3A载体中构建了pcDNA-35PB2TAP、pcDNA-35PB1和pcDNA-35PA重组质粒。将构建的真核表达重组质粒共转染293T细胞,经过串联亲和纯化方法获得流感病毒依赖RNA的RNA聚合酶复合体(RdRp)。利用RNA体外合成试验验证获得的RdRp具有生物学活性。
- 李印邓国华崔佳莹于洋丁晴薇陈化兰
- 关键词：H5亚型禽流感病毒串联亲和纯化
- 禽流感病毒RNA聚合酶串联亲和纯化方法的建立
- 本实验利用TRIzol Ls Reagent从感染鸡胚尿囊液中提取流感病毒核酸,经过反转录PCR和常规PCR方法扩增出禽流感毒株A/Duck/Guangxi/35/01(H5N1)的PB1蛋白、PB2蛋白和PA蛋白的cD...
- 李印邓国华崔佳莹于洋丁晴微陈化兰
- 关键词：H5亚型禽流感串联亲和纯化
- 文献传递
