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大鼠骨髓基质细胞的培养及生物学特性鉴定被引量：1: 2010年; 次传代得到较纯的MSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态,应用免疫细胞化学方法对细胞的表面抗原标志进行检测。取3代MSCs,B-ME诱导6小时候后,倒置相差显微镜下观察细胞形态,应用免疫细胞化学方法鉴定诱导后细胞的表型特征。结果:倒置相差显微镜观察发现,接种后24h,细胞开始贴壁。培养3代以后,细胞呈梭形或多角形,折光性好,核为圆形、居中。免疫细胞化学检测细胞表面抗原显示:CD34-、CD45-、CD29+、CD44+、CD90+。诱导后细胞发出突起,逐渐生长延伸并彼此相连,形态学上具有神经细胞的明显特征。免疫细胞化学显示诱导后细胞NSE(神经元特异性烯醇化酶)阳性。结论:所采用的细胞分离培养方法简便可行,所获得的细胞其表型特征与文献报道一致,且具有向神经细胞分化的潜能.; 王倩于娜姜玉峰赵娟罗星黄瑾; 关键词：骨髓基质细胞生物学特性

Neuritin蛋白对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝蛋白与生长相关蛋白43表达的调节: 2011年; 目的研究Neuritin蛋白对大鼠急性脊髓损伤（SCI）后神经中丝蛋白（NF200）与生长相关蛋白43（GAP-43）表达的调节.方法用改良Allens WD法致伤大鼠T10节段脊髓.实验组经蛛网膜下腔置管局部连续给药Neuritin蛋白（6 μg/d）7 d,对照组给予等量HIS蛋白.术后3、7、14、28、42 d给予免疫组织化学染色观察损伤段脊髓NF200、GAP-43的表达.结果损伤后7、14、28、42 d,实验组NF200与GAP-43的累加积分光密度值（integrated option density, IOD SUM）明显高于对照组（P＜0.05）.其中,NF200伤后7 d仅有个别细胞阳性,28 d时最为明显 GAP-43在脊髓损伤后表达上调,伤后14 d最为明显,之后逐渐下降.结论急性脊髓损伤后,Neuritin蛋白体内给药可上调NF200与GAP-43的表达.; 席绍松史晓蓓李东正刘维钢黄瑾; 关键词：NEURITIN 脊髓损伤生长相关蛋白

Neuritin过表达对BMSCs增殖的影响: 2011年; 目的:为全面了解Neuritin的功能,探讨Neuritin对细胞增殖的影响。方法:利用已构建Neuritin真核表达载体pcDNA3.1(-)A-Neuritin,转染BMSCs,通过MTT、细胞计数等观察Neuritin过表达对BMSCs增殖的影响。结果:MTT检测结果显示,BMSCsneu约在第3天进入对数生长期,第5天进入平台期;细胞计数结果显示,Neuritin过表达与BMSCs的数目呈负相关,并且在各检测点上,稳定表达Neuritin的BMSCs数目均低于对照组。结论:Neu-ritin过表达抑制了BMSCs的增殖。; 王红颖徐芬黄瑾; 关键词：细胞增殖

神经营养因子与脊髓损伤的基因治疗被引量：5: 2009年; 在20世纪80年代以前（central nervous system，CNS）人们普遍认为中枢神经系统损伤后不具备再生的能力．所以脑和脊髓损伤一直是临床最难处理的问题之一．现在认为CNS再生困难的主要原因并不是神经元本身的问题．而是受损CNS内缺乏适合神经元轴突再生的微环境．其中脊髓损伤处缺乏神经营养因子类物质被认为是脊髓损伤后神经再生失败的主要原因。因为没有神经营养因子的支持．大部分被切断的神经元轴突甚至其胞体将逐渐溃变：没有神经营养因子的支持和诱导．被切断的轴突更无法进行再生。; 席绍松刘维钢黄瑾; 关键词：脊髓损伤基因治疗中枢神经系统损伤神经元轴突轴突再生 CNS

Neuritin蛋白表达、纯化技术改进被引量：1: 2009年; 目的:在前期实验的基础上,进一步筛选Neuritin高表达酵母菌并对其纯化方法做进一步的改进从而提高其纯化效率。方法:通过G418诱导表达,筛选Neuritin高表达酵母菌;毕赤酵母表达菌株GS115/pPIC9K-neuritin经1%甲醇诱导表达,再行SDS-PAGE电泳;经Bradford法鉴定,分析在纯化过程中硫酸铵盐对其亲和层析效率的影响。结果:得到高表达neuritin的单克隆酵母菌,诱导上清Neuritin蛋白最大表达量为0.148mg/ml,透析除盐组较未透析除盐组Neuritin蛋白纯化效率高。结论:硫酸铵盐降低了Neuritin蛋白与镍柱的亲和性。; 张峤罗星黄瑾; 关键词：纯化鉴定

骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的研究被引量：4: 2010年; 无论是在体外实验、还是在体内实验,MSCs都可以向中枢神经系统(CNS)神经细胞分化,但争议颇多。因为功能性神经元不仅要具有典型神经元的形态、特异性标记,还要求具有可兴奋性、能和其他神经元形成突触联系、产生突触电位等,所以对于骨髓间充质干细胞是否能诱导出真正具有功能的神经元存在很大分歧。在此对MSCs向神经细胞诱导分化研究的现况、存在的问题及发展前景给以综述。; 李东正王倩李俊娜黎兴毅于娜黄瑾; 关键词：骨髓间充质干细胞神经细胞分化

骨髓基质细胞诱导分化为神经细胞的研究进展被引量：1: 2009年; 骨髓基质细胞是一类起源于骨髓中支持结构的细胞,在适当的实验条件下能分化为神经细胞,为细胞移植以及中枢神经系统功能重建和神经再生提供了新的途径。目前体外诱导MSCs向神经细胞分化的方案主要有化学试剂单独诱导、生长因子单独诱导及化学试剂和生长因子联合诱导,其中两种诱导剂联合诱导的效果较好。MSCs向神经细胞分化的研究已取得了一些成果,但仍存在许多问题,如MSCs的鉴定、MSCs向神经细胞诱导分化模式和分子调控机制等。; 王倩于娜黄瑾; 关键词：骨髓基质细胞分化神经细胞

蛋白质分离纯化方法的研究进展被引量：13: 2011年; 蛋白质作为生命物质基础之一,存在于自然界中复杂的混合体系中。蛋白质在细胞中的含量极低,将其从复杂体系中分离出来并保持其活性,难度较大,因此分离纯化蛋白质的方法受到生命科学领域广泛关注。本文首先阐述了蛋白质的预处理,其次阐述了蛋白质分离纯化的各种方法如沉淀、层析、离心等,重点阐述了蛋白质新纯化的各种原理,以及每种方法的适用范围。有助大家更全面、更彻底的了解蛋白纯化技术的发展,以期为今后开展蛋白质的制备及应用提供一定理论依据和实验指导。; 王红颖王倩黄瑾; 关键词：蛋白质纯化

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兵团博士基金(2008JC11)