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EphB6在小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的初步研究: 2012年; 目的探讨EphB6在小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSC)成骨分化中的作用及其可能机制。方法将BMSC通过双相接种法接种于脱钙骨基质,分为4组:成骨诱导5、14 d(A、B组),普通培养5、14 d(C、D组),茜素红染色检测钙结节,定量检测各组碱性磷酸酶活性,Runx2、Osterix和EphB6的mRNA表达,采用游离态配体ephrinB1-Fc激活EphB6并重复检测上述指标。结果 ALP活性、Runx2和Osterix在A、B组增高,且B组检测到最高的ALP活性[(7.32±2.02)金氏单位/100 ml]、Runx2(3.442 6±0.258 5)倍和Osterix(2.482 3±0.329 2)倍。EphB6的表达水平在A、B组降低,且在B组最低(0.754 3±0.023 5)倍。以ephrinB1-Fc激活EphB6后,茜素红染色显示钙结节明显减少,ALP活性显著下降(P<0.05),在高浓度配体作用后ALP活性[(12.20±1.30)金氏单位/100 ml]较低浓度配体[(15.40±1.03)金氏单位/100 ml]有进一步下降(P=0.008)。配体作用后,BMSC成骨分化中Runx2和Osterix的表达显著下降。结论 EphB6通过调控Runx2和Osterix抑制BMSC成骨分化。; 李松涛刘涌宋磊董世武邸宁李殿威徐源周强; 关键词：EPHRIN RECEPTOR 骨髓间充质干细胞成骨分化

脉冲电磁场诱导小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化被引量：7: 2009年; 目的观察脉冲电磁场对小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化的影响。方法将小鼠4d龄胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)衍生的胚胎体单细胞按5×104ml-1接种到细胞培养板,在DMEM基础培养液中使胚胎体单细胞贴壁培养。于第14～21天时,分别给予脉冲电磁场、化学诱导剂以及联合刺激。采用茜素红染色、骨钙素免疫组织化学染色成骨分化关键因子Osterix和Cbfa-1/Runx-2的相对定量RT-PCR检测等方法观测成骨分化情况。结果茜素红染色和RT-PCR结果均显示:脉冲电磁场组、化学诱导组以及联合培养组的成骨诱导效果均比空白对照组显著增加,其中又以联合培养组成骨诱导效果最明显。骨钙素免疫组化染色也显示:联合培养组中骨钙素分泌最多。结论脉冲电磁场可以促进小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化,而且脉冲电磁场和常规化学诱导剂联合应用会产生协同效应,其成骨诱导效果优于两者单独应用。; 曹炜鹏周强徐海伟吴雪晖刘涌宋磊唐军杨丽; 关键词：脉冲电磁场胚胎干细胞成骨细胞骨组织工程

压应力对组织工程骨内人骨髓基质细胞增殖能力影响的实验研究: 2009年; 目的探讨压缩应变对组织工程骨内人骨髓基质细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)增殖的作用及适合强度范围。方法双相接种法构建组织工程骨,对其施加频率为0.5Hz,压缩幅度分别为2%、5%、10%、15%、20%的压应力刺激hBMSCs(2h/d)。倒置显微镜观察细胞形态,扫描电镜观察培育的组织工程骨,常规病理切片和HE染色观察培育组织工程骨内细胞分布及生长情况。MTT法和流式细胞技术检测细胞增殖水平及生长周期。结果压缩幅度为2%、5%、10%时压应力刺激可促进hBMSCs增殖;压缩幅度为15%、20%时压应力刺激抑制细胞增殖,其中以10%压缩幅度刺激细胞增殖效果最为显著,生长曲线比对照组明显前移,S期细胞百分比(27.45±0.25)%较对照组(19.15±0.26)%增高43.34%。结论适当强度的压应力可促进hBMSCs的增殖,5%～10%的压缩幅度是促进hBMSCs增殖的适合强度。; 刘涌周强曹炜鹏郭平宋磊蒲小兵郭从涛; 关键词：生物反应器骨髓基质细胞压应力增殖

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国家高技术研究发展计划(2006AA02Z4E3)