浙江省重点科技计划(2007C22045)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 相关作者：李军星姜平李玉峰钱黎婷柴其然更多>>
- 相关机构：南京农业大学金华职业技术学院更多>>
- 发文基金：浙江省重点科技计划国家科技支撑计划南京农业大学SRT基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 副猪嗜血杆菌热休克蛋白70基因的序列分析及抗原性鉴定被引量：1
- 2009年
- 本研究利用简并引物首次从副猪嗜血杆菌基因组DNA中克隆获得全长HSP70基因(登录号:EU69-3116),基因测序结果表明HSP70完整阅读框1908bp,根据编码序列推导出相应635个氨基酸。经BLAST分析表明,其氨基酸序列与溶血性曼氏杆菌、杜克雷嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等同源性最高,达到90%左右。将HSP70部分基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,经酶切鉴定正确后转化感受态大肠杆菌BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE表明表达的重组蛋白约46ku,将表达的蛋白纯化后免疫小鼠,制备抗血清。Westernblot结果显示该融合蛋白与副猪嗜血杆菌人工感染猪血清以及原核表达蛋白免疫的小鼠抗血清反应后有明显的特异性条带,证明该重组蛋白具有良好的抗原性,为HSP70功能研究奠定了重要基础。
- 李军星姜平李玉峰张国龙王先炜
- 关键词：副猪嗜血杆菌HSP70原核表达抗原性
- 副猪嗜血杆菌病的诊断及其消毒剂筛选被引量：4
- 2010年
- 剖检临床疑患副猪嗜血杆菌病病猪,取病料涂片镜检,分离培养及纯培养,然后用现制的副猪嗜血杆菌菌悬液进行不同消毒剂的消毒效果试验。通过对卫康、百毒杀、康唯消、优氯净和农福5种消毒剂的最小抑菌浓度、最小杀菌浓度的测定和悬液定量杀菌试验,显示卫康、百毒杀、康唯消、优氯净和农福的最小抑菌浓度分别是1∶2560、1∶640、1∶1280、1∶1280和1∶2560;卫康、农福的最小杀菌浓度和悬液定量杀菌率均为1∶2560和99.9%;因此认为以复合型消毒剂卫康和农福消毒效果最佳。
- 何海健陆国林尹晶菁
- 关键词：副猪嗜血杆菌消毒剂
- 副猪嗜血杆菌分离与基因分型鉴定被引量：11
- 2008年
- 本研究选择6个具有明显多发性浆膜炎等症状的猪场,从患猪肺支气管中分离获得6株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs),采用RFLP-PCR针对tbpA基因进行基因型鉴定。结果显示,6个分离株属于4种不同的HPs基因型,证明我国HPs流行株存在多种基因型,采用PCR-RFLP分析副猪嗜血杆菌流行病学规律,具有实用意义。
- 蒋征李军星姜平柴其然余飞钱黎婷
- 关键词：副猪嗜血杆菌RFLP-PCR
- 副猪嗜血杆菌tbpA基因PCR-RFLP分型被引量：9
- 2009年
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)是目前影响世界养猪业的重要病原之一。本试验利用针对HPs转铁蛋白基因tbpA的PCR-RFLP分型方法,对2003～2008年分离自江苏、上海、广西、浙江、江西和安徽等6省市的57个HPs分离株及15个参考菌株进行PCR-RFLP分析。结果显示,15个血清型参考菌株分为9种基因型,57个HPs流行分离株分为15种基因型,其中在我国最为流行的基因型分别为DBN(38%),ABN(18%)与DBP(12%)。本研究表明副猪嗜血杆菌在我国猪群中普遍存在,并至少有15个RFLP基因亚型,从而为我国HPs病的防治提供了重要理论依据。
- 李军星姜平王艳李玉峰陈闻王先玮李鹏
- 关键词：副猪嗜血杆菌PCR-RFLP基因型
