江苏省自然科学基金(BK2009163)
- 作品数：19 被引量：189H指数：8
- 相关作者：张晓君阎斌伦毕可然秦国民梁利国更多>>
- 相关机构：淮海工学院南京师范大学中国水产科学研究院淡水渔业研究中心更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省水产三项工程项目农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 常用中草药对4种病原弧菌体外抗菌效果的研究被引量：36
- 2010年
- 采用琼脂扩散法(打孔法)测定了五倍子等18种中草药对鳗弧菌、副溶血弧菌、河口弧菌及霍乱弧菌等4种病原弧菌的抑制作用。结果表明,五倍子、苏木、地锦草、石榴皮、黄芩、虎杖和山楂等7种中草药对病原弧菌具有较好的抑菌效果,而金银花等11种中草药抑菌作用较弱;同时采用试管连续稀释法,测定了五倍子等抑菌效果较强的7种中草药对4种病原弧菌的抑菌和杀菌浓度。结果表明,苏木、五倍子、地锦草和石榴皮4种中药具有较好的抑菌和杀菌作用,此4种中药对鳗弧菌、副溶血弧菌、河口弧菌及霍乱弧菌等4种病原弧菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.78～6.25mg/ml,最小杀菌浓度(MBC)为3.12～12.5mg/ml。
- 梁利国阎斌伦张晓君秦国民杨家新
- 关键词：中草药弧菌最小抑菌浓度最小杀菌浓度
- 矛尾复虾虎鱼溃疡病病原创伤弧菌的鉴定被引量：8
- 2011年
- 2009年8月江苏连云港赣榆县多家虾蟹养殖塘混养的矛尾复虾虎鱼(Synechogobius hasta)大量死亡,从病鱼深层溃烂组织及肝脏中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明分离菌对虾虎鱼的半数致死量(LD50)为1.63×106 cfu/g。对分离菌进行了形态特征、理化特性和分子生物学等方面的分析。一方面,分离菌株16S rRNA和gyrB基因序列的BLAST搜索及最大简约法分析均表明其与创伤弧菌(Vibrio vulnificus)亲缘关系最近;另一方面,分离菌革兰氏阴性,氧化酶阳性,葡萄糖发酵型。因此,引起江苏连云港赣榆县矛尾复虾虎鱼溃疡病病原菌是弧菌属的创伤弧菌。
- 毕可然张晓君梁利国阎斌伦
- 关键词：RRNA基因
- 基于lolB和toxR基因的水产品中霍乱弧菌双重PCR检测方法被引量：4
- 2011年
- 选择lolB和toxR两种基因序列设计2对特异性引物,建立一种针对霍乱弧菌所有生物型菌株的双重PCR检测方法,扩增目的片段大小分别为519bp和779bp。结果表明:在同步扩增中,仅霍乱弧菌模板可同时扩增出2种基因片段,4株对照菌模板无任何扩增条带;敏感性检测结果显示,该双重PCR最低能检测3.42×103CFU/mL菌落数的霍乱弧菌。所建立的基于lolB和toxR两种基因的双重PCR检测方法特异性强、敏感性高、方法简单、用时短,可用于霍乱弧菌检测。
- 秦国民张晓君毕可然阎斌伦秦蕾
- 关键词：霍乱弧菌双重PCR
- 红鳍东方鲀病原鱼肠道弧菌的生物学特性研究被引量：12
- 2009年
- 对引起红鳍东方鲀发病死亡的病原细菌进行了分离和主要生物学特性研究,包括病原性、形态特征、理化特性、16S rRNA基因序列及其系统发育学分析、胞外酶及溶血素活性、K抗原及耐药性等。结果表明,引起红鳍东方鲀发病死亡的病原细菌为弧菌属(VibrioPacini 1854)的鱼肠道弧菌(V.ichthyoenteri Ishimaru,et al.1996),2株代表菌株16S rRNA基因序列(GenBank登录号分别为:EF611424和EF635304)与GenBank数据库中鱼肠道弧菌的同源性在98%—100%,且在构建的MP系统发生树中与鱼肠道弧菌聚为一个分支。分离菌不具有淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、DNA酶、脲酶、明胶酶和卵磷脂酶活性,且在含7%家兔脱纤血液营养琼脂培养基上不溶血。不具有K抗原。人工感染试验中分离菌对红鳍东方鲀表现出明显的致病性。药敏试验结果显示,4株分离菌对供试37种抗菌药物中的苯唑青霉素和杆菌肽2种耐药。
- 张晓君陈翠珍阎斌伦房海秦国民徐静
- 关键词：生物学特性系统发育学
- 基于toxR基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原副溶血弧菌方法的建立被引量：8
- 2012年
- 基于副溶血弧菌toxR基因保守序列设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测副溶血弧菌的方法。常规PCR检测,副溶血弧菌扩增出大小为368bp的目的片段,其他4种病原细菌均为阴性;SYBRGreenⅠ实时定量PCR扩增曲线反映了PCR的指数增长阶段和平台阶段;在Tm为85℃,扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体;所制作的标准曲线在2.7×108～2.7×102拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.998,能对副溶血弧菌进行准确的定量分析;该方法检测时间从核酸抽提到结果分析仅需4～5h,较传统方法敏感、操作简单,耗时短,是副溶血弧菌引起的水产动物疾病的快速诊断及食品中针对副溶血弧菌安全检测的有效手段。
- 张晓君梁利国阎斌伦毕可然秦国民
- 关键词：副溶血弧菌SYBRREAL-TIME
- 哈氏弧菌特异性检测方法的建立和应用被引量：6
- 2010年
- 针对哈氏弧菌外膜蛋白OmpK的基因序列设计了一对引物,从分离自患病长鳍真鲨体内的哈氏弧菌基因组中扩增获得一段约800bp大小的基因片段。进行了PCR方法的特异性和敏感性以及海产品检测试验,建立了一种检测致病性弧菌的PCR检测方法。结果表明,该法只检测出致病性哈氏弧菌。同时对不同浓度的细菌悬液扩增,结果显示,此方法对哈氏弧菌菌体DNA的最低检测量为0.139ng/μL,可以为哈氏弧菌的检测提供参考依据。
- 梁利国秦国民杨家新张晓君阎斌伦
- 关键词：哈氏弧菌PCR
- 基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR检测方法的建立被引量：8
- 2011年
- 基于toxR基因序列设计检测哈氏弧菌的1对特异性引物,通过PCR反应条件优化、PCR反应特异性及敏感性检测,建立一种哈氏弧菌的特异性分子检测方法。试验结果表明,该引物可使哈氏弧菌扩增出大小为390 bp的toxR基因片段,3种水产动物病原弧菌未扩增出任何条带,敏感性检测结果为该PCR反应最低能检测出0.375 ng/μl的哈氏弧菌基因组DNA。该试验建立的基于toxR基因的哈氏弧菌的PCR检测方法可用于哈氏弧菌引起的水产动物疾病的快速诊断及海产品安全检测。
- 姚东瑞朱明陈丽毕可然史爱琴张晓君
- 关键词：哈氏弧菌PCR检测
- 18种中草药煎液对温和气单胞菌的抑、杀菌效果被引量：25
- 2010年
- 采用琼脂扩散法(打孔法)测定了五倍子等18种中草药对2株病原温和气单胞菌(Aerom onas sobria)的抑制作用,并采用试管2倍稀释法测定抑菌效果较强的中草药对这2株温和气单胞菌的抑菌和杀菌浓度。结果显示:五倍子、苏木、地锦草、石榴皮、黄芩、虎杖和山楂对病原温和气单胞菌的抑菌效果较强;苏木、五倍子、地锦草和石榴皮4种中药对2株温和气单胞菌的最小抑菌浓度(M IC)为1.56～6.25 mg/mL之间,最小杀菌浓度(MBC)为3.12～12.5 mg/mL之间,其中五倍子的抑菌和杀菌浓度最低,分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL;而金银花等11种中草药抑菌作用较小。结果表明,所选取的18种中草药中五倍子对防治由温和气单胞菌感染引起的水产动物疾病最为有效。
- 梁利国邴旭文张晓君阎斌伦杨家新
- 关键词：中草药最小抑菌浓度最小杀菌浓度
- 水产动物致病性副溶血弧菌双重PCR检测方法的研究被引量：11
- 2010年
- 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是多种水产养殖动物的主要病原菌,尤其是可引起凡纳滨对虾幼虾呈毁灭性死亡。本研究基于gyrB和toxR两种基因序列设计2对特异性引物,建立一种副溶血弧菌快速、准确的双重PCR检测方法,扩增目的片段大小分别为285 bp和368 bp。结果表明在同一PCR反应体系中副溶血弧菌可同时扩增大小分别为285 bp和368 bp的2种基因片段,两种引物对4种其他水产动物病原菌无交叉反应;敏感性检测结果显示,该双重PCR最低能检测8.867 2×103 CFU/mL菌体浓度的副溶血弧菌,对副溶血弧菌模板DNA的检出极限为0.029 3 mg/L;对发病中国对虾糠虾幼体、水产品及虾池养殖用水进行双重PCR检测,呈阳性反应的样品可分离出优势生长的副溶血弧菌。该实验所建立的基于gyrB和toxR两种基因的双重PCR检测方法可用于副溶血弧菌引起的水产动物疾病的快速诊断及分子流行病学的调查研究。
- 张晓君梁利国阎斌伦秦蕾戚耀之
- 关键词：双重PCR
- 基于tlh和toxR基因的副溶血弧菌双重PCR检测方法被引量：2
- 2012年
- 为了研究副溶血弧菌双重PCR检测方法,试验采用tlh和toxR基因序列设计2对特异性引物进行双重PCR检测,扩增出450 bp和368 bp目的片段。结果表明:在同一PCR反应体系中仅副溶血弧菌可同时扩增出2种基因片段,4株对照菌无任何扩增条带;该双重PCR检测方法最低能检测1.660 7×103cfu/mL菌体浓度的副溶血弧菌。说明试验所建立的双重PCR检测方法特异性强、敏感性高、方法简单、用时短,可用于副溶血弧菌引起的水产动物疾病的诊断与分子流行病学调查。
- 白雪松秦国民阎斌伦毕可然秦蕾高雨张晓君
- 关键词：副溶血弧菌双重PCR
