福建医科大学科学研究发展基金
- 作品数:69 被引量:273H指数:8
- 相关作者:刘炳亚兰斌朱正纲陈雪华蔡劬更多>>
- 相关机构:福建医科大学上海交通大学医学院附属瑞金医院福建医科大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学更多>>
- 经静脉移植骨髓间质干细胞在脑缺血前后大鼠脏器组织中的分布被引量:6
- 2007年
- 目的:骨髓章质干细胞通过局部直接注射或经静脉、动脉移植均可有效趋化到达脑缺血、损伤组织,但目前除了对到达靶部位的干细胞分布有一定了解外,对干细胞在非损伤组织或损伤组织之外的其它部位迁移分布与生存情况的研究较少。观察经静脉移植的大鼠骨髓间质干细胞在脑缺血前后大鼠体内的生存与分布,为干细胞移植研究提供实验基础和可能的理论依据。方法:实验于2006-05/2007-05在福建省神经病学研究所完成。实验材料:选取清洁级健康雄性近交系F344大鼠48只,体质量250~300g,由中国利学院上海实验动物中心提供,按随机数字表法分为3组;正常移植组、脑缺血前移植组、脑缺血后移植组,每组16只。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验方法:①体外培养扩增2月龄F344大鼠骨髓间质干细胞,传至第三四代备用。用带增强型绿荧光蛋白基因的慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞。②建立大鼠短暂大脑中动脉闭塞脑局灶缺血模型。取增强型绿荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞,经股静脉移植入大鼠体内。正常移植组:细胞移植前大鼠未经任何处理;脑缺血前移植组:先在正常大鼠静脉移植细胞,24h后行大脑中动脉闭搴术;脑缺血后移植组:大鼠先行大脑中动脉闭塞术,24h后移植细胞。③实验评估:采用改良的神经功能缺损量表测定各组大鼠神经功能情况;取大鼠骨髓制作涂片,同时取脑、心、肺、肝、脾、肾、骨骼肌、小肠组织标本制作冰冻切片,在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白阳性细胞在各时间点的分布情况。结果:48只大鼠均进入结果分析。①脑缺血前移植组和脑缺血后移植组大鼠神经功能在移植后12周内均有明显恢复,但脑缺血后移植组恢复较快,术后1,3,12周明显优于脑缺血前移植组(P<0.01,P<0.05)。②在正常移植组和脑缺血前前移植组大
- 陈东平张志坚吴秀丽林建华
- 关键词:间质干细胞脑缺血
- 碱性成纤维细胞生长因子基因修饰的组织工程化复合物促进牙龈组织再生实验研究被引量:2
- 2011年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的组织工程化复合物对牙龈组织缺损再生的影响。方法本研究于2007年7月至2009年1月在福建省高校口腔医学重点实验室进行。利用bFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过对治疗前后牙周指标测量分析,评价该组织工程化复合物对牙龈组织再生的影响。结果实验前后附着丧失差值测定显示GFs与ADM复合物组及转染bFGF基因的GFs复合物组之间无显著性差异,与空白对照组相比均有明显增加(P<0.05)。角化龈宽度差值,6周时转染基因组有明显增加,12周时两实验组均比空白对照组明显增加(P<0.05)。结论复合GFs的ADM可能有助于改善附着丧失的程度及角化龈宽度,而bFGF的作用并不肯定。组织工程技术能有效促进牙龈组织再生。
- 陈欣戬钟泉赵欣骆凯闫福华
- 关键词:碱性成纤维细胞生长因子牙龈成纤维细胞脱细胞真皮基质
- 非清髓性骨髓移植诱导同种异基因心脏移植长期免疫耐受的实验研究
- 2007年
- 目的比较多种不同的预处理方案,筛选一种具有低毒性、能诱导出长期稳定的同种异基因移植免疫耐受的非清髓性预处理方案。方法受体BALB/C(H-2d)小白鼠,供体C57BL/6(H-2b)黑小鼠,建立小鼠耳后心脏移植模型。在心脏移植(HT)前,给予受体腹膜腔内注射抗胸腺细胞血清(ATS)5次、亚致死剂量全身X线照射(TBI)1次、骨髓移植(BMT)等7个不同组合的预处理方案,术后观察移植心脏跳动情况,于骨髓移植后第28 d检测外周血中嵌合体。结果一实验组(ATS+TBI450 cGy+BMT+HT)采用受体在心脏移植前接受5次腹膜腔内注射ATS、1次TBI(450 cGy)、静注供者骨髓细胞5×107个等处理的非清髓性治疗方案,移植心脏(9/10)存活>100 d;骨髓移植术后第28 d检测外周血,均出现完全异体细胞嵌合状态。结论早期应用ATS与亚致死量TBI有着协同作用;非清髓性预处理方案(ATS+亚致死量TBI(450 cGy)+BMT)既获得了持久、稳定的供者造血干细胞嵌合体,也诱导出同种异基因移植长期特异性免疫耐受。
- 李增棋林艳娟陈家松陈阳天廖东山
- 关键词:骨髓移植心脏移植基因嵌合体免疫耐受
- LHR真核表达载体构建及表达被引量:1
- 2009年
- 目的构建黄体生成素受体(LHR)真核表达质粒载体和建立稳定高表达LHR的乳腺癌细胞株。方法KpnⅠ/HpaⅠ双酶切LHR-cDNA质粒载体获得目的基因,定向克隆构建pcDNA3.1(+)真核表达载体,酶切图谱和序列分析鉴定;重组质粒载体经脂质体转染MCF-7乳腺癌细胞,G418筛选,RT-PCR、细胞内cAMP测定,筛选鉴定高表达LHRMCF-7细胞。结果重组质粒pcDNA3.1(+)-LHR酶切图谱分析结果、序列分析证明pcDNA3.1(+)-LHR载体中LHR序列与GenBank的LHR基因序列完全相符。RT-PCR检测MCF-7细胞LHR mRNA,MCF-7细胞内cAMP浓度测定,证实MCF-7细胞高表达LHR。结论构建并转染pcDNA3.1(+)-LHR真核表达载体,在MCF-7细胞中稳定表达,为探讨hCG对乳腺癌细胞的作用提供实验基础。
- 林授林德馨
- 关键词:绒毛膜促性腺激素乳腺肿瘤克隆细胞
- 均匀设计法在筛选丹参与黄芪最佳配比中的应用被引量:3
- 2010年
- 目的优化中药丹参、黄芪的最佳配比。方法应用均匀设计与药效学实验(条件位置偏爱实验)相结合的方法对丹参提取物与黄芪提取物两者的最佳配比进行筛选,经过数理统计的方法确定两者用量的最佳配比,为两者的配合应用提供依据。结果条件位置偏爱实验筛选优化所得的处方为丹参80mg·kg-1,黄芪41mg·kg-1,二者最佳配比为2∶1。结论应用均匀设计、数理统计与药效学分析相结合的方法确定复方药用量的方法是可行的。
- 陈明珠陈崇宏卢惠萍
- 关键词:均匀设计法丹参条件位置偏爱吗啡依赖
- STK15和ki67基因在胃癌组织中的表达研究被引量:4
- 2006年
- 目的研究丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)基因在胃癌组织中的表达,及其与临床病理指标以及ki67表达的关系。方法采用免疫组化检测STK15和ki67在89例胃癌组织中的表达。结果STK15在胃癌组织中的表达阳性率为34.83%(31/89),显著高于邻近的非癌组织的4.49%(12/89)(P<0.01);STK15基因过表达与分化型胃癌及其侵润深度密切相关(P<0.05),而与ki67的表达无相关性。结论STK15基因可能在胃癌发生、发展中起相应作用,其过表达程度可作为胃癌的某些生物学行为新的判定指标。
- 兰斌陈雪华刘炳亚瞿颖蔡劬朱正纲
- 关键词:胃肿瘤丝氨酸/苏氨酸激酶15KI67
- 人骨形成蛋白-7真核表达质粒的构建及其在骨髓基质细胞的表达被引量:4
- 2007年
- 目的利用基因工程原理构建pIRES2-EGFP-hBMP-7真核表达质粒并检测其在Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)的表达。方法利用DNA重组技术,将hBMP-7片段克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,EcoRⅠ单酶切、PCR及序列分析鉴定获得的重组质粒;脂质体介导的方法转染Beagle犬BMSC;免疫组织化学染色检测hBMP-7基因的表达。结果hBMP-7被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染BMSC 24 h后可观察到转染的BMSC表达绿色荧光蛋白,48 h后转染效率达到31%。免疫组织化学染色证实重组pIRES2-EGFP-hBMP-7在BMSC中的表达。结论利用基因工程原理成功构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-hBMP-7,并可在BMSC中表达。
- 李艳芬闫福华江一平骆凯赵欣
- 关键词:骨形态发生蛋白质类真核细胞骨髓细胞
- 颗粒状角膜营养不良家系的BIGH3基因突变被引量:1
- 2007年
- 目的以基因突变分析一角膜营养不良家系的致病分子基础。方法应用PCR产物直接DNA测序及限制性内切酶分析检测家系中7例患者和6例表型正常成员的K3、K12和BIGH3基因突变情况。结果该家系患者成员在K3与K12基因的编码序列区没有发现突变,而BIGH3基因外显子12存在CGG>TGG(R555W)突变杂合子,家系表现正常成员及正常对照均无BIGH3基因突变;限制性内切酶分析结果显示突变与疾病表现型呈完全共分离。结论利用基因突变分析确诊我国首例报道的Meesmann角膜营养不良家系属于颗粒状角膜营养不良,且为BIGH3 R555W杂合突变类型。
- 阳菊华童绎朱益华肖继勇陈贻锴林建银
- 关键词:系谱
- 核糖体失活蛋白抗血液病肿瘤的研究
- 2010年
- 核糖体失活蛋白是广泛存在于高等植物中能抑制核糖体翻译功能的一类毒蛋白。它能够对哺乳动物核糖体大亚基上的28SrRNA进行脱嘌呤作用,从而破坏核糖体的结构,抑制蛋白质的生物合成。本文就核糖体失活蛋白的生物学活性以及近年来在抗血液病肿瘤方面的研究进展做一综述。
- 刘慧丽刘庭波谢捷明
- 关键词:核糖体失活蛋白白血病血液病
- p25/cdk5可能参与人参皂苷Rb1减轻Aβ_(25-35)诱导的tau蛋白过度磷酸化被引量:14
- 2006年
- 目的探讨在Aβ25-35诱导的皮层神经元tau蛋白过度磷酸化中,人参皂苷Rb1对周期依赖性蛋白激酶(cyc lin-de-pendent k inase 5,CDK 5)的激动亚基p35/p25的影响。方法通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠皮层神经元CDK 5的两个亚基cdk5和p35/p25的蛋白水平,以及CDK 5的磷酸化底物tau蛋白在Ser199/202、Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平。结果凝聚态Aβ25-35(20μmol.L-1)作用于皮层神经元12 h,可使皮层神经元中p25的数量增多,以及tau蛋白在Ser199/202、Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平增高,但对cdk 5亚基表达水平影响并不明显。Rb1和calpain特异性抑制剂calpeptin可减少皮层神经元p25的生成,同时人参皂苷Rb 1和CDK 5特异性抑制剂roscovitine可减轻凝聚态Aβ25-35诱导的皮层神经元tau蛋白的过度磷酸化水平。结论p25/cdk 5可能参与人参皂苷Rb1减轻Aβ25-35诱导的tau蛋白过度磷酸化。
- 黄天文陈晓春张静朱元贵曾育琦沈杰宋锦秋陈丽敏
- 关键词:人参皂苷RBΒ淀粉样蛋白25-35TAU蛋白CDK