国家自然科学基金(81171623)
- 作品数：10 被引量：52H指数：5
- 相关作者：李敏杜昕吕元宋燕阮斐怡更多>>
- 相关机构：复旦大学上海交通大学医学院附属仁济医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 上海地区成人患者肺炎链球菌分子流行病学的分析被引量：6
- 2015年
- 目的研究上海地区成人患者分离的肺炎链球菌耐药、克隆分型、血清分型、毒力因子携带及生物膜形成等分子特征，为感染控制及治疗提供临床流行病学信息。方法收集2011年1月至2013年12月上海华山医院37株来自门诊和住院成人患者感染分离的非重复肺炎链球菌，用K-B纸片法或E-test法测定对9种常用抗生素（青霉素、万古霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、头孢丙烯、头孢曲松、头孢囔肟、利奈唑胺）的敏感性；用PCR与肺炎链球菌荚膜型血清凝集法确定血清型；采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法分析不同血清型菌株的基因组特征；采用多位点序列分型（MLST）方法进行克隆分型；采用半定量生物膜形成试验分析其生物膜形成。PCR和凝胶电泳法检测10个主要肺炎链球菌的毒力基因（ebpA、pspA、cps2A、lytA、nanA、pavA、piaA、ply、psaA、spxB）。采用Stata统计软件用Fisher’Sexacttest进行相关性统计。结果37株肺炎链球菌主要血清型包括19F（13．5％），23F（13．5％），14（10．8％），19A（10．8％），青霉素耐药的肺炎链球菌（PRSP）占64．9％。血清型19F、19A、23F与青霉素耐药有明显相关（X2=5．89，P=0．015）并且都是多重耐药菌（MDR）。克隆分型呈多态性，ST81、ST271对包括青霉素在内的抗生素耐药率较高（X2=4．57，P=0．033）。生物膜阳性与血清型19A（x2=5．55，P=0．018）、克隆型ST320（x2=4．33，P=0．037）有明显相关，与青霉素耐药等没有明显相关（f=0．16，P=0．686）。毒力基因检测中lytA、pavA、ply、psaA、spxB均阳性。结论成人肺炎链球菌青霉素耐药率呈上升趋势。特定的血清型、流行克隆分型与抗生素耐药密切相关，为感染控制提供依据。毒力因子PspA等将是未来研制新型疫苗降低肺炎链球菌感染的新型靶标。
- 蒋浩琴陈明亮李天铭田月如朱元军刘红李敏
- 关键词：肺炎链球菌血清分型脉冲场分子流行病学
- 持留菌对抗菌药物疗效的影响被引量：1
- 2013年
- 持留菌的存在是导致细菌清除不完全，治疗失败的重要原因之一，应该引起广大医务工作者关注。持留菌是一类与种群内普通细菌、耐药菌特征不同的特殊亚群，近年来随着学科的交叉与研究的拓展，对持留菌的认识取得突破性进展。本文从持留菌的特点、形成机制、对临床治疗的影响以及针对持留菌的药物研发等几个方面加以概述，为诊断、预防和治疗持留菌相关感染提供依据。
- 蒋浩琴李敏
- 关键词：抗药性细菌抗菌药细菌生物膜氨基糖苷类
- 新的细胞壁锚定蛋白编码基因sasX在金黄色葡萄球菌中的分布被引量：11
- 2011年
- 目的 研究细胞壁锚定蛋白编码基因sasX在金黄色葡萄球菌中的分布及对细菌耐药性的影响.方法 随机收集上海华山医院2004、2007和2010年从金黄色葡萄球菌感染的住院患者标本中分离鉴定的金黄色葡萄球菌共300株,收集同时期社区健康人群的鼻咽拭子分离鼻腔内定植的金黄色葡萄球菌170株.按照国际通用的MLST以及葡萄球菌A蛋白序列分析（spa typing）方法进行克隆株的鉴定分析.通过苯唑西林MIC值测定方法对MRSA进行检测.采用PCR结合测序方法对金黄色葡萄球菌携带sasX基因情况进行分析,采用纸片琼脂扩散法药敏试验分析临床sasX阳性和sasX阴性金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药性.结果 300株从金黄色葡萄球菌感染的住院患者标本中分离到的致病性金黄色葡萄球菌克隆分型以ST239（110株,36.7％）和ST5（122株,40.7％）为主.2004至2010年,sasX基因在致病性的金黄色葡萄球菌中的阳性率从17％上升至39％,sasX基因在健康人鼻腔内分离的金黄色葡萄球菌中阳性率平均为0.59％.ST239中sasX的阳性率从47.2％上升至83.8％.携带sasX基因的MRSA百分率从26.4％上升至50.8％,携带sasX基因的MSSA的比率只约占10％.sasX基因阳性组对部分目前临床常用的抗菌药物的耐药性高于sasX基因阴性组.结论 sasX基因主要存在于医院环境内致病性的金黄色葡萄球菌中,SasX可能是金黄色葡萄球菌在医院环境内持续感染毒力因子之一,sasX基因的存在与细菌的耐药有关.
- 杜昕宋燕田月如阮斐怡吕元李敏
- 关键词：细菌蛋白质类
- 耐氟康唑白假丝酵母耐药相关基因表达研究
- 研究背景 由于器官移植、肿瘤化疗，大量广谱抗菌药物滥用以及糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用等，临床真菌感染问题日趋严重，其中白假丝酵母感染率最高。目前治疗真菌感染的一线药物主要是氟康唑等三唑类药物，多种机制共同作用导致白...
- 戴颖欣李敏
- 关键词：白假丝酵母氟康唑耐药性相关基因过表达
- 新的细胞壁锚定蛋白SasX对金黄葡萄球菌生物膜形成和毒力的影响被引量：6
- 2011年
- 目的 研究新的细胞壁锚定蛋白SasX对金黄葡萄球菌生物膜形成及毒力的影响.方法 采用基因敲除及基因互补技术获得耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA） ST-239 HS770 sasX基因突变株及基因互补株,应用半定量生物膜形成试验检测sasX基因突变前后对金黄葡萄球菌生物膜形成的影响,使用小鼠皮肤脓肿形成模型研究SasX对金黄葡萄球菌毒力的影响.结果 采用pKOR1质粒构建重组质粒并成功获得sasX基因敲除株.与野生株相比,突变株HS770△sasX生物膜形成能力明显减弱（P＜0.05）,互补表达株HS770△sasX（pRBsasX）生物膜形成能力无明显统计学差异（P＞0.05）.与野生株相比,突变株HS770△sasX初始黏附能力明显减弱（P＜0.05）,互补表达株HS770△sasX（pRBsasX）初始黏附能力无明显统计学差异（P＞0.05）.HS770和HS770△sasX接种小鼠后均形成明显的脓肿,PBS对照组小鼠皮肤表面未见脓肿产生.细菌接种后第2天小鼠皮肤脓肿面积达到最大,随着接种时间的延长小鼠皮肤脓肿面积逐渐缩小.但是从接种后第1天开始,HS770接种组小鼠皮肤脓肿形成面积在同一时间点上明显大于HS770△sasX接种组（P＜0.05）.结论 采用pKOR1质粒进行基因敲除可以明显提高目的基因的敲除效率.SasX可以通过影响细菌的初始黏附从而影响生物膜的形成,SasX是金黄葡萄球菌在医院环境内持续感染重要的毒力因子.
- 杜昕宋燕胡锦辉阮斐怡吕元李敏
- 关键词：金黄葡萄球菌生物膜毒力因子
- 新的细胞壁锚定蛋白SasX促进金黄色葡萄球菌黏附聚集和定植能力被引量：4
- 2012年
- 目的研究新的细胞壁锚定蛋白SasX对金黄色葡萄球菌黏附聚集和定植能力的影响。方法采用基因敲除及基因互补技术获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）ST-239HS770sasX基因突变株及基因互补株。显微镜下直接观察sasX基因突变前后细菌自身的黏附聚集能力。通过黏附实验检测sasX基因突变前后对金黄色葡萄球菌黏附至人体鼻腔上皮细胞能力，并通过阻断实验检测表达纯化的SasX蛋白对金黄色葡萄球菌黏附至人体鼻腔上皮细胞的阻断能力，分析SasX蛋白对金黄色葡萄球菌定植能力的影响。结果与野生株相比，突变株HS770asasX自身的聚集能力明显减弱，而互补表达株HS770asasX（pRBsasX）的自身聚集能力与野生株无明显差异。与野生株相比，突变株HS770AsasX黏附至人体鼻腔上皮细胞能力明显减弱（P〈0．01），互补表达株HS770 asasX（pRBsasX）黏附能力明显增强（P〈0．01）。表达纯化的GST融合蛋白SasX和人体鼻腔上皮细胞预培养对于野生株HS770黏附至人体鼻腔上皮细胞的能力具有明显的抑制作用。结论新的细胞壁锚定蛋白SasX影响金黄色葡萄球菌黏附聚集和定植能力，金黄色葡萄球菌通过获得sasX基因更加容易定植到宿主易感部位，进而引发感染。
- 陈健杜昕宋燕阮斐怡吕元李敏
- 关键词：金黄色葡萄球菌定植
- MALDI-TOF MS 指纹图谱技术在病原微生物分型中的应用前景被引量：11
- 2015年
- 对同一种属病原微生物进行准确、快速、灵敏地分型对追踪分子溯源、明确传播途径、了解菌株和临床表现之间的关系、探索致病机制和指导临床用药等具有非常重要的意义。近年来基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱（ MALDI-TOF MS）以其快速、准确、重复性好、高通量等特点在微生物的鉴定、耐药性和毒力的监测中发挥越来越重要的作用。新的微生物分型方法MALDI-TOF MS指纹图谱分型法也随之诞生。该分型方法具有高通量、快速、易于标准化、费用低廉等特点，在病原微生物流行病学分析、医院感染控制、生物标志物研发等方面有广阔的应用前景。（中华检验医学杂志，2015，38：367-369）
- 秦娟秀李敏
- 关键词：蛋白质组学微生物学技术
- 结核杆菌GpsI蛋白调控吡嗪酰胺耐药的分子机制研究
- 目的结核杆菌GpsI蛋白是本课题组通过连有吡嗪酰胺(PZA)活性形式——吡嗪酸(POA)的亲和色谱柱初筛到的PZA靶标,因此我们进一步通过对结核杆菌gpsI/Rv2783c基因进行药敏实验、临床突变筛选和体外蛋白活性监测...
- 何磊刘倩李天铭王亚楠洪旭芬秦娟秀戴颖欣李敏
- 文献传递
- 水平基因转移促进MRSA的耐药和定植与感染被引量：3
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌是人类重要病原体之一，引起的疾病从轻度皮肤感染到危及生命的各类严重侵袭性感染，如致死性肺炎、心内膜炎和败血症等。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin—resistant Staphylococcusaureus，MRSA）在世界范围内的流行与临床使用β内酰胺类抗生素治疗后所造成的选择性压力有关。
- 李敏
- 关键词：侵袭性感染MRSAΒ内酰胺类抗生素定植耐药
- 探究金黄色葡萄球菌蛋白A在ST239持续性感染中的促进作用
- 目的 研究金黄色葡萄球菌蛋白A (SPA)在医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)ST239菌株的持续性感染中所起的促进作用的机制。方法 对临床常见的两种类型菌株HA-MRSA ST239和CAMRSA S...
- 洪旭芬刘倩王亚楠李敏
- 关键词：SPA
