深圳市科技计划项目(200602048)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：孙炜王吉兴金大地刘晓霞刘安庆更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学深圳市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- iNOS抑制剂对兔关节软骨修复组织胶原表达的影响被引量：7
- 2009年
- 目的观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂对关节软骨修复组织胶原表达的影响。方法24只新西兰大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损。随机抽签均分为对照组、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)组和一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲组(S-methylisothiourea,SMT)组。术后1年处死动物。应用苦味酸-天狼猩红染色检测胶原的分布情况,图像分析技术定量胶原的表达及进行修复组织软骨厚度的测量。应用免疫组织化学技术检测型胶原的表达和分布。结果图像分析显示,1年后SMT组型胶原表达量为65.9%,明显少于BMP组88.5%和对照组94.6%的表达量,型胶原30.7%的表达量明显多于BMP组10.8%和对照组4.5%的表达量。1年后SMT组软骨厚度(1.85±0.56)mm明显高于BMP组(0.67±0.31)mm和对照组(0.24±0.10)mm。SMT组缺损区型胶原含量明显高于BMP组和对照组。结论iNOS抑制剂SMT的应用能明显增加型胶原表达和软骨厚度,对于维持软骨表型有积极意义。
- 孙炜王吉兴金大地刘晓霞刘安庆
- 关键词：一氧化氮酶抑制剂软骨S-甲基异硫脲胶原
- Luminex液相蛋白芯片检测一氧化氮合酶抑制剂对骨关节炎患者软骨基质金属蛋白酶表达的影响
- 2010年
- 目的应用Luminex液相蛋白芯片检测一氧化氮合酶（NOS）抑制剂对骨关节炎（OA）患者软骨基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响，以及NOS抑制剂改善OA代谢的途径。方法研究经本院医学伦理委员会批准并获取患者的知情同意。无菌条件下，取15例重度OA需行关节置换术患者的关节软骨，置人体外培养系统。应用随机数目表法分为：①对照组：不加药物干预；②L—N^6-亚氨乙基-赖氨酸（L-NIL）组：加入NOS抑制剂L-NIL干预。培养72h后，通过检测硝酸盐和亚硝酸盐的含量来观察软骨一氧化氮（NO）的释放量和NOS的活性；应用Luminex液相蛋白芯片检测OA患者软骨中MMPs（MMP-1，MMP-2，MMP-3，MMP-9，MMP-13）表达量的变化。数据采用配对t检验作均数的显著性检验。结果对照组软骨培养72h后，在其上清液中可检测到高浓度NO[（216±47）μmol／L]和高活性的NOS[（5．7±1．3）U／ml]，L—NIL组NO释放量[（55±20）μmol／L]较对照组明显减少，NOS活性[（1．7±0．7）U/ml]显著降低（P均〈0．01）。Luminex液相蛋白芯片显示对照组OA软骨中MMPs[（MMP-1（10．8±5．4）ng／ml，MMP-2（9．2±3．3）ng／ml，MMP-3（11．6±4．2）ng／ml，MMP-9（1．27±1．07）ng／ml，MMP-13（3．6±1．3）ng／ml]的表达异常，而L—NIL组OA软骨中MMPs表达量明显被抑制[分别为（3．6±1．8）ng／ml，（2．3±1．2）ng/ml，（3．6±1．4）ng／ml，（0．65±0．21）ng／ml，（1．8±0．5）．g／ml，P均〈0．05]。结论Luminex液相蛋白芯片检测系统表明NOS抑制剂通过减少NO的过度释放和降低NOS活性，进而抑制MMPs的过度表达来改善OA软骨的代谢。
- 孙炜刘安庆江建明王吉兴金大地
- 关键词：骨关节炎软骨液相蛋白芯片
- 一氧化氮合酶抑制剂对软骨修复组织蛋白多糖代谢和胶原表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂对软骨修复组织蛋白多糖代谢和胶原表达的影响。方法双侧股骨髁间关节面全层软骨缺损新西兰大白兔24只,随机均分为对照组、骨形态发生蛋白(BMP)组和iNOS抑制剂S-甲基异硫脲(SMT)组。术后1年处死动物。应用组织切片番红O-快绿染色检测蛋白多糖,苦味酸-天狼猩红染色检测胶原的分布情况,利用图像分析技术检测糖胺聚糖含量和胶原的表达以及软骨厚度。结果术后1年,SMT组软骨修复组织番红O-快绿染色百分率(89.28%)明显高于BMP组(36.54%)和对照组(13.4%),SMT组软骨修复组织番红O-快绿染色平均灰度值(134.5)分别为BMP组(56.8)和对照组(26.4)的2.5倍和7倍。修复组织软骨平均厚度,SMT组(1.75cm)分别为BMP组(0.76cm)和对照组(0.25cm)的2倍和7倍。SMT组修复组织Ⅰ型胶原表达量为65.9%,明显少于BMP组(88.5%)和对照组(94.6%);Ⅱ型胶原表达量(30.7%)多于BMP组(10.8%)和对照组(4.5%)。结论iNOS抑制剂SMT的应用能明显增加软骨修复组织中糖胺聚糖含量,并能明显增加Ⅱ型胶原表达,对于维持软骨表型和提高软骨修复质量有积极意义。
- 孙炜江建明王吉兴刘晓霞金大地刘安庆
- 关键词：一氧化氮合酶酶抑制剂软骨修复
- 软骨修复组织蛋白多糖代谢与一氧化氮合酶抑制剂的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:应用一氧化氮合酶抑制剂可改善骨性关节炎和风湿性关节炎软骨的代谢,作者前期的实验也证明一氧化氮合酶抑制剂能提高软骨修复组织的质量。实验进一步观察一氧化氮合酶抑制剂对软骨修复组织蛋白多糖代谢的影响。方法:实验于1999-06/2002-02在南方医科大学完成。①实验分组:取雄性新西兰兔24只,8月龄,体质量(2.5±0.2)kg。随机抽签法分为对照组、骨形态发生蛋白组和S-甲基异硫脲组,每组8只。②实验方法:将大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损,对照组:软骨缺损不充填任何物质;骨形态发生蛋白组:缺损用骨形态发生蛋白纤维蛋白凝胶复合物充填;S-甲基异硫脲组:缺损应用胶原复合骨形态发生蛋白充填,术后按5mg/(kg·12h)皮下注射S-甲基异硫脲。术后1年麻醉后处死动物。③实验评估:应用组织切片番红O-快绿染色和图像分析技术,按照染色百分率、平均灰度(平均染色程度)和染色厚度(软骨厚度)指标来检测糖胺聚糖含量;应用Na235SO4掺入法检测软骨修复组织蛋白多糖合成。结果:纳入新西兰兔24只,均进入结果分析。①术后1年,对照组几乎无红色染色区域;骨形态发生蛋白组可见到少量的不均匀红色区域;S-甲基异硫脲组可见到较多均匀一致的红色染色区域。②S-甲基异硫脲组软骨修复组织番红O染色百分率为89.28%,明显高于骨形态发生蛋白组36.54%和对照组13.4%,S-甲基异硫脲组修复组织番红O-快绿染色平均灰度值134.5,分别为骨形态发生蛋白组平均灰度值56.8的2.5倍,为对照组26.4的7倍。软骨平均厚度S-甲基异硫脲组1.75cm分别为骨形态发生蛋白组0.76cm和对照组0.25cm的2倍和6倍。③Na235SO4掺入法结果显示,S-甲基异硫脲组[35S]摄入量明显高于骨形态发生蛋白组和对照组(P<0.01)。结论:诱导型一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲的应用能明显增加软骨修复组织糖�
- 孙炜王吉兴金大地刘晓霞杨欣建
- 关键词：一氧化氮合酶酶抑制剂软骨蛋白多糖
