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弓形虫液泡型质子焦磷酸酶单克隆抗体的制备及其功能鉴定: 液泡型质子焦磷酸酶(vacuolar H+-pyrophosphatase,V-PPase)是一种特殊的生电质子泵,分为K+依赖型(I型)和非K+依赖型(II型),其功能是利用水解无机焦磷酸产生的能量,建立质膜内外氢离子...; 佟澄碧汪园园廖小青程莎莎罗树红郝文波

钠氢交换体的结构、功能及其在疾病中的作用被引量：3: 2014年; 细胞内pH维持在一定的生理范围内,对细胞的生长分化、细胞内酶的活性、细胞骨架的装配与解聚等生理过程至关重要。细胞主要依赖于一系列离子转运蛋白来调控细胞内pH的动态平衡,钠氢交换体（Na＋/H＋exchanger,NHE）是其中重要的成员之一。; 邱晓媚余柳婷詹彦俐肖斌郝文波; 关键词：基因表达分子结构 PH调节

兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定被引量：2: 2015年; 目的制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(Tg VP1)多克隆抗体并鉴定其应用。方法选择弓形虫ME49株Tg VP1氨基酸序列中的两条多肽,Tg VP1-1与Tg VP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定。结果经间接ELISA测定,兔抗Tg VP1-1及Tg VP1-2的多克隆抗体效价均达1∶128 000;Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85 000左右条带,与Tg VP1预测相对分子质量大小相符,且特异性较好;通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中,与酸性钙体的分布相同。结论采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗Tg VP1多克隆抗体效价高,特异性好,弓形虫Tg VP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础,同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具。; 佟澄碧郝文波罗树红肖斌程莎莎廖小青潘迪; 关键词：弓形虫焦磷酸酶多克隆抗体

伯氏疟原虫酸性钙体的分离纯化及其功能鉴定: <正>酸性钙体(acidocalcisome)是一种富含钙、多聚磷酸盐、电子致密的酸性细胞器。具有广泛的生理学功能,如:Ca2+信号通路的调节,PPi、polyP的代谢,pH平衡、渗透压的调节等。该细胞器最先在锥虫中被发...; 程莎莎廖小青罗树红郝文波; 文献传递

弓形虫液泡型质子焦磷酸酶单克隆抗体的制备及其功能鉴定: <正>液泡型质子焦磷酸酶(vacuolar H+-pyrophosphatase,V-PPase)是一种特殊的生电质子泵,分为K+依赖型(I型)和非K+依赖型(II型),其功能是利用水解无机焦磷酸产生的能量,建立质膜内外...; 佟澄碧汪园园廖小青程莎莎罗树红郝文波; 文献传递

伯氏疟原虫酸性钙体的分离纯化及其功能鉴定: 酸性钙体(acidocalcisome)是一种富含钙、多聚磷酸盐、电子致密的酸性细胞器。具有广泛的生理学功能,如:Ca2+信号通路的调节,PPi、polyP的代谢,pH平衡、渗透压的调节等。该细胞器最先在锥虫中被发现和命...; 程莎莎廖小青罗树红郝文波

恶性疟原虫PfRh5F2片段pTGub21b表达载体的构建及融合蛋白表达鉴定: 2014年; 目的克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F2片段,并评价其抗原性。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pTGub21b中,构建PfRh5F2/pTGub21b原核表达载体。IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用Western blot检测其抗原性。结果成功构建了PfRh5F2/pTGub21b原核表达系统,并在大肠杆菌中可溶性高效表达,表达产物能被恶性疟患者血清识别,而重组抗原免疫鼠血清也能识别恶性疟患者血样中的相应抗原。结论恶性疟原虫PfRh5 F2片段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性和免疫原性。; 程莎莎郝文波罗树红廖小青; 关键词：恶性疟原虫

酸性钙体的研究进展被引量：1: 2013年; 酸性钙体是近年发现的一种富含磷酸盐的致密颗粒性的酸性细胞器，主要以焦磷酸盐（pyrophosphate，PPi）、多磷酸（polyphosphate，polyP）为代表，另外还含有钙和其他阳离子。其膜上含有多种泵（钙泵、ATP酶质子泵、焦磷酸酶质子泵）、转运体（钠离子／氢离子、钙离子／氢离子）及通道（通道蛋白），基质中含有与Pn和DolyP代谢有关的酶。酸性钙体已在包括细菌、寄生虫、人类细胞等多种生物中被发现，其主要功能包括：（1）是阳离子和磷酸盐的储存场所，（2）参与焦磷酸盐和多聚磷酸盐代谢机制，（3）维持细胞内钙和DH的稳态，（4）参与渗透压的调节等。该文对近年来有关酸性钙体的研究进展进行综述和讨论．; 程莎莎郝文波罗树红; 关键词：多聚磷酸盐焦磷酸盐

兔抗弓形虫CorA家族Mg^(2+)转运蛋白多肽抗体的制备及鉴定被引量：3: 2016年; 目的:制备并鉴定兔抗弓形虫CorA家族Mg^(2+)转运蛋白(TgMg)的特异性多克隆抗体。方法:设计并合成一段的具有较好免疫原性的、来源于TgMg氨基酸序列的短肽,短肽与KLH偶联后免疫新西兰大耳白兔,收集兔血清并分离纯化TgMg多克隆抗体,利用间接ELISA、Western印迹、间接免疫荧光等多种分子生物学方法鉴定多抗的效价、特异性及TgMg蛋白的亚细胞定位。结果:间接ELISA测定多抗效价为1∶160000;Western印迹显示该多抗能识别相对分子质量约为174×103的单一条带,表明抗体的特异性较好;用间接免疫荧光法发现TgMg定位于细胞质,与预期结果相符。结论:运用人工合成多肽结合经典的多克隆抗体制备技术制备了抗TgMg多克隆抗体,为深入研究TgMg蛋白的生物学特性及代谢功能提供了有效工具。; 肖斌陈瑜李林海罗树红郝文波; 关键词：弓形虫多克隆抗体免疫荧光

恶性疟原虫复制蛋白PfRPA2的原核表达及多抗制备: 2012年; 目的克隆表达恶性疟原虫复制蛋白PfRPA2亚基,制备多抗,为该蛋白的功能研究奠定基础。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pGEX-KG中,构建PfRPA2/pGEX-KG原核表达载体,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,谷胱甘肽柱纯化蛋白,Westernblot检测其抗原性,以纯化的GST-PfRPA2免疫小鼠,制备抗PfRPA2的多抗,间接ELISA法检测鼠血清效价,Westernblot鉴定多抗特异性。结果成功构建了重组PfRPA2/pGEX-KG原核表达质粒,并在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,纯化表达产物,制备抗PfRPA2的鼠多抗,效价为10-7,Westernblot证实此抗体可识别恶性疟原虫内与PfRPA2蛋白位置对应的特异性条带。结论恶性疟原虫复制蛋白PfRPA2亚基在大肠杆菌中获得可溶性高效表达,纯化表达产物能诱导小鼠生产能识别天然蛋白的特异性抗体。; 刘雅娟李宏周于婷郝文波李纪良吴英松罗树红李明; 关键词：恶性疟原虫原核表达多克隆抗体

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