国家现代农业产业技术体系建设项目(NYCYTX-34)
- 作品数：14 被引量：61H指数：4
- 相关作者：黄天带华玉伟黄华孙周权男李季更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院淮北师范大学海南天然橡胶产业集团股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 温度和pH对农杆菌介导转化橡胶树悬浮细胞的影响被引量：3
- 2013年
- 橡胶树胚性细胞悬浮培养系及其植株再生体系的建立可为橡胶树遗传转化研究提供良好的材料。以橡胶树品种热研8-79悬浮培养的胚性细胞为受体,研究了共培养基pH值和共培养温度对农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化的影响。结果表明:pH5.2～5.4、20℃～22℃共培养适宜于农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化。
- 周权男谢黎黎黄天带华玉伟孙爱花黄华孙
- 关键词：橡胶树胚性细胞PH
- 橡胶树转基因植株Southern杂交体系的优化被引量：2
- 2014年
- 以地高辛标记的Southern杂交技术已广泛应用于多个物种中。选择橡胶树为材料,就基因组DNA的提取、探针标记方法的选择以及具体的杂交操作过程等方面对该体系进行了优化。结果表明,至少40μg高质量的DNA在300μL的大酶切体系中,酶切12 h可获得良好效果;PCR法标记的探针杂交条带清晰、背景浅,其效率明显强于随机引物法标记的探针。本研究优化的体系信号强、背景浅和灵敏度高,为橡胶树Southern杂交鉴定分析提供参考。
- 李季鲁旭黄天带华玉伟黄华孙
- 关键词：橡胶树转基因SOUTHERNBLOT地高辛
- 植物组织培养中污染控制技术的研究现状被引量：15
- 2012年
- 分析了植物组织培养过程中的污染原因,结合外植体消毒技术的研究现状,提出如何控制由外植体引发污染的方法。选择合适的外植体和消毒剂,采用联合消毒方法,对外植体初代培养中内源污染的控制效果比较明显。另外,对于难消毒的外植体,配合使用抗生素能有效地控制污染。
- 周权男姜泽海李哲黄天带孙爱花华玉伟黄华孙
- 关键词：植物组织培养污染外植体消毒
- 多重PCR技术在橡胶树转基因分子鉴定中的应用被引量：2
- 2014年
- 为了同时检测橡胶树转基因胚状体和叶片中含有的多个目标基因序列,并排除扩增结果的假阴性,利用正交试验首次建立了橡胶树管家基因(HbActin)、目标基因新霉素磷酸转移酶II(NptII)基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因的多重PCR检测体系。利用2种酶(PCR Mix酶和Taq酶)对18个转基因胚状体和叶片进行单一引物PCR扩增和多重PCR检测。结果表明:多重PCR检测结果与单一PCR结果完全一致,且多重PCR体系带型清晰,无非特异性扩增,更易读取。多重PCR检测系统具有简单、准确并且高效等特点,只需要进行一个反应就可以检测多个目标基因序列,因而在转基因分子鉴定上具有非常重要的应用价值与潜力。
- 李季黄天带华玉伟黄华孙
- 关键词：多重PCR橡胶树分子鉴定
- 基因型对橡胶树胚状体遗传转化瞬时表达影响的研究被引量：2
- 2012年
- 侵染后抗性胚状体诱导频率低是影响橡胶树遗传转化发展的主要原因,而橡胶树次生体胚发生体系具有体胚增殖效率及植株再生率高的优点。以3个综合性状优良的橡胶树无性系次生体细胞胚状体为受体,研究其对根癌农杆菌的耐侵染能力、GUS基因的瞬时表达情况,探讨不同无性系胚状体对农杆菌转化的反应。结果表明:3个无性系农杆菌污染情况无显著差异,长菌的外植体经无菌水和抗生素水洗涤3 d后即可恢复生长;侵染后每30个胚褐化了1.2～5个胚,占侵染总胚数的4.00%～16.67%,品种间褐化面积无显著差异;热研87-6-62的总蓝斑数显著高于其它2个无性系,平均每个胚染上14.29个蓝斑,热研7-33-97和PR107稍差,但每个胚也能分别染上8.14和8.72个蓝斑。因此3个无性系均可以胚状体作为遗传转化的受体。此结果对利用胚状体为受体改良橡胶树优良无性系奠定良好基础。
- 黄天带华玉伟周权男孙爱花戴雪梅
- 关键词：橡胶树胚状体受体
- 橡胶树转基因植株遗传稳定性分析被引量：6
- 2013年
- 以GUS染色为阳性的抗性胚状体继代再生植株的叶片为材料,通过PCR分析结合GUS染色对橡胶树转基因植株进行初期的阳性鉴定。结果表明,在59份转基因再生植株中,两对特异引物的PCR扩增结果与GUS染色检测结果一致,其中37株仍然表现为阳性,而22株却检测不到目的基因的存在以及GUS基因的表达,表现为外源基因的丢失。因此,初步推测低选择压造成了早期阳性胚状体在长期的连续继代培养再生植株的过程中发生了外源基因的丢失现象,并结合现有的研究提出了初步的解决措施。
- 李季黄天带蔡海滨华玉伟黄华孙
- 关键词：橡胶树转基因检测基因丢失继代
- 橡胶树体胚发生过程中的生理生化特性被引量：5
- 2014年
- 以巴西橡胶树花药为外植体,研究了巴西橡胶树花药体胚发生过程中抗氧化酶活性和某些生理参数的变化。结果表明,橡胶树花药体胚发生过程中,SOD活性变化表现在培养30 d达到最高值,而后下降平缓;丙二醛(MDA)含量在第60天达到最高。生理参数的变化表现为可溶性蛋白含量0 d含量最高,可溶性糖的含量在50 d达到最高,据此认为,SOD和MDA对橡胶树花药体胚的诱导起主导作用,可溶性蛋白含量与不定芽的发生密切相关。
- 张慧君华玉伟黄天带黄华孙
- 关键词：巴西橡胶树体胚发生抗氧化酶活性可溶性蛋白含量
- 抗生素对巴西橡胶树胚性悬浮细胞生长的影响
- 2014年
- 为了评估不同浓度抗生素对胚性悬浮细胞生长的影响,将橡胶树胚性悬浮细胞接种到不同浓度的替卡西林和卡那霉素的培养基上,结果表明,添加0～500 mg/L的替卡西林对胚性悬浮细胞生长影响较小;添加50 mg/L的卡那霉素能抑制胚性悬浮细胞生长,添加100 mg/L的卡那霉素导致部分胚性悬浮细胞死亡.将经共培养的胚性悬浮细胞接种到添加不同浓度普卡西林的培养基上,结果发现,300mg/L的替卡西林能较好的抑制农杆菌的增殖.替卡西林和卡那霉素可分别作为农杆菌介导的转化橡胶树胚性悬浮细胞的抑菌和筛选抗生素,替卡西林浓度以300 mg/L较好;卡那霉素50～10o mg/L较好.
- 周权男谢黎黎黄天带华玉伟戴雪梅黄华孙
- 关键词：巴西橡胶树抗生素胚性悬浮细胞
- 植物组织培养在农业生产中的应用研究进展被引量：19
- 2014年
- 植物组织培养是指利用细胞全能性培养再生植株的技术,具有快速繁殖、克服杂交不亲和及保存种质资源等优点。现对组织培养在基因工程、种质资源保存、原生体培养与体细胞杂交、单倍体育种、选择离体突变体、脱毒等方面的研究进展进行综述;同时简要介绍了组织培养在工厂化育苗、人工种子繁殖等方面的应用;并对组织培养在植物各领域的应用情况进行了展望。
- 周权男张慧君戴雪梅孙爱花黄天带黄华孙华玉伟
- 关键词：植物组织培养基因工程植物育种
- 内源激素对橡胶树花药体细胞胚发生的影响被引量：3
- 2016年
- 以巴西橡胶树花药为外植体,对巴西橡胶树再生过程中不同类型愈伤组织的内源激素含量及比值进行测定。结果表明:过高或过低的内源激素含量和不同内源激素含量比,大多会导致橡胶树外植体在分化过程中出现非胚性愈伤和畸形胚,因此橡胶树花药体细胞胚再生过程与其内源激素密切相关。
- 张慧君葛宇杨先锋李季黄天带
- 关键词：橡胶树花药体细胞胚内源激素
