国家自然科学基金(81271764)
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
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- 纳米银对阿萨希毛孢子菌抑菌效果及作用机制的研究被引量：4
- 2015年
- 目的明确并评价纳米银对阿萨希毛孢子菌的抑菌效果,探讨其可能的作用机制,为寻找新的抗真菌药物提供理论依据。方法观察不同浓度纳米银在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）上阿萨希毛孢子菌的生长情况,用M-27标准方案测定其MIC值,透射及扫描电镜下观察纳米银对阿萨希毛孢子菌超微结构的影响。结果发现纳米银对阿萨希毛孢子菌具有明显的抑制作用,且与浓度呈正相关,菌落直径为0-5.5cm;其MIC值为0.5μg/ml,大于伏立康唑的0.03-0.06μg/ml,小于其他常用抗真菌药物;电镜下发现,纳米银对其细胞壁及细胞膜均有不同程度的破坏,对线粒体、染色质、核糖体等细胞器结构的破坏也非常明显。结论纳米银对阿萨希毛孢子菌生长具有明显抑制作用,其抗菌效果好于常用的抗真菌药物,其作用机制可能为通过对细胞壁、细胞膜的破坏或者直接渗透入细胞内,引起细胞内容物外泄及细胞器的损伤,最终可导致细胞死亡。
- 夏志宽夏建军陈卫丛林张德全杨蓉娅
- 关键词：纳米银阿萨希毛孢子菌抗真菌作用超微结构
- 体外诱导耐药阿萨希毛孢子菌氟康唑耐药相关基因筛选
- 2020年
- 目的筛选阿萨希毛孢子菌氟康唑耐药相关基因,为研究该菌氟康唑耐药机制及开发新型抗真菌剂提供理论依据。方法将临床分离的氟康唑敏感阿萨希毛孢子菌通过不断倍增氟康唑药物浓度的方法进行体外诱导培养,直至药物浓度≥128μg/mL,再进行无药培养30代,测定其MIC值。分别提取敏感菌株和诱导耐药菌株的总RNA,构建RNA文库,转录组测序后进行生物信息学分析,寻找差异表达基因。相同方法诱导另外2株敏感菌株为耐药菌株,并对3对敏感与耐药菌株的基因组进行测序,比较ERG11基因序列。结果成功获得稳定的诱导耐药菌株,转录组发现耐药菌株中与药物转运相关基因、麦角固醇合成相关基因、抗氧化基因等上调表达,其中氟康唑靶酶编码基因ERG11基因表达上调了3.7倍。而基因组测序证实3株耐药菌株中ERG11基因的碱基序列未发生突变。结论阿萨希毛孢子菌耐药分子机制复杂,麦角固醇合成途径中的基因,特别是ERG11基因上调表达是其主要机制之一,同时还与外排转运基因、抗氧化基因等有关。
- 夏志宽国晶张德全鲁勇敖俊红杨蓉娅
- 关键词：阿萨希毛孢子菌氟康唑体外诱导ERG11
- 中草药抗白念珠菌作用研究进展被引量：3
- 2013年
- 白念珠菌,是人类最常见的真菌病原体,可引起各种浅表及深部真菌病,对常用抗真菌药物易产生耐药。文章就近年来有关中草药抗白念珠菌的相关临床及实验研究进行综述,主要从中草药抗白念珠菌的作用机制及其活性成分、单味及复方中草药制剂抗白念珠菌作用、中西药协同抗白念珠菌作用几个方面进行阐述。
- 李姝毅夏志宽杨蓉娅
- 关键词：白念珠菌中草药
- 丁香酚体外抗阿萨希毛孢子菌的电镜观察被引量：2
- 2013年
- 目的观察中药单体——丁香酚(Eugenol)对阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)超微结构的影响,探讨其可能存在的潜在作用机制。方法参照NCCLS推荐的M27-A3方案,将受试药物与阿萨希毛孢子菌在35℃下共同培养5d后分离菌体,按常规方法进行样品处理后,扫描电镜和透射电镜下观察其细胞表面形态与细胞内超微结构的变化情况。结果扫描电镜下:丁香酚作用阿萨希毛孢子菌后,真菌的菌体出现肿胀膨大和干瘪变形,部分菌丝的胞壁破坏,随着丁香酚药液浓度的增加,菌丝完全被破坏,且胞质外溢。透射电镜下:丁香酚作用阿萨希毛孢子菌后,真菌的细胞壁不完整,局部有缺损,厚薄不均匀;细胞膜轮廓不清,局部有破损;胞内细胞器损伤严重,多见空泡化。结论丁香酚作用阿萨希毛孢子菌后,可使其形态和超微结构发生明显的改变,证实丁香酚具有抗阿萨希毛孢子菌作用,为开发中药治疗阿萨希毛孢子菌病提供理论依据。
- 李姝毅马秋华杨蓉娅夏志宽田艳丽
- 关键词：丁香酚超微结构电镜
- 氟康唑诱导耐药的阿萨希毛孢子菌ERG11基因表达研究
- 2017年
- 目的 探讨ERG11基因在阿萨希毛孢子菌耐药的作用以及基因表达量与药物浓度间的关系。方法 通过氟康唑体外诱导获得阿萨希毛孢子菌耐药菌株，将敏感株与耐药株同时置于含0 ~ 64 μg /ml浓度氟康唑的培养基中培养，用实时PCR检测ERG11基因的表达情况。结果 在无药情况下，阿萨希毛孢子菌耐药株组ERG11基因表达（7.542 ± 5.311）高于敏感株组（1.014 ± 0.012），两组比较t = 3.002，P = 0.03。在不同浓度氟康唑作用下，耐药株组ERG11 mRNA水平分别为9.183 ± 3.226，13.657 ± 5.428，15.292 ± 7.007，13.720 ± 8.550，13.949 ± 2.960，13.123 ± 6.429，亦高于敏感株组3.281 ± 2.068，3.459 ± 1.923，3.242 ± 2.530，3.651 ± 0.728，3.969 ± 1.924，3.824 ± 1.875，均P 〈 0.05。但ERG11表达量与氟康唑浓度之间差异无相关性（耐药株rs = 0.229，P = 0.096；敏感株rs = 0.166，P = 0.357）。结论 阿萨希毛孢子菌ERG11基因过表达与氟康唑耐药有关。ERG11基因mRNA表达与氟康唑浓度之间无相关性。
- 丁潇夏志宽张德全杨蓉娅
- 关键词：氟康唑抗药性阿萨希毛孢子菌ERG11
- 丁香酚体外抗阿萨希毛孢子菌作用研究被引量：8
- 2013年
- 目的：评价丁香酚对阿萨希毛孢子菌的体外抑菌效果,初步探讨其可能的作用机制。方法：参照美国临床实验室标准研究所2008年版酵母菌药敏实验M27-A3方案,测定丁香酚对13株阿萨希毛孢子菌（Trichosporon asahii,T.asahii）的最低抑菌浓度（MIC）及最小杀菌浓度（MFC）;应用紫外分光光度计绘制不同浓度丁香酚作用下阿萨希毛孢子菌的生长曲线;扫描电镜下观察丁香酚对菌体形态学的影响。结果：丁香酚对13株受试菌株的MIC为99.75~399.00μg/ml,MFC为199.50~798.00μg/ml;与空白对照相比,丁香酚作用后的阿萨希毛孢子菌的生长明显受抑制,丁香酚抑菌作用特性表现为较强的浓度依赖性;扫描电镜下可见丁香酚作用后阿萨希毛孢子菌菌体出现肿胀膨大、干瘪变形,部分菌丝胞壁破坏,随着丁香酚药液浓度的增加,可见整个菌丝完全被破坏,胞质外溢。结论：丁香酚对阿萨希毛孢子菌具有较强的抑菌和杀菌作用,可使其形态和超微结构发生明显变化,其作用机制可能为对细胞壁及细胞膜的直接破坏。
- 李姝毅马秋华杨蓉娅夏志宽
- 关键词：丁香酚阿萨希毛孢子菌MICMFC扫描电镜
- 阿萨希毛孢子菌氟康唑体外诱导耐药的方法优化被引量：1
- 2014年
- 目的观察氟康唑联合甲强龙体外诱导阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)获得氟康唑体外诱导耐药株的成功率及稳定性,为T.asahii唑类耐药机制研究奠定基础。方法对16株T.asahii进行氟康唑的真菌体外药敏试验,分别通过氟康唑、氟康唑联合甲强龙和单纯甲强龙对其进行体外诱导耐药,并与空白对照组进行比较。所有诱导获得的耐药菌株进行30次无药传代,每株菌在每次传代后均重新进行最小抑菌浓度(MIC)检测。结果空白对照组及单纯甲强龙组各菌株MIC值无明显变化;单纯氟康唑诱导获得耐药株12株(75%),氟康唑联合甲强龙诱导获得耐药株16株(100%);两组经30代传代后,单纯氟康唑组耐药株6株(37.5%),氟康唑联合甲强龙诱导获得耐药株9株(56.25%)。结论甲强龙可以提高氟康唑诱导T.asahii耐药株的成功率和稳定性,氟康唑联合甲强龙优于单纯氟康唑,更适用于T.asahii氟康唑体外耐药株的诱导。
- 张德全夏志宽田艳丽廖勇吕雪莲陈卫王聪敏杨蓉娅
- 关键词：阿萨希毛孢子菌氟康唑耐药性最小抑菌浓度
- 抑制阿萨希毛孢子菌顶体对其增殖及致病性的影响
- 2014年
- 目的 探讨抑制阿萨希毛孢子菌（Trichosporon asahii,Zasahii）顶体（Spitzenkorper）形成后对其细胞增殖及致病性的影响.方法 经不同浓度细胞松弛素D（0.5、1.0及2.0 μmol/L）处理阿萨希毛孢子菌,以抑制其顶体形成,体外测定生长曲线及生长菌落变化;小鼠体内接种上述菌悬液后,统计小鼠3周内的死亡率,并取内脏进行组织培养和病理检查,统计感染率.结果 经细胞松弛素D处理抑制顶体形成后,Z asahii细胞生长明显延迟8～16 h,生长菌落直径明显变小;小鼠死亡率及感染率亦出现不同程度降低,并随着药物浓度的升高,其致病性明显降低.结论 抑制阿萨希毛孢子菌顶体形成后,细胞增殖明显受到抑制,且致病性也随细胞松弛素D浓度的增加而降低.提示顶体可以作为研制新型抗真菌药物的新靶点.
- 李梅王文岭夏志宽杨蓉娅
- 关键词：阿萨希毛孢子菌顶体
