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大鼠脂肪因子Vaspin基因的克隆与原核表达被引量：1: 2014年; 目的构建大鼠脂肪因子Vaspin高效原核表达载体,并获得纯化的Vaspin蛋白。方法以大鼠睾丸脂肪细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增Vaspin基因,亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)获得重组质粒pET-30a-Vaspin,转化至E.coli BL21(DE3)菌株中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达产物,用Ni柱进行纯化重组蛋白,Western blot鉴定其特异性。结果测序结果表明克隆的Vaspin基因序列正确,构建的原核表达载体可以成功表达分子量为50 kDa的重组蛋白,Western blot结果证实该蛋白为大鼠脂肪因子Vaspin。结论完成了大鼠脂肪因子Vaspin基因的克隆,成功构建了原核表达载体,并在BL21(DE3)菌株中高表达,为进一步研究Vaspin在胰岛素抵抗及肥胖中的作用机制奠定了基础。; 于纪棉王建峰张玉琳孟香红倪晶晶陶冬英; 关键词：脂肪因子原核表达

重组丝氨酸蛋白酶抑制剂对链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠的影响被引量：2: 2016年; 目的探讨重组丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠的影响。方法通过体外表达获得重组Vaspin蛋白。采用高脂饲料加小剂量注射STZ诱导2型糖尿病SD大鼠模型,对照组大鼠给予普通饲料喂养。将造模成功的大鼠随机分成两组,实验组腹腔注射100μl 0.5 mg/ml重组Vaspin蛋白,模型组以生理盐水代替,每天给药1次,连续给药2 w后,进行口服吐葡萄糖耐量(OGTT)试验;分离血清,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)以及肿瘤坏死因子(TNF)-α,瘦素(Lep)的水平。结果 OGTT结果显示经过重组Vaspin蛋白腹腔注射治疗后的糖尿病大鼠血糖变化曲线接近于正常,且2 h后下降至对照组大鼠水平。经过Vaspin蛋白治疗2 w后,实验组大鼠的TC、TG、LDL和FBG、FINS、胰岛素抵抗(IR)均显著降低,脂肪因子Lep和TNF-α下降至正常水平。结论该研究获得的重组Vaspin具有活性,可以降低糖尿病大鼠的血糖,改善糖尿病大鼠的糖脂代谢和IR水平。; 于纪棉王建峰张玉琳黄素文倪健波; 关键词：糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗

课前案例分析法在助产专业人体形态学教学中的应用被引量：2: 2012年; 在助产专业人体形态教学中,分别采用传统教学法和课前案例分析法2种方式进行教学并比较期末实验成绩及人体形态学竞赛成绩。结果显示课前案例分析法不但有助于提高学生人体形态学的学习成绩,而且有利于学生明确解剖结构与临床操作技术之间的关系,为后续专业课程的学习打下良好的基础。; 张玉琳于纪棉; 关键词：人体形态学助产专业

SD大鼠2型糖尿病模型的建立被引量：3: 2012年; 目的利用高糖、高脂饮食联合注射链脲佐菌素（STZ），建立SD大鼠2型糖尿病动物模型，为抗糖尿病药物的筛选以及实验提供一个良好的动物模型。方法35只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组，实验组（25只）饲喂高糖、高脂饲料，对照组（10只）饲喂基础饲料。饲喂4周后，按30mg／kg剂量一次性腹腔注射STZ，对照组注射同等剂量的柠檬酸缓；中液。实验组继续饲喂高糖、高脂饲料，注射后每周采血1次，连续采3周，比较实验组与对照组空腹血糖、INS、血脂的变化。注射STZ后3周，剖杀所有实验大鼠，取胰腺，显微镜下观察胰岛的变化。结果实验组大鼠2型糖尿病特征显著，成功率高达88％。与对照组相比，实验组大鼠空腹血糖、INS、TC、TG、LDL以及HOMA-IR明显升高（P〈005或001）。结论高糖、高脂饮食加以一次性注射小剂量STZ可成功建立SD大鼠2型糖尿病模型。; 于纪棉张岳灿张玉琳张玲李高文王建峰; 关键词：SD大鼠 2型糖尿病动物模型

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宁波市自然科学基金(2011A610030)