广州市重大科技攻关项目(990448022)
- 作品数：25 被引量：87H指数：6
- 相关作者：马文丽郑文岭李凌祝骥吴清华更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院中国人民解放军第一军医大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：广州市重大科技攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用基因芯片技术筛选HIV-1F亚型基因限制性显示探针被引量：6
- 2002年
- 为筛选限制性显示技术制备的HIV 1F亚型基因探针 ,应用基因芯片打印仪将其有序地打印在玻片上制备基因芯片 .在随机引物延伸的过程中进行HIV样品的荧光标记 ,然后与芯片进行杂交 .杂交后清洗玻片并干燥 ,对芯片进行扫描 ,分析各探针的杂交信号 .从中筛选了 14个基因片段作为芯片下一步研究的探针 .实验证明 。
- 李凌马文丽祝骥石嵘郑文岭
- 关键词：基因芯片技术
- 三种寡核苷酸芯片片基的比较
- 2005年
- 将荧光标记的寡核苷酸打印在Corning、多聚赖氨酸包被的DAKO玻片和多聚赖氨酸处理的一种显微镜载玻片上,并按常规方法进行洗脱,通过GenePix4100A扫描并以Genepix6.0软件分析点的大小、荧光强度和背景荧光强度来衡量3种片基的均一性和固定效率,并通过不同浓度梯度的60bp寡核苷酸探针的杂交实验来衡量片基对杂交效率的影响.结果显示,3种片基的均一性都较好,而多聚赖氨酸包被的DAKO和Corn-ing芯片的固定效率和杂交效率优于国产芯片.
- 徐秋林马文丽石嵘李凌郑文岭
- 关键词：寡核苷酸探针基因芯片杂交
- 精子细胞中基因表达谱的研究被引量：11
- 2002年
- 目的研究成熟精子细胞中的基因表达。方法采用限制性显示PCR(RD-PCR)获得大量正常和异常精子细胞中基因表达序列标签(EST)并以表达谱图的方式显示出来。结果通过RD-PCR技术得到大量正常精子细胞和异常精子细胞的EST及部分差异表达EST。结论RD-PCR技术既能针对已知基因又能针对未知基因,快速收集大量长度适宜、大小均一、适于芯片制备的EST,较通过cDNA文库等方法得到靶基因片段具有独特的优势。关键词:精子;基因表达谱;
- 毛向明马文丽彭翼飞郑文岭
- 关键词：精子基因表达谱
- 登革病毒的基因组结构及其基因检测被引量：6
- 2003年
- 肖维威马文丽郑文岭
- 关键词：登革病毒基因组结构基因检测登革热
- 应用RD-PCR方法制备K562细胞表达谱芯片基因探针被引量：13
- 2002年
- 目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段。方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增。结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段。结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集。
- 毛向明马文丽姜立郑文岭
- 关键词：K562细胞表达谱基因芯片分子探针
- 绿色荧光蛋白基因在脂肪细胞分化研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的建立人脂肪细胞分化的绿色荧光蛋白活体检测动态模型,为进一步进行脂肪细胞分化及其相关基因表达研究奠定基础。方法用PCR法从培养的人前脂肪细胞总DNA中扩增出过氧化物体酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因启动子,将该启动子插入真核细胞表达载体pEGFP-1后转染3T3成纤维细胞及人前脂肪细胞,并诱导脂肪细胞分化。结果在胰岛素、地塞米松及3-异丁基-1-甲基黄嘌呤诱导下,人前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞时表达绿色荧光蛋白基因,而3T3细胞则不能诱导为脂肪细胞及表达绿色荧光蛋白基因。结论脂肪组织特异表达的PPARγ2基因启动子与绿色荧光蛋白基因构成的重组基因转化人前脂肪细胞后,能够用来动态活体检测脂肪细胞分化状态。这一模型的建立为脂肪细胞分化调控的分子机制研究提供一个更加方便的检测途径。
- 祝骥马文丽毛向明李凌吴清华郑文岭
- 关键词：脂肪细胞分化绿色荧光蛋白基因
- HIV基因芯片的初步研究被引量：6
- 2002年
- 目的建立HIV基因检测芯片的分析技术。方法分离HIV1U26942基因限制性显示片段作探针,应用PixSys 5500点样仪将探针打印在氨基包被的玻片上制作基因芯片。然后与随机引物荧光标记的HIV样品进行杂交,以分析限制性显示基因片段的杂交动力学。经杂交后清洗和干燥,扫描芯片进行检测。结果对基因检测芯片的制作与检测的实验条件进行了初步研究并筛选了12个限制性显示基因探针。结论建立的检测芯片的实验方法可行且较特异。
- 李凌马文丽毛向明祝骥郑文岭
- 关键词：基因芯片HIV感染
- K562细胞经氯化高铁血红素诱导后分化相关基因的筛选被引量：6
- 2001年
- 目的 研究K5 6 2细胞经氯化高铁血红素 (Hemin)诱导后在cDNA分子水平上的表达差异。 方法用限制性显示 (RD PCR)方法寻找K5 6 2细胞在经Hemin诱导后的cDNA差异表达片段。 结果 筛选到差异表达片段 4条 ,并进行了序列测定与同源性分析。 结论 K5 6 2细胞分化是多基因参与的结果 ,这些分化相关基因的共同作用使K5 6
- 姜立马文丽郑文岭薛社普
- 关键词：氯化高铁血红素K562细胞白血病HEMIN
- DNA芯片在研究酵母基因组中的应用
- 2002年
- 刘莉扬马文丽马建岗郑文岭
- 关键词：DNA芯片技术酵母基因组基因表达
- GFP质控芯片的初步研究
- 2005年
- 目的:建立一种质量控制芯片来监测样品标记、杂交和检测过程中的失误。方法:针对GFP基因设计的4条60mer寡核苷酸探针和1条阳性对照探针poly(U)与流感寡核苷酸探针一起打印在DAKO玻片上,并构建了GFP基因的克隆载体和体外表达载体,将从这两种重组载体上获得的绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein,GFP)基因的RNA、DNA片段和人的全血样品中的DNA用限制性显示技术(RestrictionDisplaytechnology,RD)扩增标记,将标记的样品和荧光标记的通用引物U分别与芯片杂交、检测,并对扫描的结果进行统计分析。结果:GFP探针与相应的样品杂交时出现阳性信号,阳性对照探针在所有的杂交中均出现阳性信号,而空白对照则未检测荧光信号。结论:建立的质控芯片具有较好的敏感性和特异性,可以用于基因芯片中的质量监控。
- 徐秋林马文丽李凌石嵘毛向明吴清华郑文岭
- 关键词：基因芯片绿色荧光蛋白
