国家自然科学基金(81072081)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 盐酸氨基酮戊酸介导的光动力疗法增高U251细胞蛋白酶体的表达被引量：1
- 2012年
- 目的探讨盐酸氨基酮戊酸(5-ALA)做为光敏剂的光动力疗法(PDT)对人胶质瘤细胞株U251细胞的杀伤效应及其对U251细胞蛋白酶体亚基低分子量多肽(LMP)2、7表达的影响。方法培养U251细胞,利用细胞计数药盒确定的5-ALA-PDT对U251细胞半抑制剂量为试验条件。分别收集5-ALA-PDT处理后3、6、9、12、15、18、21和24 h及对照组U251细胞LMP2和LMP7,RNA与蛋白质,分别行实时PCR、Western Blot分析。结果强度为20 mw/cm2激光照1、2、3和4 min后U251细胞抑制率分别为11.18%、19.6%、48.62%、66.21%。以强度为20 mw/cm2照射3 min为条件,照射后3、6、9、12、15、18、21和24 h,U251细胞蛋白酶体亚基LMP2、LMP7蛋白和mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.01)。结论以5-ALA为光敏剂的PDT能有效抑制体外培养U251细胞生长,并促进蛋白酶体的表达。
- 温铖彩李军亮张善义许新科欧阳乐平余舰李方成
- 关键词：胶质瘤U251细胞盐酸氨基酮戊酸光动力疗法蛋白酶体
- 过表达TAP1上调人胶质瘤细胞株U251 HLA-Ⅰ的表达被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨抗原提呈相关转运蛋白1(TAP1)过表达对人胶质瘤细胞株U251人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)表达的影响。方法:培养U251细胞,构建慢病毒载体并转染U251细胞,获得稳定高表达TAP1的细胞株并设立转染空载体对照组,分别收集U251细胞组、空载体对照组和TAP1基因转染细胞组细胞的蛋白和RNA,行real-time PCR和Western blotting分析过表达的TAP1对U251细胞HLA-Ⅰ表达的影响,并用流式细胞术分析U251细胞HLA-Ⅰ表面呈现的变化。结果:成功建立TAP1高表达U251细胞株,TAP1 mRNA和蛋白分别升高(8.73±1.07)倍和(11.71±0.83)倍。高表达的TAP1促进U251细胞HLA-A、HLA-B、HLA-C(重链)和β2微球蛋白(轻链)mRNA表达上调,分别升高(3.51±0.36)倍、(4.78±0.85)倍、(2.94±0.28)倍和(3.23±0.24)倍,HLA-Ⅰ蛋白表达升高(3.14±0.53)倍,同时U251细胞HLA-Ⅰ的表面呈现明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:过表达TAP1能促进U251细胞HLA-Ⅰ表达及其在细胞表面呈现的提高。
- 欧阳乐平张善义李军亮许新科翁胤仑郑眉光王圣文李方成
- 关键词：U251细胞
- 抗原加工相关的转运蛋白1在胶质瘤中的表达及临床意义
- 2020年
- 目的探讨抗原加工相关的转运蛋白1(TAP1)是主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)类抗原呈递途径所必需,在肿瘤免疫学监测重要标志性作用。方法通过慢病毒转导3种胶质瘤细胞株(U87、U251和GL261)中过表达和敲低TAP1的表达水平,实验分为正常对照组、慢病毒过表达空载体对照组、慢病毒敲除空载体对照组、TAP1过表达组和敲除组;蛋白质印迹法(Western blot)和定量聚合酶链反应(qPCR)检测TAP1和MHC-Ⅰ的表达和相互关系;使用Transwell系统检测细胞增殖和侵袭功能;流式细胞检测MHC-Ⅰ在TAP1过表达和敲低的GL261细胞表面的表达;免疫组织化学检测TAP1对肿瘤免疫应答的作用。采用方差分析做多组比较、独立样本t检验做两两比较。结果 TAP1过表达和敲低3种细胞系成功,细胞计数试剂盒(CCK-8)吸光度中G261细胞的增殖每组无变化和侵袭功能通过t检验,差异无统计学意义(t=1.265,df=4,P>0.05);TAP1的过表达和胶质瘤细胞的敲低表明TAP1和MHC-Ⅰ表达t检验,差异有统计学意义(t=4.560,df=4,P<0.05);TAP1过表达和敲低G261细胞与体内存活和CD8+的免疫化学染色相关(t=5.806,df=4,P<0.05);MHC-Ⅰ类在TAP1过表达和敲低GL261细胞表面表达。结论 TAP1可能通过调节CD8+T细胞而成为胶质瘤的关键抑癌基因。
- 陈程李军亮许新科陈伟李方成
- 关键词：抑癌基因胶质瘤
- 人类白细胞抗原I类抗原转运相关蛋白1在胶质瘤组织中的表达及其与抗原转运相关蛋白-2的关系被引量：2
- 2012年
- 目的观察胶质瘤患者肿瘤组织中人类白细胞抗原（HLA）I类抗原及抗原转运相关蛋白（TAP）1、TAP2的表达，探讨其与肿瘤病理级别的关系。方法收集41例经病理确诊的胶质瘤患者肿瘤组织标本，通过免疫组织化学的方法，观察不同病理级别肿瘤标本中HLAI类抗原及抗原加工递呈（APM）分子的表达水平，探讨HLAI类抗原和APM分子表达与胶质瘤患者病理级别之间的关系。结果HLAI类抗原丢失在各级别胶质瘤组织中分别为11％（1／9）、25％（3／12）、30％（3／10）及40％（4／10）。TAPl和TAP2蛋白水平均与胶质瘤分级明显相关（P〈0．05），表达水平随胶质瘤分级增加表达下降。此外，TAP1表达水平与TAP2明显相关（P〈0．05）。结论胶质瘤组织中HLAI抗原和部分APM分子蛋白水平，随胶质瘤级别增加而降低；这可能是导致部分T细胞免疫治疗失败的原因之一。
- 李方成张善义李军亮许新科郑眉光温铖彩余舰翁胤仑
- 关键词：胶质瘤抗原加工病理分级
