国际科技合作与交流专项项目(2009DFA32740)
- 作品数：10 被引量：115H指数：7
- 相关作者：高学文伍辉军乔俊卿谢永丽刘芳更多>>
- 相关机构：南京农业大学青海大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 青海柴达木极端干旱沙地分离芽孢杆菌的分子鉴定及拮抗活性分析被引量：11
- 2012年
- 【目的】研究高原极地环境微生物资源。【方法】采用rep-PCR指纹图谱分析、gyrB基因及16S rDNA基因序列分析等多项分子鉴定技术对分离自青海柴达木极端干旱沙地的8株芽孢杆菌菌株进行分类鉴定;通过平板对峙及接种离体叶片试验检测分离菌株的拮抗活性及对病原菌侵染的防效;采用MALDI-TOF-MS质谱分析生防菌株的活性成分。【结果】8株分离菌株鉴定为Bacillus amyloliquefaciens(6株)、Bacillus axarquiensis(1株)和Bacillus atrophaeus(1株);各菌株对油菜菌核病原真菌(Sclerotinia sclerotiorum)均具有显著的拮抗活性;接种离体叶片试验表明菌株对油菜菌核病菌的侵染具有较好防效;MALDI-TOF-MS质谱分析结果显示菌株DGL1(B.amyloliquefaciens)产生脂肽化合物Fengycin,菌株DGL6(B.axarquiensis)产生脂肽化合物Surfactin、BacillomycinsD和Fengycin,菌株DCD1(B.atrophaeus)产生脂肽化合物Surfactin、Fengycin。【结论】为高原干旱沙地极端环境微生物资源研究及生防菌资源开发和应用提供了研究材料。
- 谢永丽马莉贞徐志伟杜卓高学文
- 关键词：芽孢杆菌分子鉴定
- 表达Harpin蛋白的芽孢杆菌工程菌防治水稻白叶枯病的研究被引量：4
- 2012年
- 本文研究了生防促生芽孢杆菌OKB105、FZB42和以其为宿主菌的可外泌表达Harpin蛋白激发子的基因工程菌OKBHF、FZBHarpin对水稻白叶枯病的防治效果。菌株OKB105、FZB42、OKBHF和FZBHarpin温室防效分别为31.7%、23.6%、43.2%和56.7%;田间防效分别为29.8%、21.8%、40.4%和43.1%,表达Harpin蛋白的芽孢杆菌工程菌的防病效果显著高于出发菌株。两株生防芽孢杆菌及其工程菌对水稻均有良好的促生作用,特别是对水稻植株的生长促进明显,其中FZBHarpin使植株增高达15.86%。田间产量统计结果显示,OKBHF增产效果最显著,为14%,产量达8869 kg·hm-2。工程菌比出发菌株显著提高水稻抗病性和促进植物生长,在农业生产上具有应用的潜力。
- 田大伟乔俊卿王伟舵伍辉军高学文
- 关键词：芽孢杆菌HARPIN蛋白水稻白叶枯病基因工程菌促生作用
- 青海北山林场桦树根围芽胞杆菌分子鉴定及其拮抗活性分析被引量：15
- 2012年
- 自青海北山林场桦树根围分离筛选到芽胞杆菌菌株166株,根据菌落特征分为6个类群,选择其中31株菌株纯化保存并进行BOX-PCR及ERIC-PCR指纹图谱分析、16S rDNA及gyrB基因序列分析,鉴定出球形赖氨酸芽胞杆菌Lysinibacillus sphaericus 12株、解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliq-uefaciens 5株、韦氏芽胞杆菌Bacillus weihenstephanensis 7株、芽胞杆菌Bacillus sp.5株、苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis 2株。通过平板对峙试验筛选得到11株对油菜菌核病原真菌Sclerotiniasclerotiorum具有显著拮抗活性的菌株。以MALDI-TOF-MS质谱分析拮抗菌株QB11的活性成分,可产生脂肽化合物表面活性素和泛革素,表明其拮抗活性与脂肽化合物的合成和分泌有关。
- 谢永丽徐志伟马莉贞高学文
- 关键词：芽胞杆菌分子鉴定
- 油菜菌核病生防芽孢杆菌的分离鉴定及其脂肽化合物分析被引量：32
- 2011年
- 采用平板拮抗筛选,分别从西藏日喀则地区和拉萨地区杂草根围土壤中筛选到2个对油菜菌核病菌有显著拮抗活性的芽孢杆菌菌株RJGP16和YBWC43。通过生理生化鉴定、16S rDNA序列分析和BOX-PCR指纹图谱分析,鉴定菌株RJGP16为萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus,菌株YBWC43为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。离体叶片试验结果显示,菌株RJGP16和YBWC43对油菜菌核病菌防治效果分别为50.24%和100.00%。脂肽化合物种类分析显示,菌株RJGP16产生脂肽化合物表面活性素和芬枯草菌素,菌株YBWC43产生杆菌霉素D和芬枯草菌素。表明菌株RJGP16和YBWC43对油菜菌核病的防治效果与其产生的脂肽化合物有关。
- 薛鹏琦刘芳乔俊卿伍辉军冯致科高学文
- 关键词：油菜菌核病芽孢杆菌RDNA
- 高寒草甸根围拮抗芽孢杆菌筛选鉴定及脂肽化合物分析被引量：18
- 2012年
- 本研究通过平板对峙法分别从青海日月山及达日地区高寒草甸根围分离菌株中筛选到8株对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum及水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae均具有明显拮抗效果的芽孢杆菌菌株RYS41、RYS42、RYS43、RYS44、DR1、DR2、DR3及DR20。生理生化、脂肪酸甲脂、16S rDNA及gyrB基因测序等分析结果表明,菌株RYS41、RYS42、RYS43、RYS44为解淀粉芽孢杆菌Bacillusamyloliquefaciens;菌株DR1、DR2、DR3、DR20鉴定为短小芽孢杆菌B.pumilus。MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,菌株RYS41产生脂肽类化合物Surfactin、Bacillomycins D和Fengycin,菌株DR20产生脂肽类化合物Surfactin、IturinA和Fengycin,推断可能与对油菜菌核菌及水稻白叶枯病菌的拮抗作用有关。
- 谢永丽高学文
- 关键词：芽孢杆菌
- 载Harpin_(Xooc)蛋白纳米粒的制备及生物学效应测定被引量：3
- 2010年
- 为了评价载HarpinXooc蛋白纳米粒的性状及其在农业领域的应用效果,利用静电聚合原理,以壳聚糖为载体,多聚磷酸钠为交联剂制备载HarpinXooc蛋白纳米粒,测定其粒径、zeta电位、包封率、载药量和释放情况,考察振荡时间对纳米粒的影响。结果显示:载HarpinXooc蛋白纳米粒形态均一,粒径、zeta电位、包封率和载药量分别为(270.0±3.0)nm、(16.5±0.9)mV、62.7%±1.8%和12.6%±2.4%,具有缓释效应,可以诱导烟草产生过敏性反应和更好地促进植物生长。表明:此方法制备条件缓和,工艺简单,包封率较高,制得的载HarpinXooc蛋白纳米粒生物学效应好。
- 湛江杨扬宁辉伍辉军高学文
- 关键词：纳米粒理化性质生物学效应
- 芽孢杆菌对大豆根腐病防治效果研究被引量：17
- 2011年
- 选择20株从西藏地区植物根际土壤分离鉴定的具有生防潜力的芽孢杆菌,通过平板抑菌试验,筛选出对大豆根腐病病原菌尖孢镰刀菌嗜管专化型(Fusarium oxysporumf.sp.tracheiphilum)拮抗效果好的菌株11株,并利用这些菌株的发酵液作为活性成分,添加一定比例的各种助剂,制备出生物种衣剂。室内沙培试验结果表明:由萎缩芽孢杆菌LSSC3和枯草芽孢杆菌SYST2制备的种衣剂对大豆发芽及生长都有显著促进作用。用这2种生物种衣剂对大豆进行温室盆栽试验,在接种有病原菌的条件下,由2种生物种衣剂包衣大豆的株高、鲜重、主根长等都显著的高于化学种衣剂包衣和未包衣处理,同时对大豆根腐病也起到了很好的防治作用,防效分别达72.38%和73.69%。
- 朱文静伍辉军高学文
- 关键词：芽孢杆菌生物种衣剂大豆促生
- 丁香假单胞大豆致病变种两个Ⅲ型效应因子的克隆及功能分析被引量：3
- 2011年
- 为了研究Ⅲ型泌出效应因子在丁香假单胞大豆致病变种中的作用,利用反向PCR技术,首次从丁香假单胞大豆致病变种全基因组中克隆得到两个效应因子HopAB1和HopAF1基因的同源物,分别命名为HopAB1s和HopAF1s。生物信息学分析表明,HopAB1s基因全长是1 572 bp,编码523个氨基酸;HopAF1s基因全长是855 bp,编码284个氨基酸。即基因的登录号分别为JF826562和JF826563。保守功能区预测显示HopAB1s在N末端包含一个E3泛素连接酶功能区。将这2个基因克隆到PVX二元表达载体并转化农杆菌,利用农杆菌介导的瞬时侵染技术在本生烟中表达,发现2个效应因子均能抑制由鼠凋亡因子激发的细胞程序性死亡;将烟草疫霉接种在表达效应基因的区域,发现效应因子能促进烟草疫霉侵染烟草,因此本研究得到的两个效应因子是免疫抑制因子,为进一步研究该菌的致病机理奠定基础。
- 张金梅伍辉军高学文
- 关键词：反向PCR生物信息学免疫抑制因子
- 西藏低温适生芽孢杆菌的分离鉴定及其抗菌和促生作用被引量：29
- 2010年
- 从西藏拉萨色拉寺杂草根围土壤中分离到1株低温适生芽孢杆菌LSSC3,对该菌株进行了形态学、生理生化和分子生物学鉴定及抗菌和促生作用研究。菌株LSSC3细胞短杆状,芽孢圆形,10℃条件下生长良好。生理生化特征显示,该菌株与巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium特征一致,但ERIC-PCR指纹图谱分析表明其与B. megaterium模式菌株存在显著差异。16SrRNA基因序列分析结果显示,菌株LSSC3与B. subtilis和B. atrophaeus的系统发育相似性均很高。进一步通过gyrB基因测序和比对,其同源性与B. atrophaeus达到100%,没有找到与B. subtilis的同源性关系。据此,将其鉴定为B. atrophaeus。菌株LSSC3对植物病原真菌和细菌均具有很强的抑制作用,同时对拟南芥有良好的促生长作用。该菌具有耐低温和生防的双重特点,具有在农业生产上应用的潜力。
- 刘芳薛鹏琦乔俊卿伍辉军孙健高学文
- 关键词：抑菌作用促生作用
- 利用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌的突变体文库被引量：16
- 2011年
- 为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用PCR及Southern杂交验证,结果表明:转座子TnYLB-1以单拷贝、随机方式插入到OKB105菌株的染色体上。
- 马欣刘俊乔俊卿伍辉军高学文
