贵州省科技攻关计划(SY[2011]3067)
- 作品数：13 被引量：58H指数：5
- 相关作者：谢渊赵艳周建奖陈娴曾怡更多>>
- 相关机构：贵阳医学院贵阳医学院附属医院贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技攻关计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沉默胃泌素基因抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭被引量：13
- 2014年
- 胃癌细胞分泌的胃泌素与胃癌的发生、发展密切相关.为了探讨胃泌素对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,本文构建靶向胃泌素基因的siRNA表达载体,转染胃癌细胞AGS,成功获得沉默胃泌素基因的稳转胃癌细胞株AGS/Gas-siRNA.用MTT实验、软琼脂集落形成实验、细胞伤愈实验、Transwell实验及ELISA检测沉默胃泌素基因后细胞的增殖、迁移、侵袭及转移相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量.结果显示:与空载体转染的对照细胞比较,沉默胃泌素基因的细胞,其增殖率和克隆形成率显著降低,迁移和侵袭到Transwell下室的细胞数分别降低了31.6%和34%.培养上清液中MMP-2和VEGF含量也低于对照细胞.结果提示,沉默胃泌素基因的胃癌细胞,通过降低MMP-2和VEGF分泌,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭,这可能是胃泌素促进胃癌侵袭转移的机制之一.
- 曾怡周建奖谢渊赵艳
- 关键词：胃泌素胃癌迁移RNA干扰
- 幽门螺杆菌临床株cagA基因克隆及序列分析被引量：4
- 2015年
- 目的分离鉴定临床分离株幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp），分析其CagA蛋白的磷酸化基序EPIYA，探讨东亚株HpCagA序列的结构特点。方法选取胃相关疾病患者的胃黏膜组织，剪碎后接种于哥伦比亚血琼脂平板，微需氧培养，菌落生长后通过尿素酶试验、革兰染色及显微镜检查对Hp进行初步鉴定。提取菌落基因组，PCR扩增HP16SrRNA基因并进行测序鉴定；扩增cagA基因全长序列，连接入pMD18-T载体。将重组质粒转入感受态E．coliDH5a，测序鉴定重组质粒，利用DNAStar和MEGA6软件对cagA序列进行比对及聚类分析。结果成功分离Hp共26株。构建pMD18-T／cagA克隆载体后对26株Hp的cagA基因全长测序，序列比对分析显示有6株为西方型，20株为东亚型。东亚型CagA第815～834位点存在13个氨基酸的缺失、部分缺失或变异，西方型中有3株丢失磷酸化位点EPIYA-C；聚类分析显示Hp分离株分别聚类为东亚群、西方型东亚群以及西方群3群。结论Hp分离株以东亚株为主，但也存在西方株感染；东、西方型CagA在EPIYA基序及侧翼序列显著差异，菌株之间存在聚类关系。
- 熊林陈峥宏刘正美龙妮娅谢渊赵艳官志忠周建奖
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA蛋白聚类分析
- 胃泌素促进胃癌细胞的迁移和侵袭被引量：20
- 2013年
- 目的:研究胃泌素在胃癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法:用细胞划痕实验、Transwell小室迁移和侵袭实验检测10 nmol/L和100 nmol/L胃泌素处理后胃癌细胞AGS和SGC-7901迁移和侵袭能力的变化,MTT法检测细胞增殖能力,ELISA法检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的含量。结果:10 nmol/L和100nmol/L胃泌素处理胃癌细胞后,细胞迁移和侵袭能力增强。对照组、10 nmol/L和100 nmol/L胃泌素组AGS细胞平均迁移数分别为56.0、88.1和106.4/view,SGC-7901细胞平均迁移数分别为52.8、91.0和113.3/view,AGS细胞平均侵袭数分别为78.4、118.7和141.6/view,SGC-7901细胞平均侵袭数分别为87.3、124.6和147.4/view(均P<0.01);100 nmol/L胃泌素组细胞迁移和侵袭能力均高于10 nmol/L组(P<0.05);胃泌素处理后细胞的增殖率及MMP-2的分泌量也显著增加(P<0.05)。结论:胃泌素通过促进MMP-2的分泌以剂量依赖的方式增强胃癌细胞的迁移和侵袭能力,可能是体内胃癌细胞增殖、侵袭和转移的重要机制之一。
- 刘骏周建奖赵艳谢渊
- 关键词：胃泌素胃肿瘤基质金属蛋白酶2
- Transgelin基因与胃癌及癌前病变的相关性研究
- 目的通过检测transgelin基因mRNA在慢性非萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生及胃癌组织中的表达.探讨transgelin基因与胃癌前病变及胃癌的关系。方法收集27例慢性非萎缩性胃炎、12例肠上皮化生、4例非典型...
- 潘科张人弘郑娟黄匀张丹丹蒙韬吴小艳赵艳
- 关键词：胃癌前病变TRANSGELIN实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 幽门螺杆菌诱导的差异蛋白基因在胃癌组织中的表达
- 2012年
- 目的研究幽门螺杆菌(Hp)诱导的差异蛋白基因在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法实时荧光定量RT-PCR检测Hp诱导的乳酸脱氢酶(LDH)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLD)、mRNA前体处理因子19同系物(PRP/PSO4)、ATP合酶和Ran-特异性GTP酶活化蛋白(RanGAP)等差异蛋白基因在70例胃癌组织、淋巴结组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与临床病理参数的关系。结果 LDH、DLD、PRP/PSO4和ATP合酶基因在胃癌组织中的表达量分别是癌旁组织的3.32,3.36,4.37及2.73倍(P均<0.05),在淋巴结组织中的表达量分别是癌旁组织的2.91,2.72,3.16及2.46倍(P均<0.05);LDH、DLD基因表达与肿瘤大小及生存时间、pTNM分期及伴有淋巴结转移有关(P均<0.05),PRP/PSO4及ATP合酶仅与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 LDH、DLD、PRP/PSO4和ATP合酶基因在胃癌及淋巴结组织中高表达,其LDH和DLD的高表达与胃癌患者预后不良相关。
- 徐文杰周建奖赵艳谢渊陈娴
- 关键词：胃癌乳酸脱氢酶ATP合酶
- 胃泌素/CCK-B受体环在多种肿瘤中的表达被引量：2
- 2014年
- 目的:研究胃泌素(GAS)在多种肿瘤中的表达。方法:应用免疫组织化学检测由40例肿瘤组织组成(含87个点)的组织芯片中GAS的表达,同时检测临床相应的肿瘤组织和胃癌细胞SGC-7901、AGS、肺癌细胞A549、肝癌HepG2、乳腺癌细胞MCF-7中GAS和胃泌素受体(CCK-BR)的表达。结果:GAS主要表达于细胞质,组织芯片检测发现GAS在食管鳞状细胞癌、胃腺癌、结肠腺癌、肝细胞性肝癌、肺鳞状细胞癌、乳腺浸润性导管癌中表达;GAS在临床肿瘤标本胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌和胃癌细胞SGC-7901、AGS、肺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2及乳腺癌细胞MCF-7中证实GAS阳性表达,同时发现CCK-BR也在胃癌、肝癌、肺癌和乳腺癌组织及SGC-7901、AGS、A549、HepG2、MCF-7细胞株中表达。结论:GAS和CCK-BR在消化道和非消化道肿瘤中表达,胃泌素/CCK-B受体环可能在胃癌、肺癌、肝癌及乳腺癌中起重要作用。
- 汪闯周建奖谢渊赵艳
- 关键词：胃泌素肿瘤免疫组织化学组织微阵列组织芯片技术
- 过表达胃泌素促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭被引量：8
- 2013年
- 胃癌患者转移淋巴结中胃泌素基因的表达量是原发胃癌组织的42倍,推测胃泌素可能与胃癌转移密切相关.本文通过构建含胃泌素基因的真核表达载体,成功获得过表达胃泌素的稳转胃癌细胞株AGS和SGC-7901,并用MTT、细胞伤愈实验、Transwell小室实验及ELISA检测过表达胃泌素对细胞迁移、侵袭及转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)分泌能力的影响.结果显示,过表达胃泌素稳转细胞的相对增殖率、迁移入细胞致伤区的相对距离比对照组高,迁移和侵袭到Transwell下室面的细胞,以及培养液中每mg蛋白质的MMP-2浓度也高于对照组的细胞.结果提示,胃泌素通过促进胃癌细胞分泌MMP-2来增强细胞的迁移和侵袭能力.该研究对揭示胃癌转移的分子机制具有重要意义.
- 刘骏周建奖谢渊赵艳曾怡
- 关键词：胃癌胃泌素迁移
- 幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠胃癌模型的建立及蛋白质组学研究被引量：11
- 2014年
- 目的：构建幽门螺杆菌（ helicobacter pylori， HP）长期感染的动物模型，寻找与胃癌相关的差异表达蛋白，进一步阐明HP致胃癌的病理机制。方法蒙古沙鼠共50只，雄性，出生4～5周，体质量60～100 g，通过HP长期感染蒙古沙鼠构建动物模型，选择感染后3、6、12及24个月处死沙鼠，取胃组织，进行HP培养，同时用 PCR 扩增HP 16s rRNA基因及组织切片银染法检查HP感染定植情况，病理检查其胃组织病理改变。提取胃组织蛋白进行双向电泳，选取随时间点其蛋白表达呈增加趋势的差异蛋白质斑点进行液相色谱－质谱联用质谱鉴定，并检测差异蛋白基因在人胃癌及淋巴结组织中的表达。结果幽门螺杆菌感染3个月HP开始定植在鼠的胃组织，一直持续到24个月。病理检查可见急性胃炎、萎缩性胃炎、肠上皮化生及胃癌病理表现。蛋白组学分析共得到78个差异蛋白质，其中上调蛋白质36个，下调蛋白质42个，质谱鉴定出10个差异表达的蛋白质，包括乳酸脱氢酶、ATP合成酶、脂肪酸结合蛋白、细胞色素氧化酶C、过氧化物还原酶－4、过氧化物还原酶、transgelin、琥珀酰CoA连接酶、角蛋白－8、二硫化物异构酶A2。其中 transgelin、ATP 合成酶、乳酸脱氢酶基因在人胃癌和淋巴结组织高表达。结论 HP感染可能通过上调 transgelin、ATP合成酶、乳酸脱氢酶等基因的表达参与胃相关疾病的发生发展。
- 赵艳谢渊陈娴徐文杰王妍周建奖
- 关键词：胃肿瘤蛋白质组学
- transgelin基因在幽门螺杆菌感染胃癌细胞及人胃癌组织中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染胃癌细胞及人胃癌、淋巴结组织中转凝蛋白基因（transgelin）的表达水平,探讨HP感染、transgelin基因与胃癌发生、发展的相关机制。方法用HP感染胃癌细胞系AGS和SGC-7901,同时收集胃癌患者手术切除的胃癌组织、切缘组织和淋巴结组织,提取及纯化总RNA。实时荧光定量PCR检测transgelin mRNA的表达水平,分析其与临床病理参数的关系。结果 transgelin mRNA在HP感染的AGS、SGC-7901细胞中的表达量增加,分别为对照细胞的11.39倍（t=30.025,P=0.000）、3.41倍（t=5.677,P=0.005）;transgelin mRNA在胃癌组织、淋巴结组织中的表达增加,分别是切缘组织的6.48倍（t=2.290,P=0.026）、2.64倍（t=2.043,P=0.046）;Ⅳ期胃癌组织transgelin mRNA表达量增加,是Ⅰ~Ⅱ期的2.32倍（t=2.111,P=0.049）;淋巴结转移组是无淋巴结转移组的2.93倍（t=2.123,P=0.043）。结论HP可上调transgelin基因的表达,transgelin基因可能参与胃癌的发生、发展,且与p TNM分期及淋巴结转移相关。
- 赵艳谢渊王文玲陈娴汪苏周建奖
- 关键词：胃癌幽门螺杆菌实时荧光定量聚合酶链反应
- 转凝蛋白基因与胃癌及癌前病变的相关性被引量：1
- 2016年
- 目的探讨转凝蛋白（transgelin）基因与胃癌前病变及胃癌的关系。、方法收集7例慢性非萎缩性胃炎、12例肠上皮化生、4例非典型增生及39例胃癌患者的胃组织，提取及纯化总RNA。采用实时荧光定量PCR测定transgelin mRNA的表达水平，分析其与临床病理参数的关系。结果transgelin mRNA在肠上皮化生、非典型增生及胃癌组织中的表达增加，分别是慢性非萎缩性胃炎组织的4．06倍、73．11倍、13．21倍（均P〈0．05）；IV期胃癌组织transgelin mRNA表达增加，是I～Ⅱ期的2．54倍；淋巴结转移患者胃癌组织transgelin mRNA是无淋巴结转移组的3．35倍（均P〈0．05）。结论transgelin基因可能与胃癌前病变的发生、发展有关，可能是胃癌发生过程中的促进因素。
- 潘科张人弘郑娟黄匀张丹丹蒙韬吴小艳赵艳
- 关键词：胃癌前病变
