安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2007B041)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 相关作者:杨民王剑王强董利军徐祝军更多>>
- 相关机构:皖南医学院弋矶山医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省高等学校青年教师科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠脂肪间充质干细胞体外培养及其分化研究被引量:5
- 2009年
- 目的:建立大鼠脂肪间充质干细胞体外分离培养体系并研究其多向分化潜能。方法:取6周龄大鼠双侧腹股沟和附睾处脂肪,酶解法分离培养原代脂肪间充质干细胞,绘制第三代细胞生长曲线。成脂诱导4 d,成骨诱导培养18 d,分别通过油红O染色、碱性磷酸酶活性检测和钙盐沉积VonKossa染色来观察细胞成脂、成骨表型转化。结果:大鼠脂肪中能分离培养出一定量的脂肪间充质干细胞,其群体倍增时间为(60±3.2)h。在成脂诱导培养液作用下可分化为脂肪细胞;成骨诱导培养液作用下,可特异性表达成骨分化标志碱性磷酸酶,同时也具有矿化细胞外基质的能力。结论:脂肪间充质干细胞具有易于取材、大量分离培养和定向诱导成骨分化的特点,是骨组织工程理想的种子细胞的来源。
- 杨民徐祝军董利军朱劲松
- 关键词:脂肪干细胞
- 重组人血管内皮生长因子121的腺相关病毒载体构建及诱导体内血管生成的实验研究被引量:3
- 2010年
- 目的:构建重组人血管内皮生长因子(VEGF)121的腺相关病毒载体(AAV-hVEGF121),并检测hVEGF121蛋白的表达和体内及体外的生物学活性。方法:AAV-hVEGF121体外转染COS7和人脐静脉血管内皮细胞,免疫组化方法检测hVEGF121蛋白的表达,MTT法测定hVEGF121对血管内皮细胞增殖的影响。将病毒注射到大鼠下肢肌肉中,3周后取材并观察转基因表达和体内血管新生的情况。结果:体内及体外免疫组化检测有hVEGF121蛋白的表达,MTT和组织学标本检测显示hVEGF121蛋白能促进血管内皮增殖并诱导血管新生,且体内应用无明显的副作用。结论:AAV-hVEGF121可安全有效地转染大鼠肌肉组织并诱导新生血管形成,为进一步的组织工程人工骨的血管化研究打下了基础。
- 杨民王强王剑
- 关键词:血管内皮生长因子腺相关病毒
- 富血小板血浆促进脂肪间充质干细胞的体内外成骨
- 2011年
- 背景:添加富血小板血浆可促进细胞体外成骨表型的快速转化,从而有效成骨。目的:观察富血小板血浆对脂肪间充质干细胞体内和体外成骨能力的影响。方法:第3代兔脂肪间充质干细胞进行成骨诱导培养,分为对照组和富血小板血浆组。细胞接种到钙磷陶瓷支架上后,体内外观察细胞/载体复合物的成骨情况。结果与结论:两组细胞随着诱导时间的延长碱性磷酸酶活性增高,达到高峰值后随后逐渐下降,诱导后14d时,富血小板血浆组即达到高峰值,对照组18d达到高峰值。细胞/载体复合体切片VonKossa染色显示两组载体的孔隙内衬面呈多层黑染状,有大量钙盐沉积。甲苯胺蓝染色显示载体的孔隙中可见成熟的骨质存在,周边区域较中心多。体外钙盐沉积对照组多,体内成骨面积富血小板血浆组多(P<0.05)。说明,富血小板血浆可有效诱导脂肪间充质干细胞体内和体外成骨。
- 杨民王剑王强
- 关键词:富血小板血浆脂肪间充质干细胞成骨诱导钙盐沉积