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经咽旁入路选择性切除大鼠垂体前叶的研究被引量：1: 2006年; 目的研究经咽旁入路选择性的切除大鼠垂体前叶,以制备大鼠垂体前叶激素缺乏模型如生长激素(GH)缺乏模型。方法经腹侧咽旁入路,运用显微神经外科技术经基蝶骨底选择性地切除垂体前叶。然后采用竞争免疫沉淀法检测大鼠生长激素的含量,术后统计死亡率、成功率。结果切除垂体前叶后大鼠的死亡率为26．7%,成活率为73．3%,全切率为91%；成功制备大鼠模型的GH显著低于假手术组和对照组。结论运用显微外科技术可以成功的选择性的切除大鼠垂体前叶,制备出垂体前叶激素如生长激素缺乏的动物模型。; 杨孔宾戴钦舜胡志强董齐胡恩喜初明; 关键词：动物模型

垂体性侏儒症的基因治疗与进展: 2001年; 对于垂体性侏儒症 ,目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本文从基因治疗的体外试验。; 杨孔宾胡志强戴钦舜; 关键词：垂体性侏儒症基因治疗生长激素体外试验

基因治疗的安全性评价被引量：12: 2001年; 基因治疗的安全性日益引起重视。基因作为一种全新的药物 ,其安全性的评价具有特异性。; 杨孔宾胡志强戴钦舜; 关键词：基因治疗病毒腺病毒逆转录病毒基因表达

垂体瘤基因治疗的研究进展被引量：2: 2003年; 垂体瘤基因治疗作为一种新兴的治疗方法,可能成为手术切除、放射和药物治疗等传统治疗途径的一种重要补充。本文从垂体瘤基因治疗的腺病毒载体、体外和体内基因治疗的评价、靶向基因治疗和腺病毒基因治疗的副作用等方面的研究进展进行了综述。; 初明胡志强刘恩重; 关键词：垂体腺瘤基因治疗腺病毒载体

多聚物PVP载体人生长激素基因在去垂体鼠体内表达的实验研究被引量：2: 2003年; 目的以人工合成多聚物5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为基因治疗载体,研究人生长激素基因骨骼肌肌肉注射方法在生长激素(GH)缺乏症模型鼠中的表达。方法选用人GH基因的真核表达载体pCEP-hGH与PVP混合,采用不同剂量胫前肌肌肉注射方法,1～4周时取注射部位肌肉,匀浆后采用PCR、RT-PCR方法分别检测hGH载体、hGHmRNA,采用放射免疫法检测血清中hGH。结果构建的真核表达载体经酶切、PCR、测序鉴定正确,各组hGH载体骨骼肌肌肉注射后PCR、RT-PCR均为阳性,100μg、300μg剂量组4周内血清均得到表达,呈缓慢上升趋势。300μg剂量组表达大于100μg剂量组,差异有极显著意义。结论应用PVP作载体,在去垂体鼠内骨骼肌肌肉注射hGH基因,能获得较长期的表达。; 杨孔宾戴钦舜胡志强王超董齐胡恩喜刘恩重; 关键词：人生长激素基因基因治疗

经咽旁入路选择性大鼠垂体前叶切除的研究: 2003年; 去垂体鼠是垂体有关研究非常重要的动物模型,常用于垂体激素尤其是生长激素(GH)的研究.我们采用显微外科技术,经咽旁入路选择性的切除大鼠垂体前叶,成功制备出GH缺乏动物模型.; 杨孔宾胡志强戴钦舜王超董齐刘恩重; 关键词：手术方法

载体因素对非病毒基因治疗体内实验方法的影响被引量：5: 2003年; 目的　探讨非病毒基因治疗方法质粒载体和质粒包装载体对表达效率的影响 ,以获得一种较理想的高表达基因治疗方法。方法　构建多种人生长激素基因真核表达载体 ,分别和脂质体LipofectAMINETM 、多聚物聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)结合 ,大鼠胫前肌肌肉注射 ,1周时放射免疫法检测血清中hGH ,注射部位肌肉匀浆后多聚酶链反应 (PCR)、逆转录 (RT) PCR检测。结果　质粒载体与LipofectAMINETM 、PVP结合后 ,1周时hGH血清均得到表达 ,0 .7～ 1.4μg/L之间 ;PCR、RT PCR均为阳性。hGH表达均显著高于裸露质粒组 (P <0 .0 5 )。结论　非病毒基因治疗骨骼肌注射方法受不同质粒载体的影响 ,与脂质体或人工多聚物结合后能显著提高表达率。; 杨孔宾胡志强董齐初明程玉戴钦舜; 关键词：基因治疗脂质体

生长激素缺乏性侏儒症基因治疗前瞻性研究:重组人生长激素非病毒载体基因治疗体内实验安全性观察被引量：1: 2004年; 目的:研究携带重组人生长激素(hGH)基因非病毒载体pNMG3骨骼肌注射方法的急性期安全性。方法:实验于2001/2002在哈尔滨医科大学神经外科研究所和哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室进行。用纯化裸露质粒pNMG3向幼鼠胫前肌不同剂量单次注射,两周内不同时间RT-PCR检测转录,RI-A检测血清hGH蛋白表达,局部注射部位组织病检,测定血清中谷草转氨酶(GOT)和肌酐检测肝功、肾功。结果:30～480μgpNMG3剂量组肌肉注射两周后RT-PCR,RIA检测结果阳性;7.5～480.0μg剂量组两周后少数见脾组织细胞轻度至中度增多;各组GOT、肌酐无明显变化。120μg剂量组病理检查4h可见肌注部位明显白细胞浸润、脾组织细胞增生,3d时心肌炎性细胞浸润,以上变化随时间延长而减轻,两周后仅少数见脾组织细胞轻度至中度增多。结论:7.5～480.0μg剂量组肌肉注射是安全的;超急性期纯化裸露质粒肌肉注射局部肌肉、心肌、脾受累明显,但是可逆的。; 杨孔宾胡志强王超董齐胡恩喜程玉初明; 关键词：生长激素缺乏侏儒症基因治疗重组人生长激素非病毒载体安全性

大鼠垂体的形态学研究及其细胞分布特点被引量：5: 2003年; 目的　研究大鼠垂体大体、光镜、超微结构下的特点 ,为神经内分泌学研究奠定基础。方法　使用灌注固定、光镜切片计数分析、选择性取材切片的透射电子显微镜技术。结果　大鼠垂体的位置及大体形态与人类迥异 ;光镜计数嗜酸、嗜碱、嫌色细胞各部位的比例不同 ;超微结构表明腺垂体靠近硬膜侧以促甲状腺激素细胞、促肾上腺素细胞多见 ,围绕神经垂体两侧以生长激素细胞为主 ,中间主要是促泌乳素细胞、促生长激素细胞 ,腺垂体的血液供应外侧明显少于内侧。结论　大鼠垂体具有鲜明的自身特点 ,对其形态学的细致研究将与之相关的科研工作打下坚实的基础。; 杨孔宾胡志强戴钦舜程玉杨富明刘恩重; 关键词：垂体细胞分布形态解剖学

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国家自然科学基金(39800050)