四川省教育厅重点项目(2003-A027)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：李昌平钟晓琳万居易王忠琼胡莲更多>>
- 相关机构：宜宾市第一人民医院泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 淤胆血清及肝细胞生长因子体外诱导BMSCs向肝细胞分化被引量：5
- 2010年
- 目的探讨大鼠血清体外扩增BMSCs的可能性,及淤胆大鼠血清和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)体外诱导其分化为肝细胞,解决肝组织工程细胞来源短缺的可行性。方法取6周龄健康雌性Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓细胞,分离、纯化并传代培养BMSCs。取12～14周龄健康Wistar大鼠40只,随机分为两组(n=20),制备正常及淤胆大鼠血清。取第3代BMSCs按培养液不同分组:A组,DMEM加10%FBS;B组,肝细胞生长培养基(hepatocyte growth medium,HGM)加5%FBS;C组,HGM加5%正常大鼠血清;D组,HGM加5%淤胆大鼠血清;E组,HGM加5%淤胆大鼠血清、25μg/LHGF。观察各组诱导培养过程中的细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,免疫细胞化学法检测甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)表达,高碘酸-希夫染色检测糖原表达,脲酶-谷氨酰脱氢酶法检测上清液尿素含量。结果诱导培养过程中D、E组出现多角形及双核细胞,A、B、C组细胞形态无明显变化。MTT生长曲线显示C组细胞生长速度最快,B组最慢,与A、D、E组比较差异均有统计学意义(P<0.05),A、D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。D、E组于诱导培养7d开始出现AFP及CK18阳性表达,14d开始出现糖原阳性表达,同时间点E组阳性表达率高于D组(P<0.05);D、E组上清液中尿素含量随诱导时间延长逐渐升高,同时间点E组高于D组(P<0.05)。各时间点A、B、C组均未见AFP、CK18、糖原阳性表达,尿素浓度无明显变化。结论正常大鼠血清能明显促进BMSCs增殖;淤胆大鼠血清对BMSCs有一定促增殖作用,且能有效诱导其向肝细胞分化;联合使用淤胆血清和HGF能提高细胞分化率。
- 钟晓琳万居易王忠琼胡莲李昌平
- 关键词：肝细胞生长因子BMSCS肝细胞体外诱导
- 瘀胆血清体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导其分化为肝细胞的可行性。方法分离、纯化并鉴定大鼠骨髓MSCs,制备正常及瘀胆大鼠血清,取第3代MSCs分组培养:A组:DMEM+10%FBS;B组:肝细胞生长培养基(HGM)+5%FBS;C组:HGM+5%正常大鼠血清;D组:HGM+5%瘀胆大鼠血清;E组:HGM+5%瘀胆大鼠血清+25μg/L HGF。观察各组细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,采用RT-PCR检测甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白18(CK18)的表达,溴甲酚绿法检测上清液中白蛋白(ALB)的含量。结果培养过程中,D、E组出现多角形及双核细胞,A、B、C组细胞形态无明显变化。生长曲线显示细胞生长速度C组最快,D、E组均较B组快(P<0.05)。D、E组于诱导第7,14天出现AFP mRNA阳性表达,第14,21天出现CK18 mRNA阳性表达,D、E组上清液中白蛋白浓度随诱导时间延长逐渐升高,且E组高于D组(P<0.05)。A、B、C组未见AFP、CK18表达及白蛋白浓度变化。结论正常大鼠血清能明显促进MSCs的增殖;瘀胆血清对MSCs有一定促增殖作用,且能有效诱导其向肝细胞分化,联合使用HGF能提高分化率。
- 钟晓琳万居易王忠琼李昌平胡莲
- 关键词：肝细胞生长因子间充质干细胞肝细胞
