国家自然科学基金(81271732)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 脉冲强磁场诱导体外新生大鼠神经干细胞向神经元方向分化被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨脉冲强磁场对体外新生大鼠神经干细胞（NSCs）向神经元方向分化的作用.方法 体外分离培养新生3d内的SD大鼠脑室下区的NCSs,无血清培养14d后,随机分为实验组和对照组.实验组置于脉冲强磁场条件下用前期探索的促增殖参数（0.1 Hz、4T、8次）进行干预,每次脉冲放电20 ms.对照组置于相同条件下但不做干预处理.干预后第1天,采用10％胎牛血清诱导贴壁分化,显微镜下观察不同时间段细胞形态学变化;贴壁分化后第7天,通过免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法（Western Blot）及实时定量聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测NCSs分化后第7天神经元βⅢ微管蛋白（TUJ1）及星形胶质细胞相关特异性标志神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达.结果 干预后,免疫荧光染色示实验组TUJ1阳性细胞数为（33.4±5.1）％,较对照组[（26.5 ±7.0）％]明显增多（P＜0.05）,实验组的GFAP阳性细胞率[（23.9±5.0）％]较对照组[（36.2±2.2）％]明显减少（P＜0.05）.RT-PCR检测显示,实验组TUJ1的mRNA表达量是对照组的（1.682 ±0.086）倍,GFAP的mRNA相对表达量是对照组的（0.590±0.157）倍,且组间差异有统计学意义（P＜0.05）.Western Blot检测结果与RT-PCR检测一致,实验组TUJ1蛋白表达较对照组增多,GFAP蛋白表达较对照组减少.结论 脉冲强磁场具有促进NCSs向神经元分化,并抑制其向星形胶质细胞分化的作用.
- 蒋婷许涛向威龙兴蓝李冰冰彭涛孙衢骎
- 关键词：神经干细胞脉冲强磁场细胞分化神经元
- Wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促神经干细胞增殖中的作用初探
- 2018年
- 目的:摸索抑制神经干细胞(NSCs)中β-catenin表达的合适条件,为获得抑制β-catenin表达的NSCs做准备。利用抑制β-catenin表达的NSCs,探索wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促NSCs增殖中的作用。方法:取新生的SD大鼠双侧侧脑室下的NSCs,然后用无血清培养基培养14d。利用RNAi原理构建β-catenin shRNA慢病毒载体及阴性慢病毒载体,并转染NSCs,确定合适的感染复数(MOI)值。将NSCs分为阴性组(阴性病毒转染组)和实验组(β-catenin shRNA病毒转染组),并用4T、0.1Hz、8次的脉冲强磁场干预。在用脉冲强磁场干预后的1d、7d,采用CCK8法检测阴性组和实验组的NSCs增殖情况。结果:β-catenin shRNA序列在MOI=10时,对NSCs中β-catenin的抑制效果最好。阴性病毒组在脉冲强磁场干预后1d、7d时NSCs增殖最明显(P<0.05),而实验组在干预前后NSCs增殖水平无明显变化。结论:wnt/β-catenin通路在脉冲强磁场促NSCs增殖中起作用。
- 龙兴蓝许涛邹丽丽蒋婷彭涛孙衢骎
- 关键词：神经干细胞脉冲强磁场增殖RNAIWNT/Β-CATENIN通路
- 脉冲强磁场对新生大鼠神经干细胞β－连接素表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过检测神经干细胞B一连接素基因和蛋白的表达，初步探讨脉冲强磁场（0．1Hz，4T，8次）促神经于细胞增殖的作用机制。结果取新生SD大鼠双侧脑室下区神经干细胞，无血清培养2周，将细胞分成实验组和对照组。实验组的细胞给予0．1Hz4T的脉冲强磁场干预8次；对照组的细胞置相同条件下不行干预。此后第1、3、5和7天，分别用RT—PCR和Westernblot检测两组神经干细胞B一连接素的表达。结果干预后第1、3、5和7天，RT-PCR法显示实验组神经干细胞β一连接素基因表达较对照组明显增高（P〈0．05）；Westernblot也显示实验组神经干细胞β一连接素蛋白表达较对照组明显增高，增高水平在干预后第7天最显著。结论新生大鼠神经干细胞经0．1Hz，4T脉冲强磁场干预8次后，β一连接素在基因及蛋白水平均增高，提示脉冲强磁场（0．1Hz，4T，8次）促神经千细胞增殖的机制可能是通过激活Wnt／13一连接素通路实现。
- 邹丽丽许涛龙兴蓝石磊彭涛
- 关键词：脉冲强磁场神经干细胞
