中国博士后科学基金(2003033120)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 相关作者：靳玉芬郝贵增何宏轩张静胡慧中更多>>
- 相关机构：安阳工学院中国科学院河北师范大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理生物学更多>>
- 猪圆环病毒的分子生物学研究进展被引量：5
- 2007年
- 介绍了PCV的分子生物学特征,认为PCV-1和PCV-2有一定亲缘关系,但也发生了较大的变异。PCV基因组是以滚环模式进行复制,PCV-1基因组的复制依赖于Rep蛋白。叙述了PCV的分子免疫学特征,认为PCV-2感染猪后可损伤猪体免疫系统、引起免疫抑制。从分子流行病学角度得出PCV-2不同分离株的基因组通常比较稳定,但是不同地区的分离株在基因组序列上还是有所改变。对猪圆环病毒的研究提出了新的问题。
- 郝贵增靳玉芬
- 关键词：PCV圆环病毒
- 检测猪圆环病毒2型DNA的套式PCR方法的建立及应用被引量：3
- 2007年
- 为了进一步调查研究PVC2的流行病学及其致病机制,根据猪圆环病毒2型GD株及已发表的PCV2的全基因组序列,对来自广东、广西、湖南、海南等地287个猪场送检的1 560个可疑病料进行PCR扩增,并对扩增产物进行克隆、酶切、测序鉴定,建立了PCV2检测的套式PCR方法。结果表明,PCR扩增获得了预期大小的片断,将测序结果与GenBank收录的PCV2序列进行比较,发现同源性均在90%以上。该PCR方法对PCV2是特异的,并具有良好的重复性和稳定性。用该PCR方法对287个猪场的1 560份样品进行了检测,其中983份为PCV2阳性,表明该病在我国广泛流行。
- 靳玉芬
- 关键词：猪圆环病毒2型套式PCR
- 饼粕发酵蛋白饲喂蛋鸡试验被引量：4
- 2007年
- 将70%棉仁饼和30%菜籽饼混合发酵后制成饼粕发酵蛋白,完全取代蛋鸡饲料配方中的豆饼或鱼粉进行蛋鸡饲喂试验。结果表明:在基础日粮中添加饼粕发酵蛋白分别替代豆饼和鱼粉后,平均产蛋率试验组比对照组分别降低了2.22%和2.21%,平均蛋重分别增加了2.31和2.03 g,投入产出比较对照组分别提高了3.6%和1.68%。
- 靳玉芬
- 关键词：豆饼鱼粉蛋鸡
- 猪圆环病毒1型ORF2基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2007年
- 根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计一对引物,应用PCR方法从PK-15细胞和疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出PCV1ORF2全基因(702bp)。将此基因片段克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒pMD-PCV1-ORF2并对其测序,结果表明:所克隆的PK-15来源和组织病料来源的ORF2基因的同源性为99.4%,二者与Genbank上发表的PCV1ORF2基因的同源性介于97.3%～99.9%,与PCV2-ORF2基因同源性介于67.9%～68.4%,二者编码的蛋白在几个功能区域比较保守;抗原表位预测表明PCV1ORF2编码的蛋白具有良好的免疫原性。
- 靳玉芬郝贵增何宏轩
- 关键词：猪圆环病毒1型ORF2基因克隆
- 人热休克蛋白70基因的克隆、表达及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的克隆人热休克蛋白70(HSP70)基因,构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆,提取质粒pE28b70F,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70,表达量约占细菌总蛋白的22·3%,其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12%。Westernblot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni2+-NTA亲和柱,从1L诱导产物中纯化出约1520mg重组蛋白,纯度在80%以上。结论已成功表达HSP70,为进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了基础。
- 胡慧中柏佳宁张静何宏轩段明星
- 关键词：热休克蛋白基因克隆原核表达
- PCV2套式PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2007年
- 根据猪圆环病毒2型GD株及已发表的PCV2的全基因组序列,设计1对PCV2型特异性引物,对可疑病料进行PCR扩增。将扩增产物连接到pMD 18-T载体上并克隆到大肠杆菌DH5α中,提取质粒进行套式PCR、酶切、测序鉴定,结果扩增出了PCV2的目的片段。将测序结果与GenBank收录的PCV2序列进行比较,发现同源性均在90%以上。用该PCR方法对287个猪场的1 560份样品进行了检测,其中983份为PCV2阳性,阳性率为63%。
- 靳玉芬郝贵增何宏轩
- 关键词：猪圆环病毒2型套式PCR克隆PCR检测
