吉林省科技发展计划基金(20075024)
- 作品数：3 被引量：49H指数：3
- 相关作者：赵建军闫喜军吴威陈涛钱爱东更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所吉林农业大学生物技术有限公司更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 犬细小病毒:从起源到进化被引量：37
- 2011年
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较高的发病率和死亡率。该病原爆发后短短一年时间内即广泛流行到世界各地。随着CPV-2对宿主的适应和变异,新抗原变异型(CPV-2a、CPV-2b和CPV-2c)不断产生并在世界各地逐步替代了CPV-2的流行。伴随CPV-2抗原变异的同时,其对宿主(犬、猫)嗜性、毒力等生物学特性也随之改变。本文综述了CPV-2过去30多年在世界流行和变异情况,并探讨了基因变异在病毒跨宿主传播中的意义。
- 赵建军闫喜军吴威
- 关键词：犬细小病毒进化抗原变异
- 水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：6
- 2009年
- 为了对水貂肠炎病毒(MEV)疫苗免疫后抗体水平的监测和疫苗免疫效力的评价,本研究在分析MEV VP2蛋白抗原性的基础上,设计1对特异性引物克隆VP2蛋白抗原性较好的基因片段,将克隆的基因片段定向插入到pProEXHTb原核表达载体中,构建了VP2基因原核表达重组质粒pProEXHTb-VP2A,并实现在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,经鉴定表达的重组蛋白以包涵体形式存在,免疫印迹试验表明获得的重组蛋白具有与抗体较好的反应原性。应用His·Bind亲和层析柱纯化重组蛋白VP2A,以纯化后的重组蛋白作为ELISA诊断抗原,并对反应条件进行优化,初步建立了检测MEV抗体的VP2A-ELISA方法。确定了抗原最佳包被浓度为9.65μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶10。判定标准为S/P值≥0.312为阳性,S/P值≤0.243为阴性,介于两者之间为疑似。该抗原不与犬瘟热病毒、阿留申病毒阳性血清反应,具有良好的特异性。采用VP2A-ELISA对180份水貂血清样品进行检测,结果显示VP2A-ELISA与HI试验的符合率达到87.8%,表明建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,为现地免疫貂群抗体检测和MEV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。
- 陈涛赵建军张海玲柴秀丽闫喜军吴威钱爱东
- 关键词：水貂肠炎病毒原核表达间接ELISA
- 水貂肠炎病毒B株全基因克隆与序列分析被引量：6
- 2010年
- 将水貂肠炎病毒基因组分4个重叠片段进行PCR扩增,并将产物克隆到pMD18-T载体中,测定基因组近全长序列。其中编码水貂肠炎病毒非结构蛋白基因(NS1基因)全长为2 007 bp,编码668个氨基酸;编码结构蛋白基因(VP2基因)全长为1 755 bp,编码584个氨基酸。序列分析结果表明:水貂肠炎病毒B株与犬细小病毒、猫泛白细胞减少症病毒NS1序列之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.8%～99.2%和98.8%～99.2%,与其他细小病毒毒株VP2序列之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.5%～99.8%和97.8%～99.5%,与MEVantigenic type 2株在亲缘上有着最密切关系。
- 陈涛赵建军张海玲吴威钱爱东闫喜军
- 关键词：水貂肠炎病毒NS1基因VP2基因
