国家自然科学基金(30370750) 作品数:8 被引量:44 H指数:5 相关作者: 张远强 赵洁 侯武刚 赵勇 马静 更多>> 相关机构: 第四军医大学 第四军医大学唐都医院 第四军医大学西京医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
小鼠生精周期判定方法的改进 被引量:7 2006年 目的探讨一种可以在普通HE染色或苏木精复染标本上对精子发生周期进行简单划分的方法。方法应用PAS染色法与普通HE染色法相对照,对比观察小鼠睾丸各级生精上皮在精子发生不同时期的形态学变化特点。结果参照Clermont及Russel等制定的生精上皮时相的判定标准,把小鼠生精上皮分为XⅡ个期。结论通过对比总结,可以在普通HE染色或苏木精复染标本上对精子发生周期进行简单划分,并进一步辨别各型生精细胞。 赵洁 侯武刚 张远强关键词:精子发生 精子形成 顶体 小鼠 睾丸 电磁脉冲辐射对小鼠睾丸Smads表达的影响 被引量:2 2006年 探讨转化生长因子-β(Transforminggrowthfactor-β,TGF-β)超家族细胞内信号转导分子Smads在电磁脉冲辐射后成年小鼠睾丸中的表达变化及其意义。采用场强为400kV/m的辐射场对成年Balb/c小鼠进行全身照射,于照射后1、7、14、21、28d分别取小鼠睾丸组织制备标本,免疫组织化学ABC法检测Smad4、Smad1和Smad5的表达及变化,并通过图像分析系统以及统计学软件对实验结果进行统计学分析。结果显示辐射组小鼠Smad4、Smad1和Smad5在睾丸中的表达部位发生了细胞和时期特异性的变化,表达强度也发生了显著变化。结果提示Smad4、Smad1和Smad5及其介导的信号转导通路在小鼠睾丸辐射损伤及其修复过程中可能发挥了重要作用。 纪欣欣 侯武刚 赵洁 赵勇 李伟 张远强关键词:SMADS 骨形成蛋白 电磁脉冲 小鼠 睾丸 转化生长因子β及其受体在小鼠精子发生过程中的表达 被引量:5 2006年 目的观察转化生长因子β(TGFβs)及其受体(TGF-βR)在小鼠睾丸中的表达,证实TGFβs及其受体在小鼠精子发生过程中的定位和作用机理。方法免疫组织化学染色结合显微图像定量分析和免疫荧光双重染色。结果免疫组织化学显示:TGFβ1和TGFβ2主要表达于生精小管内Ⅵ-Ⅷ期圆形精子细胞以及长形精子细胞和变态精子细胞的胞质,位于睾丸间质中的Leydig细胞胞质呈弱表达;TGFβ3仅表达于Leydig细胞,各级生精细胞未见表达。晚期精母细胞(Ⅷ期)至第Ⅹ期长形精子细胞均表达TGFβ-RⅠ;TGFβ-RⅡ仅表达于第Ⅺ期后的变态精子细胞期;而TGF-βRⅢ则主要表达于Ⅶ-Ⅷ期圆形精子细胞和变态精子细胞胞质。免疫荧光双重染色显示:TGFβ1和TGFβ2与TGF-βRⅢ在生精上皮最早共表达于晚期圆形精子细胞顶体极。结论TGFβs及其受体在小鼠精子发生过程中的表达具有细胞和周期特异性,提示其在精子发生中具有重要意义。 侯武刚 张远强 赵洁 赵勇关键词:转化生长因子Β 转化生长因子Β受体 免疫组织化学染色 睾丸 小鼠 Smad1、Smad5在肾阳虚不育大鼠睾丸中表达的研究 被引量:6 2005年 目的: 观察Smad1、Smad5在腺嘌呤诱导的肾阳虚不育大鼠睾丸中的表达,探讨肾阳虚不育的病理机制,为防治男性不育提供可靠的实验依据。 方法: 60d雄性SD大鼠 48只,随机分为 6组(肾阳虚 7、14、21d组;正常对照7、14、21d组),每组 8只。以腺嘌呤 300mg/kg给大鼠灌胃,诱导肾阳虚不育大鼠模型,于灌胃第 7、14、21d,用免疫组化SABC法测定Smad1、Smad5在其睾丸中的表达。 结果: Smad1表达见于所有正常对照组及模型组大鼠睾丸各级生精细胞的胞质内,支持细胞及间质细胞未见表达;灌胃第 7、14d与正常对照组相比差异无显著性(P>0. 05),第 21d的表达较正常对照组及第 7、14d明显减弱(P<0. 05)。Smad5表达见于正常对照组及腺嘌呤灌胃第 7d大鼠睾丸的初级精母细胞及精原细胞的胞核内,两组比较差异无显著性(P>0. 05),其余各级生精细胞、支持细胞及间质细胞均未见表达;灌胃第 14、21d大鼠睾丸中未见Smad5表达。 结论: 肾阳虚大鼠睾丸中Smad1表达的减弱及Smad5的无表达,可能是导致其不育的病理机制之一。 马静 张远强 王宗仁 孙岚关键词:不育 肾阳虚 SMAD1 SMAD5 睾丸 Ghrelin在正常及X线辐射损伤小鼠睾丸中的表达 被引量:4 2006年 目的探讨ghrelin在正常及X射线辐射损伤后小鼠睾丸中的表达变化及其意义。方法采用辐射剂量1·0GyX线对成年小鼠进行全身照射,于照射后16h取睾丸组织制备标本,免疫组织化学ABC法检测ghrelin在辐射损伤小鼠及正常对照组小鼠睾丸中的表达,探讨ghrelin表达的变化及意义。结果正常小鼠睾丸ghrelin主要表达在间质细胞的胞浆中,呈强阳性。X线照射后16h,ghrelin的表达主要集中于生精小管内各级生殖细胞中,特别是在精原细胞和初级精母细胞中有强阳性反应,且其表达具有生精周期特异性,而间质细胞中呈阴性。结论Ghrelin在小鼠正常及辐射损伤睾丸中的特异性表达和变化,提示其可能与睾丸精子发生、精子形成及辐射损伤修复有关,具有重要的睾丸生物学调节功能。 王艳梅 赵勇 赵洁 张金山 苗乃周 张远强关键词:GHRELIN 睾丸 小鼠 免疫组织化学 电磁脉冲照射后小鼠睾丸生精细胞凋亡与Smad4表达变化的关系 被引量:3 2007年 探讨Smad4与电磁脉冲照射后小鼠睾丸生精细胞凋亡的关系。采用场强为400kV/m的电磁脉冲照射对成年Balb/c小鼠进行全身照射,于照射后1d、7d、14d、21d、28d分别取小鼠睾丸组织制备石蜡切片;运用常规苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE staining)和原位末端标记术(Terminal deoxynucleotidyl transferase–mediated dUTP nick end labeling method,TUNEL)观察各照射组及对照组小鼠睾丸生精细胞的凋亡情况;免疫组织化学ABC法观测照射后Smad4在照射组睾丸内表达强度及分布的变化。HE染色显示照射后1d即可见大量凋亡与坏死生精细胞向管腔排放,至照射后28d生精小管结构基本恢复正常;免疫组织化学结果显示Smad4于照射后在生精小管中出现强阳性表达,照射后7d、14d、21d在间质细胞胞质表达强度较对照组显著降低(p<0.05);TUNEL结果显示照射后各时间组生精细胞凋亡数量较对照组明显增加(p<0.01)。结果提示Smad4及其介导的TGF-β/Smad信号通路可能在电磁脉冲照射后睾丸生精细胞凋亡过程中发挥重要作用。 纪欣欣 侯武刚 赵洁 赵勇 李伟 张远强关键词:凋亡 SMAD4 转化生长因子Β 生精细胞 电磁脉冲辐射对小鼠睾丸血-睾屏障的影响 被引量:16 2005年 采用常规苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE staining)、硝酸镧示踪电镜和埃文思兰 (Evans Blue,EB)尾静脉注射三种方法,综合观察100kV/m和400kV/m两种不同强度电磁脉冲辐射对小 鼠睾丸血-睾屏障的影响。三种方法观察结果基本一致,两种强度的电磁脉冲辐射均可造成小鼠睾丸支持细胞和 血一睾屏障不同程度的损伤,400 kV/m辐射组损伤更甚,辐射后1 d即可见大量生精细胞的凋亡与坏死,支持细 胞亦发生形态结构的变化,血-睾屏障严重损伤,随后大量第Ⅷ期生精小管内出现基底室与近腔室的分离,大量 凋亡与坏死的生精细胞向管腔的排放,至辐射后21d仍可见到血-睾屏障损伤;100kV/m辐射组的损伤较 400 kV/m辐射组稍轻,辐射后14 d支持细胞、生精上皮以及血-睾屏障的损伤已基本恢复。结果提示一定强度 的电磁脉冲可以造成小鼠血-睾屏障的损伤,这种损伤呈辐射强度依赖性,并且与损伤后恢复时间相适应。 侯武刚 赵洁 张远强 曾丽华 郭国桢关键词:支持细胞 硝酸镧 睾丸 X射线全身照射对成年小鼠睾丸Smad4表达的影响 被引量:9 2005年 探讨转化生长因子-β超家族细胞内信号转导分子Smad4在X射线全身照射后小鼠睾丸中表达变化及其意义。采用不同辐射剂量0.1Gy、0.5Gy、1.0Gy、1.5Gy和2.0Gy对成年BALB/c小鼠进行全身照射,于照射后16h、1周、2周、3周、4周分别取小鼠睾丸组织制备标本,免疫组织化学ABC法检测Smad4的表达及变化,并通过图像分析技术对实验结果进行统计学分析。正常小鼠睾丸Smad4的阳性表达主要集中在间质细胞,支持细胞有少量表达,生精细胞呈阴性反应。照射后各时间点Smad4在间质细胞的表达明显减少;而Sertoli细胞的表达随剂量增加和时间延长均无明显变化。照射后16h2.0Gy组,Smad4在生精小管的减数分裂前生精细胞内出现少许表达,从第2周起,1.0Gy和1.5Gy组生精细胞内也出现少量表达;第3周,各照射剂量组Smad4在减数分裂前精原细胞和精母细胞内呈强阳性反应,持续至第4周。统计学分析,随辐射剂量增大,观察时间延长,Smad4在减数分裂前生精细胞内的表达量逐渐增加。Smad4在小鼠睾丸不同剂量全身辐射后不同时间点表达及分布的变化,表明Smad4及其介导的TGF-β/Smad信号转导通路参与了小鼠睾丸辐射损伤及损伤修复过程。 朱华萍 张远强 齐宇红 赵洁 赵勇 马静 候武刚关键词:转化生长因子-Β SMAD4 X射线 睾丸