重庆市卫生局科研项目(2008-2-231)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：邓诚季平邹波孙守娟刘凯更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用T7噬菌体展示技术构建人舌鳞癌细胞多肽文库被引量：2
- 2010年
- 目的:本研究拟构建人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为进一步筛选和鉴定与舌鳞癌相关的蛋白或多肽打下基础。方法:人舌癌细胞株Tca8113,QiaGen法提取细胞mRNA,逆转录合成双链cDNA后与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到T7噬菌体展示多肽文库。结果:构建了人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,原始文库重组滴度为鳞癌1.7×106 pfu,扩增后滴度为3×1010 pfu/mL。随机从文库中抽取10个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示构建的文库中均有插入片段,文库插入率高达100%。所构建的文库插入片断大小在(0.4～1.0)kbp之间。结论:成功构建了人舌癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为下一步筛选和鉴定与舌癌相关的蛋白或多肽奠定了基础。
- 王景涛季平邓诚伍明毅刘凯孙守娟邹波
- 关键词：噬菌体展示人舌鳞癌TCA8113
- 无血清悬浮培养舌鳞癌Tca8113细胞系及肿瘤干细胞样亚群筛选被引量：1
- 2011年
- 目的:比较有血清培养基(Serum-supplemented medium,SSM)培养的细胞中和无血清培养基(Serum-free medium,SFM)培养的肿瘤干细胞球体中肿瘤干细胞样亚群的比例,以期获得较好富集肿瘤干细胞的方法。方法:SFM培养细胞,观察形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态;更换培养基为SSM诱导其分化;流式细胞仪检测SSM组细胞和SFM培养的肿瘤干细胞球分化前、后醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase,ALDH)的表达。结果:Tca8113细胞能在SFM中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球;SFM和SSM培养的细胞中ALDHhigh细胞比例分别为0.297 0±0.009 0和0.010 7±0.002 5,差异有统计学意义(P<0.05);诱导分化后细胞与SSM组细胞形态上无明显差异。结论:用SFM培养舌鳞癌Tca8113细胞可形成肿瘤干细胞球,而且这种细胞球富集了肿瘤干细胞。
- 孙守娟季平邹波邓诚杨晶
- 关键词：舌鳞癌TCA8113醛脱氢酶
