国家自然科学基金(39570549)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- 伊氏锥虫HGPRT基因的RT-PCR扩增及克隆被引量：2
- 2000年
- 参照布氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 ( HGPRT)基因的核苷酸序列 ,设计合成了 1对引物 ,引物间距为 63 0 bp,包含完整的 HGPRT基因。以伊氏锥虫湖北水牛株总 RNA为模板进行 RT-PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳显示 ,获得 1条长约 63 0 bp的特异性条带 ,符合设计要求。扩增片段克隆于 p GEM-T Easy载体 ,经筛选鉴定 ,证明已获得了 HGPRT基因阳性克隆。核苷酸序列分析表明 ,克隆的 HGPRT基因在重组质粒中的连接向位和阅读框架是正确的。二级结构和疏水性分析表明 ,HGPRT基因产物具有复杂的空间结构 。
- 刘全王祥生王德昭吕茂民余兴龙
- 关键词：伊氏锥虫HGPRTRT-PCR抗原性基因克隆
- 多价伊氏锥虫灭活疫苗制备及免疫保护试验
- 2001年
- 用湖北株、广西株和江苏株伊氏锥虫经体外培养增殖 ,再等量混合 ,制备多价伊氏锥虫灭活苗。疫苗免疫接种小鼠后 ,再分别用强毒湖北株、广西株和江苏株伊氏锥虫攻击 ,结果 3组小鼠均获 1 2 /1 2保护。免疫保护鼠于免疫后 1 0 5d时 ,再作第二次攻虫 ,结果湖北、广西和江苏组分别获得 1 /5,3/5,4/5保护 ,对照组小鼠均 1 0 0 %发病死亡。结果表明多价伊氏锥虫灭活苗对多种虫株均产生了良好免疫保护作用 ,免疫期达 3个月 ,从而为大面积推广伊氏锥虫疫苗提供了有效途径。
- 王祥生刘全王德昭于艳
- 关键词：伊氏锥虫多价灭活苗免疫保护小白鼠疫苗
- 伊氏锥虫HGPRT缺陷株和自然株的HGPRT基因的分离、克隆与比较
- 2000年
- 参照布氏锥虫 HGPRT基因的核苷酸序列 ,设计一对引物 ,分别以伊氏锥虫 HGPRT缺陷株和自然株的总 RNA为模板进行 RT—PCR扩增 ,结果自然株出现 630 bp的 DNA条带 ,与设计大小一致 ,而缺陷株均为阴性 ,证明缺陷株的 HGPRT基因发生明显突变或缺失。自然株 HG-PRT基因经与 p GEM- T Easy Vector连接 ,大肠杆菌转化 。
- 王祥生刘全王德昭
- 关键词：伊氏锥虫克隆
- 家畜伊氏锥虫灭活苗制备及免疫研究观察被引量：2
- 2000年
- 4种佐剂制备的伊氏锥虫灭活苗 ,通过小鼠免疫筛选试验 ,发现Ⅳ号佐剂苗安全性好 ,免疫原性强 ,ES抗原在免疫保护中起重要作用。用Ⅳ号佐剂制备的湖北、江苏、广西株伊氏锥虫灭活苗 ,通过小鼠和家兔 2次免疫 ,对同株虫体的攻击小鼠分别获得 2 0 / 2 0、12 / 12和 2 0 / 2 0的保护 ,并耐受第 2、第 3次攻击 ,免疫期长达 3～ 5个月以上。家兔获得 7/ 8保护 ,体重明显增加 ,中和凝集抗体效价 1∶10～ 80倍。对照小鼠。
- 王祥生刘全刘俊华王德昭
- 关键词：伊氏锥虫灭活苗家兔免疫接种
